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一种用于冠状病毒检测的通用简并引物对及其应用
本发明公开了一种用于冠状病毒检测的通用简并引物对及其应用，涉及分子诊断技术领域。该qPCR通用简并引物对包括核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示的上游引物和核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示的下游引物。本发明参考GenBank中登录的15种冠状病毒ORF1ab基因序列设计了一对简并引物，并利用其建立了冠状病毒通用检测方法和检测产品，利用该简并引物进行冠状病毒检测，特异性强，灵敏性高，并且具有稳定的重复性。本发明为临床诊断冠状病毒和监测新型冠状病毒的出现提供了新的技术支持。
河南农业大学
2021-04-11
一种高效快速构建猪肠道冠状病毒重组病毒的方法
本发明属于动物传染病防制技术领域。具体涉及一种高效快速构建猪肠道冠状病毒重组病毒的方法。利用CRISPR/Cas9系统对含有PEDV AJ1102株全长cDNA的BAC质粒进行切割，再通过同源重组方式获得EGFP基因替换PEDV AJ1102株ORF3基因的重组BAC质粒，转染细胞后拯救出重组病毒rAJ1102‑△ORF3‑EGFP。由于不同的猪肠道冠状病毒具有相似的基因组结构与复制策略，本发明也适合于其它猪肠道冠状病毒重组病毒的构建。与传统方法相比，本发明具有靶点选择宽泛，特异性强，操作简单，效率高和实验周期短等突出优点，在一周之内便可获得重组病毒，是一种高效快速构建猪肠道冠状病毒重组病毒的方法。
（注：本项目发布于2019年）
华中农业大学
2021-04-11
提高畜禽养殖废水处理效率的多级微生物强化技术
畜禽养殖废水的污染在我国农业污染中占主要部分，该废水具有高COD、高氨氮、高悬浮物、难处理的特点，经过常规污水处理技术处理后，往往很难买现达标排放，给畜禽养殖业主带来很大的困扰。
该技术是一种可以在不改变污水处理流程和设施的情况下，通过人为在不同污水处理单元中投加不同配比的高效微生物菌种，改善污水处理系统中活性污泥中微生物的组成，并提高污泥活性，从而最终提高畜禽养殖废水处理效率的简单、高效的方法。
该技术具备以下优点：
(1) 该技术所使用的配套污水处理装置，均为本领域常用的处理装置或单元，均含有活性污泥；
(2) 该技术可以使COD和BOD5的去除率提高10一40％，氨氮和总氮去除率提高20一50％；
(3) 该技术操作简单，便于推广应用，相比其他增加污水处理流程或设置的技术而言，投入成本更低，更具经济性。
国家对环保的政策日趋严格，未来十年，是环保的黄金十年，也是畜禽养殖行业在环保压力下重新洗牌兼并的十年，畜禽养殖废水处理市场前景广阔。
转化条件：菌种活化相关设备：曝气装置
成果完成时间：2014年10月
华中农业大学
2021-01-12
用于五种鳜亚科鱼类分子的试剂盒及鉴定技术
该成果目的在于提供一种效率高、准确性好的鉴别鳜亚科主要养殖种类（翘嘴鳜、大眼鳜和斑鳜）及珍稀种类（中国少鳞鳜和波纹鳜）的分子标记方法。以利于鳜亚科养殖群体的合理管理以及野生资源的保护。
该成果提供了一种用于五种鳜亚科鱼类分子的试剂盒及鉴定方法，试剂盒包括三对SSR引物和标准图谱，一种试剂盒用于五种鳜亚科鱼类的分子的鉴定方法，其步骤：1）DNA提取：采集待测鳜鱼样品的鳍条或者肌肉组织，提取基因组DNA并测定其纯度和浓度；2）DNA片段扩增：采用聚合酶链式反应扩增待测样品基因组DNA；3）PCR产物的电泳及银染色鉴定：对PCR产物用非变性聚丙烯酰胺凝胶进行电泳分离，常规银染法染色后，拍照记录电泳结果；采用8%非变性聚丙烯酰胺凝胶；4）与标准图谱进行对比。可显著提高鳜亚科重要经济、稀有种类间鉴定的效率和准确性，有助于鳜亚科鱼类遗传资源的保护和鳜鱼养殖业的持续健康发展。
