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一种基因工程红球菌及其构建方法与应用
1. 痛点问题 红球菌是具有高抗逆性(耐有机溶剂、耐高温、耐酸碱)的特殊放线菌,日本30年前首先使用红球菌高效催化丙烯腈水合生产丙烯酰胺——其聚合产物广泛用于石油开采、水处理、土壤改良剂等领域——迄今为止仍是工业生物技术领域最成功的案例之一。开发红球菌基因编辑方法,一方面可以实现红球菌细胞自身性能的按需调控(如敲除副产物基因),解决丙烯酰胺、丙烯酸铵等酰胺、羧酸类大宗/精细化学品生产中的高成本和高排放问题,另一方面有望以红球菌细胞为普适性宿主,高表达各种外源功能酶,从而实现重组红球菌全细胞催化技术的普遍应用,尤其是解决手性医药中间体现有制备工艺中路线长、工艺复杂、原子经济性差、环境污染严重等各种主要问题。但是,作为一种革兰氏阳性放线菌,红色红球菌存在基因组中GC含量高、基因转化率低、非法重组严重等问题,基因组改造困难。目前红色红球菌基因组改造主要依赖于自杀质粒介导的同源重组,但自杀质粒转化效率和单交换成功率很低,正确编辑率更低。因此,迫切需要开发高效的红球菌基因组编辑工具。 2. 解决方案 本技术核心成果是一种基于CRISPR(成簇规律间隔短回文序列)-Cas9(DNA剪切蛋白)技术的红色红球菌基因组高效编辑方法。该技术通过红色红球菌特有启动子及质粒元件,首先实现了Cas9蛋白在红色红球菌中的表达及切割功能;其次成功规避了红球菌的限制修饰系统,将红色红球菌基因转化效率提高了80多倍;接下来,又通过红球菌重组酶的引入,显著提高了外源基因在红色红球菌中的同源重组效率,最终率先成功建立红色红球菌的CRISPR/Cas9基因编辑系统,不仅可以实现基因组上目标基因的敲除、替换和改造,也可实现多个基因的同时敲除以及无痕叠加敲除,为红球菌全细胞催化平台技术开发及其在化学品绿色先进制造中的应用奠定了坚实基础。 合作需求 开展合作开发、技术许可等,寻求有志于生物制药、生物合成、石油开采、日化洗涤等不同应用领域进行红球菌全细胞催化法生产目标产品的企业合作,尤其是在上述不同领域具有生产和销售优势或经验的企业。
清华大学 2021-12-16
轻型无冲击可重复利用的热刀式锁紧释放装置及控制方法
本发明涉及航天技术领域,旨在提供轻型无冲击可重复利用的热刀式锁紧释放装置及控制方法。该轻型无冲击可重复利用的热刀式锁紧释放装置包括热刀、热刀支座、限位装置、碳纤维薄壁杆件和组合捆绳;该控制方法包括步骤:对展开机构进行初始捆绑;利用预应力施加装置将组合捆绳套在展开机构的外表面上,剪断初始捆绑的绳子;调节组合捆绳的长度,取下预紧好的展开机构,并将热刀的两根导线,都连接到小卫星的电源上;解锁展开机构时,向热刀供电实现解锁。本发明的热刀体积小、质量轻,能在很小的电压和电流下,很短时间内熔断3mm迪尼玛绳,从而实现展开机构的解锁,整个过程无冲击、无污染、可靠性高、可重复利用。
浙江大学 2021-04-11
可实现固体废弃物层递式发酵的搅拌装置及反应器
本发明公开了一种可实现固体废弃物层递式发酵的搅拌装置及反应器。包括:一中心轴;一用于轴向推送物料的输送螺旋,同心固定于该中心轴一侧且从轴端向轴中间位置呈渐缩式延伸;以及若干搅拌桨叶,与输送螺旋同轴固定于该中心轴另一侧。基于该搅拌装置,可将其设置于筒体内形成用于固体废弃物的反应器。本发明中搅拌桨叶的布设标准为:在旋转过程中不产生沿中心轴轴向的推送力。由此,可在反应器内形成分层发酵体系。该体系能够大大降低新旧物料的混合率,有效控制固体物料在反应器中的停留时间,提高输出物料的降解效率,提升最终产品质量。
浙江大学 2021-04-11
可生物降解的生物活性掺锶硫酸钙材料、制备方法及应用
本发明公开了一种可生物降解的生物活性掺锶硫酸钙材料、制备方法及应用。其制备方法是将含Ca2+和Sr2+的溶液与十二烷基磺酸钠溶液混合,再将该混合溶液滴加到持续超声和搅拌处理的含SO42-的无机盐溶液中,析出掺锶二水硫酸钙微粒,经过滤、洗涤、干燥后,在150~170oC热处理后转化为掺锶α-半水硫酸钙微粒,再按固/液比0.5~2.0的比例将掺锶α-半水硫酸钙微粒与生理盐水调和形成糊状物,经水化反应并固化形成的材料。这种材料在骨损伤中持续降解并释放钙、锶和硫酸根离子,适宜于各种人体骨齿损伤修复、药物缓释等应用。本发明具有制备工艺简单、微粒形貌和尺寸容易控制、锶摻杂比例易于操控等特点。
