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GLI2基因作为猪初生重性状相关的分子标记及制备
该发明属于猪的分子标记辅助选择技术领域,具体涉及一种作为猪标记辅助选择的与初生重性状相关的分子标记GLI2的克隆及应用。该分子标记为猪GLI2基因第8外显子区的一个G-A多态位点(导致NcoI-RFLP多态性),该多态性位点各基因型与大白猪初生重、白细胞数目、淋巴细胞比率和嗜碱性粒细胞比率呈显著关联(P<0.05),且AG基因型个体的初生重显著高于GG型个体(P=0.005)。 主要技术指标:DNA的提取,PCR-RFLP 应用范围:大白猪 该分子标记可用于大白猪初生重性状的改良,直接提取血液DNA,实验室进行PCR-RFLP检测公母猪基因型,通过选配,有望提高仔猪初生重。 转化条件:猪场,PCR仪,电泳仪 成果完成时间:2017年6月
华中农业大学 2021-01-12
一种锌配体修饰的聚合物基高效基因转染载体
基因治疗通过纠正患病细胞基因缺陷或者调控细胞内特定蛋白因子的表达,在攻克威胁人类健康的重大疾病(如癌症,帕金森等)方面展现出广阔的应用前景。但核酸分子在递送过程中非常容易被酶降解,因此缺乏高效的基因载体材料已成为基因治疗的最大障碍。本工作通过将廉价低分子量阳离子聚合物(如,聚乙烯亚胺和聚赖氨酸等)修饰上一种生物体内可还原的金属配位单元,得到一种高效安全的锌配体修饰阳离子聚合物基核酸载体材料。 项目特色: 本项目具有制备简单,生产成本低,基于该材料的基因载体复合物对多种细胞系具有极高的转染效率,且细胞毒性小,具有很强的抗血清能力。该产品对多种细胞系在转染性能上显著优于目前市场上商品化主流转染试剂。该项目技术已申请国家发明专利。
南开大学 2021-04-13
弓形虫MIC19基因敲除虫株及其构建方法与应用
本发明公开了一种弓形虫基因敲除虫株,该虫株缺失核苷酸序列如SEQ ID No.1所示的弓形虫微线体蛋白MIC19(TGME49_294790基因),本发明还公开了该虫株的构建方法及其应用,属于生物领域。本发明构建的基因敲除虫株ME49Δmic19具有毒力致弱的优点,能诱导动物的免疫保护反应,可用于制备弓形虫弱毒活疫苗。 成果发布时间:2025 年
华中农业大学 2021-01-12
天津大学林志团队PNAS发文:揭示次要成份在蜘蛛卵鞘丝形成中的关键作用
天然蜘蛛丝具有优异的机械性能。它们通常由多种蛛丝蛋白构成,包括主要和次要成分蛋白。由于蜘蛛的独居和互食性,大规模高密度饲养无法实现,因此人工纺丝是大量获得高强度丝纤维的一种重要手段,而蛛丝蛋白结构与功能的研究,是生产丝纤维的基础。
天津大学 2021-09-28
磁性壳聚糖复合微球制备固定化葡萄糖异构酶的方法
一种磁性壳聚糖复合微球制备固定化葡萄糖异构酶的方法,其特征在于:这种磁性壳聚糖复合微球制备固定化葡萄糖异构酶的方法为:一、向0.4~0.6mol/L的FeCl230~100ml和FeCl350~100ml中,加入分子量为4000的聚乙二醇6.0~10.0g,在磁力搅拌器下充分溶解,再用氨水调节溶液至pH8~10,继续搅拌30min~50min,用重蒸水洗涤抽滤后真空冷冻干燥即得Fe3O4磁核;二、将壳聚糖粉末在3%~6%乙酸中超声分散10min,制0.02~0.08g/ml壳聚糖溶液,通过乳化剂与Fe3O4磁核超声分散并电动搅拌10min进行混合,使之形成微乳体系,并与1%~5%戊二醛交联在2000r/min下继续搅拌2~4h,然后用石油醚、丙酮和重蒸水洗涤,抽滤真空冷冻干燥后即得磁性壳聚糖复合微球;三、将制备好的磁性壳聚糖复合微球先用磷酸缓冲液pH7.0~7.8浸泡,抽滤后加入用缓冲液稀释后的浓度为4mg/ml~16mg/ml的葡萄糖异构酶15~20ml,在室温摇床上振荡4~10h,取出放入4℃静置过夜,倾出上清液,沉淀用蒸馏水洗涤再用上述磷酸缓冲液洗涤,直至洗涤液检测不到戊二醛和游离酶,无紫外吸收,抽滤得固定化葡萄糖异构酶
黑龙江八一农垦大学 2021-05-04
重组野生型鸡半胱氨酸蛋白酶抑制剂及其应用
