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一种体外长期稳定培养鸡胚胎干细胞的方法
本发明公开了一种体外长期稳定培养鸡胚胎干细胞的方法。本发明提供了鸡胚胎干细胞的体外培养基,为在基础培养基中添加碱性成纤维细胞生长因子、干细胞因子和白血病抑制因子得到的培养基;所述碱性成纤维细胞生长因子、所述干细胞因子和所述白血病抑制因子在所述体外培养基的配比为1:1:1。本发明首次利用可传代的鸡胚成纤维细胞系DF‑1细胞系作为饲养层,通过外源添加人碱性成纤维细胞生长因子(hbFGF),重组小鼠干细胞因子(mSCF)和人白血病抑制因子(hLIF)三种细胞因子,从而可以实现在体外长期、稳定培养鸡胚胎干细胞且维持其自我更新能力。
中国农业大学 2021-04-11
揭示转录因子Sox2调节体细胞重编程的新机制
揭示了转录因子Sox2同时结合DNA和RNA并协同调控体细胞重编程的新机制,着重强调了在体细胞重编程过程中Sox2与RNA的直接相互作用的功能。通过PAR-CLIP和RNA SELEX确认了Sox2与RNA直接相互作用,进一步的测序分析发现Sox2偏好性结合一个CCCY核心基序和一个CGCG的二级基序。随后,研究人员利用EMSA和RNA免疫沉淀(RNA-immunoprecipitation assay)等手段确定了Sox2的RNA结合结构域(RBM),该结构域具有优先结合富含GC的RNA序列的特征。另外,通过RNA fishing实验和竞争性结合实验等的进一步分析,发现在DNA和RNA共同存在的情况下,Sox2使用其HMG结构域结合同源DNA序列,并同时利用RBM结构域在体外介导三元RNA/Sox2/DNA复合物的形成。除此之外,通过比较Oct4、Klf4、c-Myc (OKM)“鸡尾酒”以及不同Sox2突变体诱导下iPSC生成的效率发现,删除Sox2 的RBM结构域会影响iPSC的生成,并且显著地改变了体细胞重编程过程中的选择性剪接事件。       该研究加深了人们对Sox2蛋白调控多能性重编程机制的理解,进一步阐明了DRBPs对RNA代谢的调控机制。
中山大学 2021-04-13
超声波改变湿藻细胞分形结构促进油脂萃取的方法
本发明涉及生物质能利用技术,旨在提供一种超声波改变湿藻细胞分形结构促进油脂萃取的方法。该方法包括:收获分形维数为1.21~1.24、细胞壁厚度为0.07~0.08μm的湿藻,然后进行超声波辐照改性,控制超声波辐照功率和时间使湿藻中细胞的分形维数上升为1.46~1.51,细胞壁厚度减小为0.04~0.06μm;向处理后的湿藻中加入萃取剂,进行油脂萃取;所述湿藻细胞是指含水率在10~90%的微藻细胞的集合体。本发明利用超声波改变湿藻细胞分形结构促进油脂萃取,省去了传统方法中湿藻细胞的脱水干燥等高能耗步骤,通过提高藻细胞分形维数和降低细胞壁厚度,使萃取剂对细胞内油脂的萃取效率提高到85-90%。
浙江大学 2021-04-13
一种具有三维表面微结构的细胞培养装置
本实用新型公开了一种具有三维表面微结构的细胞培养装置。包括载片、壳体、微结构和微流道系统;壳体置于载片上,壳体底面开口并在开口周围与载片相封接形成作为细胞培养室的内腔,细胞培养室内设有微结构和微流道系统,微结构贴附在载片上,微流道系统包括进口、出口和微流道,微流道设置在微结构周围的壳体内底面或者载片上表面,进口和出口设置在微结构两侧的壳体上,进口和出口分别经各自的微流道连通细胞培养室中的微结构。本实用新型装置能模拟细胞分布规律的培养环境,减少细胞接触抑制,具有操作简单,细胞植入便捷等特点,能实现快速、高效的细胞培养。
浙江大学 2021-04-13
富血小板血浆复合脂肪干细胞 促进脂肪移植存活的技术方法
先天发育畸形、肿瘤切除、创伤、难愈性伤口等因素导致的软组织缺损对患者的外形容貌、生活质量等都有严重影响;由于具有来源丰富、取材方便、安全可靠、成本低廉、无免疫排斥反应等优点,自体脂肪移植至今仍然是软组织缺损修复和重建的常用方法。然而,脂肪移植的远期吸收率较高,可达60%以上,这极大地影响了软组织修复的远期疗效,从而限制了脂肪移植在临床的广泛应用。研究表明,移植脂肪组织吸收率较高的原因主要有微循环不能及时建立导致早期血供不足,组织中脂肪细胞凋亡、去分化等导致成熟脂肪细胞数目减少。近年来,随着细胞治疗的出现,越来越多的研究将干细胞应用于脂肪移植。脂肪干细胞(Adipose-derived stem cells, ASCs)是较理想的可应用于脂肪再生和脂肪移植的种子细胞。富血小板血浆(platelet-rich plasma, PRP)是全血经过多次差速离心后的产物。除了高浓度的血小板,PRP激活后还可释放多种、大量的对细胞增殖、组织修复与再生等具有重要作用的生长因子。因此,越来越多的研究将PRP应用于组织修复和再生。针对脂肪移植后成活率低的问题,考虑到ASCs和PRP的诸多优势,本项目致力于研究了PRP复合ASCs对脂肪移植的影响,并进一步探索获得PRP促进脂肪移植存活的最佳用量等基础数据,有望为临床自体脂肪移植技术的改进提供了参考。