浙江大学 2021-04-11
可实现固体废弃物层递式发酵的搅拌装置及反应器
本发明公开了一种可实现固体废弃物层递式发酵的搅拌装置及反应器。包括:一中心轴;一用于轴向推送物料的输送螺旋,同心固定于该中心轴一侧且从轴端向轴中间位置呈渐缩式延伸;以及若干搅拌桨叶,与输送螺旋同轴固定于该中心轴另一侧。基于该搅拌装置,可将其设置于筒体内形成用于固体废弃物的反应器。本发明中搅拌桨叶的布设标准为:在旋转过程中不产生沿中心轴轴向的推送力。由此,可在反应器内形成分层发酵体系。该体系能够大大降低新旧物料的混合率,有效控制固体物料在反应器中的停留时间,提高输出物料的降解效率,提升最终产品质量。
浙江大学 2021-04-13
一种具有高传输效率可快速连续调节能量的降能器
本发明公开了一种具有高传输效率可快速连续调节能量的降能 器,包括碳化硼能量粗调单元、石墨能量精调单元、束流准直器组、 运动控制模块、真空模块;碳化硼能量粗调单元实现能量的初级步进 调节,提高了束流传输效率;石墨能量精调单元可实现束流能量的连 续精准调节;准直器组可对束流发射度进行有效抑制,通过改变孔径 实现了发射度的选择;运动控制模块可分别对碳化硼和石墨能量调节 单元进行快速运动控制,保证了能量的快速调节;真空模块创造并维 持了真空环境。本发明的降能器可以实现束流能量的高传输效率、快 速、连续调节,
华中科技大学 2021-04-14
一种云平台下可扩展的分布式协调服务管理方法
本发明公开了一种云平台下可扩展的分布式协调服务管理方法, 包括:以中间节点交叉树林的组织方式对分布式集群的所有节点进行 初始化,所有成员节点根据来自中心管理节点的全局网络拓扑结构查 询出本节点的父子成员节点信息,所有父子成员节点之间以心跳机制 进行信息同步和通信,成员节点判断是否从其它成员节点接收到成员 状态变更信息,如果接收到则进一步判断该成员状态变更信息指示成 员减少还是增加,如果是减少则成员节点如果收到成员减少
华中科技大学 2021-04-14
微生物转化生产洛伐他汀中间体 R-J6 的关键技术
他汀类药物(statins)是一类羟甲基戊二酰辅酶 A (HMG-CoA)还原酶选择性抑制剂,能够降低血浆胆固醇和脂蛋白水平,是防治冠心病、脑中风、高血脂、动脉粥样硬化的首选用药。目前,工业化生产他汀类药物侧链关键中间体主要途径为化学合成法,此法反应步聚复杂,条件不易控制,所需手性试剂价格昂贵,污染严重,收率低。而酶法催化生产他汀类药物侧链关键中间体具有工艺简单、周期短、耗能低、专一性强、收率高、提取方便等优点,因而受到越来越多的关注。采用酶法合成瑞舒伐他汀钙侧链关键中间体,体现降耗环保的时代需求;采用非水相体系进行酶催化反应,解决了底物难溶的瓶颈问题。 
江南大学 2021-04-11
基于形状记忆聚合物的一种新型的 “万能抓手”策略
浙江大学航空航天学院宋吉舟教授团队,便基于形状记忆聚合物,提出了一种新型的“万能抓手”策略。这个“万能抓手”的载体非常简单,就是一块智能“塑料”。别瞧它结构简单,本领可不小,它可以把目标物体“锁”在体内,轻松地抓取1微米到1米大小之间任何形状的物体。 目前这一研究成果已发表在知名学术期刊《科学进展》(Science Advances)上,文章共同第一作者为浙江大学航空航天学院硕士生令狐昌鸿和博士生张顺,通讯作者为浙江大学航空航天学院宋吉舟教授。 宋吉舟教授团队的“万能抓手”何以做到“探囊取物”?靠的便是形状记忆聚合物。形状记忆聚合物是一种特殊的智能材料,论其特殊,就特殊在它的“逆来顺受”:在外部刺激作用(如光、热)控制下,形状记忆聚合物可软可硬,在受到一定的外力作用导致变形后,它就能保持这个变形后的形状,可谓“顺其自然”;然而在一定的外部刺激作用下,它又会变回原来的样子。目前形状记忆聚合物已经被广泛用于智能织物、电子包装管的热收缩膜、航空器太阳能帆板展开机构、智能医药器件等领域。 宋吉舟教授团队的新策略:第一步,就是抓取物体时,先在外部刺激作用下,让形状记忆聚合物变得柔软,趁此机会将物体或者物体表面的结构嵌入其中;第二步,去掉外部刺激,让形状记忆聚合物变回刚硬的状态,保持住该变形的临时形状,将物体“锁住”,从而把物体抓取起来;第三步,等把物体转移到目的地之后,再次施加外部刺激,形状记忆聚合物就会恢复初始形状,将物体“解锁”释放。 