固定化重组头孢菌素脱乙酰酶生产

本项目利用重组大肠杆菌异源表达来自枯草芽孢杆菌中的CAH基因，发酵生产头孢菌素

脱乙酰酶蛋白。由于重组蛋白表达量高，采用简单的硫酸铵分级沉淀方法即可达到很好的纯化

效果，极大程度地缩减了蛋白纯化的成本。

在工业应用中，将游离酶固定在载体上可以实现多次重复利用，产物分离容易，可以连

续操作。在众多固定化酶方法中，由于制备的固定化酶稳定性好，共价结合的方法在工业中最

为常用。本项目采用共价结合的固定化方法，在温和条件下将游离酶连接在亲水性环氧基载体

上，得到的固定化酶活力回收高，稳定性好，重复使用次数高。已完成整条工艺流程。重组大肠杆菌发酵生产CAH蛋白进入中试阶段，通过优化培养条

件，发酵培养基等工作，降低生产成本，提高产酶量。目前完成的蛋白纯化及固定化酶制备工

艺，对产品的性能已通过相关的实验得到很好的评价结果。在不断完善发酵和固定化酶制备工

艺后，即可以进一步扩大生产试验规模，从而应用于工业生产。