本发明涉及重组野生型鸡半胱氨酸蛋白酶抑制剂及其应用。获得重组野生型 cC 的方法是:利用 pGAPZ α A 载体构建野生型 cC 的表达系统;重组野生型 cC 在毕赤酵母 X-33 中表达;重组野生型 cC 的分离纯化。对重组野生型 cC 对鲢鱼鱼糜凝胶劣化抑制作用的检测方法是:鱼糜样品的制作;对所取鱼糜样品进行温浴处理,加重组野生型 cC 和未加 cC 成为对照组;处理样品进行 SDS-PAGE ,观察结果。本发明验证了重组野生型 cC 可以直接加入鱼糜制品中,能明显抑制鱼糜制品的凝胶劣化,在加工过程中能较好的保持其弹性,且其安全、无毒,有着良好的应用前景
辽宁大学 2021-04-11
 酶催化可控释放一氧化氮生物材料制备方法
该材料具有良好的加工性,能制备成可注射溶液、薄膜、多孔支架、以及静电纺丝纤维膜等多种产品。由于一氧化氮能够可控按需释放,CS-NO及其复合材料可用于治疗糖尿病下肢缺血、皮肤损伤和心梗疾病。
南开大学 2021-04-10
无酶的葡萄糖电化学传感器及其检测方法
本发明公开了一种无酶的葡萄糖电化学传感器及其检测方法,该无酶的葡萄糖电化学传感器包括由参比电极、对电极和工作电极组成的三电极体系,所述工作电极由对葡萄糖具有电催化氧化性能的材料制成;使用该无酶的葡萄糖电化学传感器检测葡萄糖的方法,包括如下步骤:(1)电化学预处理工作电极:施加高负电位;(2)电化学氧化葡萄糖:施加葡萄糖氧化所需电位;(3)电化学清洗工作电极:施加正电位。本发明可去除样品pH对检测结果的影响,使原本需要在碱性条件下进行无酶的葡萄糖检测,可在中性及酸性样品中的进行,并且具有电极稳定性好、灵敏度高、重复性好等优点,具有非常广阔的应用前景。
东南大学 2021-04-11
关于军团菌来源的新型O-糖基转移酶机理
糖基化修饰是一种广泛存在且重要的蛋白质翻译后修饰,由糖基转移酶催化形成。抗体、疫苗等许多临床治疗性蛋白质都具有特异性糖基化修饰,且对蛋白活性至关重要。基于糖基转移酶的化学酶法合成方法,是获得均一糖蛋白的有效手段之一。因此,找寻性质优良的各种糖基转移酶十分关键。对比真核细胞,细菌来源的糖基转移酶具有易表达纯化和催化产率高等优良性质,常被改造为人工合成糖蛋白的工具酶。然而,蛋白O-连接糖基化修饰在原核生物与真核生物之间并不保守,这成为了利用细菌糖基化系统生产真核生物O-糖蛋白的一大瓶颈。为了解决这个问题,陈兴教授课题组对病原菌-宿主相互作用中的蛋白质糖基化进行了探索。   某些病原菌入侵宿主细胞后,会分泌具有糖基转移酶活性的效应蛋白。这些效应蛋白往往利用宿主的糖供体,并且修饰宿主的靶蛋白。因此,对这类糖基转移酶的工程化,可为实现真核生物O-糖蛋白的合成提供新的有效策略。嗜肺军团菌效应蛋白SetA具有O-葡萄糖转移酶活性,然而其底物蛋白尚未被鉴定。 本研究首先开发了能够实现特异性标记和选择性富集的化学酶法策略。他们设计被SetA利用的生物正交基团修饰的糖供体(尿苷二磷酸-6-叠氮-葡萄糖,UDP-6AzGlc),将叠氮葡萄糖6AzGlc转移至底物蛋白。通过点击化学反应,与可切割生物素探针连接,实现对底物蛋白的选择性富集和位点特异性质谱鉴定(下图)。质谱分析鉴定到分布于276个蛋白的317个O-glucose修饰位点。天然糖供体标记及军团菌侵染实验,验证了SetA可以修饰众多的底物蛋白。
北京大学 2021-04-11
一种产角蛋白酶的粘金黄杆菌及其分离方法
本发明公开了一种产角蛋白酶的粘金黄杆菌及其分离方法。所述粘金黄杆菌拉丁名为Chryseobac?terium?L99,保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心,保藏号为CGMCC?No.2295。本发明公开了该菌的形态学特征为:菌体杆状,不产孢子,无运动性,革兰氏染色呈阴性。本发明公开了该菌的全细胞脂肪酸主要成份为:十三甲基十四酸47.59%,二羟基-13-甲基十四酸和(或)Ω-7-顺式-13甲基-十五酸15.72%,三羟基-15-甲基十六酸13.91%,Ω-9-顺式-14甲基棕榈酸9.48%。本发明还公开了该菌的16S核糖体DNA(16S?rDNA)全序列。本发明公开的分离方法包括三个步骤:普通营养培养基富集培养,以角蛋白为唯一碳氮源固体培养基初筛,以角蛋白为唯一碳氮源液体培养基的复筛。该方法快捷有效,所得菌种产酶能力强。
浙江大学 2021-04-13
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