四川大学 2016-04-29
转基因骨髓间充质干细胞结合支架修复退变椎间盘技术
已成功构建Ad-GDF-5和Ad-GFP;已成功构建小肠粘膜下层和壳聚糖-聚己酸内酯支架;目前已完成动物椎间盘退变模型的制作,间充质干细胞的提取,分离,培养和鉴定;已制备转基因MSCs,完成转基因MSCs的细胞特性,其和支架之间的相互影响。
四川大学 2016-04-26
一种利用乳酸菌静息细胞发酵生产γ-氨基丁酸工艺
本发明公开了乳酸菌静息细胞发酵生产γ-氨基丁酸(GABA)工艺,利用经过诱导的乳酸菌活性静息细胞体,分散于含有底物的转化缓冲液中,在合适的条件下转化生产γ-氨基丁酸。利用该方法可以大幅度缩短转化时间,提高转化效率,产物成份简单,利于分离提纯。且转化无需无菌条件,设备要求简单,耗能低。经条件优化,本工艺已适合工业化生产。附图说明:附图2为pH对乳酸菌株的生长与发酵生产GABA的影响(▼生长影响;▲发酵影响)。
四川大学 2016-10-26
奥华液基薄层细胞制片机染色机64通道
主要特点1、微电脑自动控制,中文界面,液晶显示,触摸屏操作,简捷、直观、方便。全程电脑自动控制,无需人工干预。2、每张标本独立沉降制片、独立固定、独立染色。独立分化、独立返蓝、独立倾倒废液,标本与耗材(一次性移液针筒、沉降仓等)一一对应,不交叉使用,不反复使用,保证单独制片染色,无标本间交叉污染。3、一次性移液针筒抽取染色液、盐酸酒精,无堵塞管道、腐蚀管道风险,染色液无浪费。4、随着季节温度变化,仪器自动检测温度并自动调整染色时间,保证最佳染色效果。(此功能可选择)5、有效细胞单层、均匀地平铺到载玻片圆形区域上,制成细胞成分丰富、背景清晰、颜色鲜艳、形态完整、分布均匀的细胞涂片。6、上皮细胞、化生细胞、颈管细胞及微生物等清晰,既可直接查癌及癌前病变,也可查炎症,HPV感染、滴虫、霉菌等微生物。7、配有净化排气装置,环保密封罩活性炭过滤,吸附有害气体,保证仪器内外空气洁净,保护操作者健康。8、单次制片染色1-64任意数值只标本;9、巴氏、HE两种染色方式,一键切换。10、妇科、非妇科1、非妇科2三种工作模式,一键切换。
孝感奥华医疗科技有限公司 2025-01-20
半导体辅材用多晶硅中碳、氮杂质的分离去除技术
伴随着我国半导体行业的迅速崛起,硅电极作为光刻设备上承载硅基圆的重要辅材,其需求日趋增加。同时,基圆尺寸的不断增加使得硅电极逐渐由单晶硅电极转变为多晶硅电极,然而多晶硅制备过程中不可避免存在C、N杂质的污染,导致其基体中存在大量弥散分布的SiC、Si3N4硬质颗粒夹杂,严重影响了多晶硅电极的使用性能。 传统制备技术下,设备热场结构单一,熔体流动性差,导致SiC、Si3N4杂质循环溶解—析出,难以有效分离。本项目团队前期利用电子束精炼技术去除硅中的蒸发性杂质(P、 O、N);利用电子束诱导实现多晶硅的定向凝固,进而分离硅中的金属杂质;基于电子束冷床效应分离硅中的SiC、Si3N4硬质颗粒,并揭示硬质颗粒与硅基体间的位相关系;基于上述研究开发出了多晶硅电极的制备工艺,可应用于刻蚀等半导体制造等领域。 本项目预期可以为半导体行业中硅电极生产制造企业提供稳定的技术支持,具有很好的生产示范性,实现高新技术产业化。该技术能够有效地降低生产过程中的能耗,是一种低成本、环境友好的生产方法,属于节能、环保的绿色制造技术。该技术的大规模应用和推广,可大幅增加就业岗位,提高企业的市场竞争力,保护环境。
大连理工大学 2021-05-10
一种从鸡蛋黄中提取分离免疫球蛋白IgY的方法
已有样品/n一种从鸡蛋黄中提取分离免疫球蛋白IgY的方法。  成果简介:本发明属于蛋白质分离纯化技术领域,具体涉及一种从鸡蛋黄中提取分离免疫球蛋白IgY的方法。现有技术中通常采用水稀释法、有机溶剂抽提沉淀法、超滤、超临界萃取、盐析、层析等方法提取分离IgY,然而这些方法普遍存在着步骤多、批量小、试剂耗量大和回收率低等问题。本发明的目的是克服现有技术的缺陷,提供一种分离效果好,产品纯度高的鸡蛋黄免疫球蛋白IgY的提取分离方法。该方法包括先用水稀释法获得水溶性组分,再用聚乙二醇沉淀法粗提免疫球蛋白IgY
华中农业大学 2021-01-12
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