结核分枝杆菌融合蛋白Mtb10.4-Hsp16.3的构建.表达和纯化方法及其应用

生物、医药及医疗机械

本发明选择结核杆菌生长期和休眠期主要的保护性抗原Mtb10.4 和Hsp16.3，构建融合蛋白Mtb10.4-Hsp16.3（MH）。在大肠杆菌中表 达纯化该蛋白，将该蛋白和佐剂混合构建亚单位疫苗，分别于BCG初 免后12、14周加强免疫C57BL/6小鼠两次，最后一次免疫6周后检测细 胞免疫反应，最后一次免疫后10周进行结核菌毒株H37Rv攻击。结果： 该融合蛋白能在大肠杆菌中稳定大量表达，经离子交换层析、凝胶过 滤层析和疏水层析三步纯化得到纯度较高的蛋白；构建的亚单位疫苗 免疫动物可产生

试用

毒株攻击后，小鼠肺脏结核菌数量明显少于PBS组和BCG组。