形状记忆聚合物万能抓手抓取和释放物体的流程示意图 形状记忆聚合物这块智能 “ 塑料 ” ,就好像是一把有魔力的万能锁,能锁住世间万物:为了获取 “ 猎物 ” ,它 先 变成柔软的橡皮泥,把物体柔柔地包住,然后变成坚硬的石头,把物体牢牢地锁住,等把物体 “ 押送 ” 到目的地,又会重新变成软软的橡皮泥并释放物体。宋吉舟教授介绍,这把 “ 万能锁 ” 能在典型的三维结构物体上产生很大的抓力,包括球体、方块、管状物体、螺栓、螺母、枣核、钥匙串等;更厉害的是,它还能像壁虎一样, 粘附在物体表面 ,不论物体表面光滑还是粗糙。 形状记忆聚合物万能抓手对典型宏观物体的抓力   那么对于尺寸小的物体,这个抓手又是如何发挥功效的呢?当物体尺寸小到微观尺度(100微米左右或者更小),物体受到的表面力,特别是与抓手的粘附作用强,会给物体的释放带来较大的挑战。在该设计中,抓手通过把物体或者物体表面的结构锁在其内部实现抓取,不依赖抓手的粘附力,所以当粘附力给物体释放带来挑战时,就可以在抓手表面镀上一层特殊材料,或者增加抓手表面粗糙度来减弱粘附,从而实现物体释放。这样,即使是75微米大小的不规则铁颗粒或者是直径10微米的二氧化硅球,也能顺利从形状记忆聚合物万能抓手上得到释放。 使用形状记忆聚合物万能抓手操纵75 微米的不规则铁颗粒和10微米直径的二氧化硅球 “微观抓手就像微观世界里的吊车,可以用它在微观世界里搭建‘建筑’,制作特殊的光电器件。”令狐昌鸿说,“这个抓手在微观视角下还有一个优势,就是一个抓手就是数以万计的微观吊车,可以高效地在微观世界工作。” 谈及具体应用,宋吉舟教授表示,在柔性电子制备中,最重要的一步就是微观元器件的快速组装,即把制备基底上数以万计或者更多的维纳元器件转移到柔性的使用基底上。以往的方法都依靠粘附来一次性抓取这些元器件,但是释放的时候粘附就变成了限制因素。而宋吉舟教授课题组提出的这个策略,完全不依赖粘附,为柔性电子的制备提供了一种新思路,有望推进柔性电子的工业化进程。 使用形状记忆聚合物万能抓手组装柔性电子器件的简单展示 该项目得到了国家973计划、国家自然科学基金和中央高校基本科研业务费专项资金等的支持。
浙江大学 2021-04-10
利用新型植物生物反应器的进行种苗的工厂化扩繁
 传统的植物组织培养的方法是以琼脂为支持物的半固体或固体培养。固体、半固体培养是一个劳动密集型技术,需要大量的手工劳动,导致生产成本居高不下。液体培养易于操控,适合大规模的组培生产,但是由于组培苗长期的浸泡在液体中,无法进行有效的气体交换,组培苗玻璃化情况严重、抗逆性较差,栽培死亡率高,也增加了生产成本。随着植物组织培养产业日益兴盛,传统的固体、半固体培养及液体培养模式已经满足不了产业的需求。新型生物反应器采用间歇浸没培养模式和自动化控制技术,并以半夏等药用植物为材料进行试验,优化该装置的浸没频率等参数,实现了高通量植物种苗的工厂化扩繁。与传统的培养模式作比较,无论在培养周期、种苗质量上均较优。由于通量大,在育种上的应用节省了时间和人力、物力,效率大大提高,达到产业化应用水平。项目技术优势间歇浸没培养系统结合了固体培养(最大化气体交换)和液体培养(营养充分的吸收)的优点,在很多种植物幼苗和体细胞胚体的培养中占有一定的优势,植物的长势情况和增殖率比传统的固体培养、半固体培养和液体培养都要好,所获得的幼苗和体细胞胚体质量高,更能很好的适应环境,移栽成活率较高。间歇浸没培养模式采用程序控制,自动化程度高,大大的减少了劳动力的消耗,生产成本和传统的模式相比大幅度的降低,在商业化生产上占有很大的优势。①.减少甚至避免玻璃化 实验证明,增加通风和植物材料间歇的接触液体培养基是降低玻璃化的有效方法,而间歇浸没培养系统正好具备这两个特征。②.组培苗环境适应性强 利用传统的培养方式获得的组培苗,对环境适应能力较弱,在炼苗阶段由于环境变化较大,一般成活率较低。但间歇浸没系统获得的植物由于在培养时就进行了外界空气的锻炼,因此,绝大多数能够成功的适应环境,炼苗成活率较高。
南京工业大学 2021-04-13
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