该成果采用微卫星标记技术对五种鳜亚科鱼类进行鉴别，其反应稳定，重复性好，具有广泛的适用性；与传统的形态学鉴定相比，具有检测时间少，检测准确性高等特点。
该成果有较高的产业化前景，实际操作性强，简便、准确，价格适中。
成果完成时间：2016年4月
华中农业大学
2021-01-12
快速检测柑橘采后防腐保鲜液中抑霉唑浓度的技术
选用溶于水而成半透明状溶液的十二烷基苯磺酸钠作为滴定剂，靛酚蓝做指示剂，二氯甲烷用作有机相。溶解在二氯甲烷中的抑霉唑经过酸化处理成无色的水溶状态，水溶状态的抑霉唑与滴定剂可以形成溶于有机相中的无色离子对配位化合物，存在于有机相中的指示剂与过量的滴定剂可以形成接近无色的离子对配位化合物。因此这种阴离子表面活性剂双相滴定法可以用来检测抑霉唑的含量。这是首次运用滴定方法来检测柑橘商品化处理生产线上杀菌体系中抑霉唑的含量。在滴定剂浓度为0.01mol/L 时，抑霉唑浓度低至50mg/L 仍能被检测出来。
该方法不仅快速、低成本，而且简单、易操作，适合在产区、企业推广使用，具有广泛的应用前景。同时，十二烷基苯磺酸钠、二氯甲烷都是常见并且价格低廉的药品。十二烷基苯磺酸钠是无毒的化学药品，二氯甲烷是有机试剂中常用的最低毒的药品之一，因此，保证了检测方法的相对安全性。
成果完成时间：2014年10月
华中农业大学
2021-01-12
翘嘴鳜、斑鳜及其杂交子一代的分子鉴定技术
该成果提供一种快速、准确鉴别翘嘴鳜、斑鳜及其杂交子一代的分子标记方法。在鳜类种质鉴定和保护、遗传育种和养殖生产中有极大的应用价值。
分子鉴定方法包括以下步骤：基因组DNA的提取、DNA目的片段的扩增、PCR产物的电泳及银染色鉴定。方法中还包括一对特异微卫星引物和标准图谱。本发明的分子鉴定法能快速、有效地鉴别出翘嘴鳜、斑鳜及其杂交子一代，具有客观、快速、准确、经济的优点。
该成果采用微卫星标记技术对翘嘴鳜、斑鳜及其杂交子一代进行鉴别，其反应稳定，重复性好，具有广泛的适用性，与传统的形态学鉴定相比具有检测准确性高的优点。本发明通过一个微卫星位点、进行一次PCR鉴别出翘嘴鳜、斑鳜及其杂交子一代，减少了检测时间和降低了检测成本。
该成果有较高的产业化前景，实际操作性强，简便、准确，价格适中。
成果完成时间：2017年2月
华中农业大学
2021-01-12
GLI2基因作为猪初生重性状相关的分子标记及制备
该发明属于猪的分子标记辅助选择技术领域，具体涉及一种作为猪标记辅助选择的与初生重性状相关的分子标记GLI2的克隆及应用。该分子标记为猪GLI2基因第8外显子区的一个G-A多态位点（导致NcoI-RFLP多态性），该多态性位点各基因型与大白猪初生重、白细胞数目、淋巴细胞比率和嗜碱性粒细胞比率呈显著关联(P<0.05)，且AG基因型个体的初生重显著高于GG型个体（P=0.005）。
主要技术指标：DNA的提取，PCR-RFLP
应用范围：大白猪
该分子标记可用于大白猪初生重性状的改良，直接提取血液DNA，实验室进行PCR-RFLP检测公母猪基因型，通过选配，有望提高仔猪初生重。
转化条件：猪场，PCR仪，电泳仪
成果完成时间：2017年6月
华中农业大学
2021-01-12
火焰形状与混合强度在线可调的低 NOx 旋流燃烧器
1、改进传统燃烧器扩口设计，形成多个扩口小片层叠布置的角度可调的扩口，从而改变喷口火焰的形状。
2、改进齿形环的设计，可以在线调节齿形环位置和角度，使得气流之间的混合过程得以调节。
3、燃烧稳定，可实现低于 50%负荷稳燃，燃煤时 NOx 原始排放可<200mg/m3。
4、具有广泛的燃料适应性，在不改变结构的时候可以同时适用于 Vdaf=15~35%之间的煤种。
西安交通大学
2021-04-11
一种微通道在线制备过氧特戊酸叔丁酯的方法
本发明公开了一种微通道在线制备过氧特戊酸叔丁酯的方法，属于精细化工合成技术领域，所述方法为：以特戊酸酐和叔丁基过氧化氢为原料，在硫酸催化下在微通道反应器中连续制备，淬灭反应后通过在线分离得到所述过氧特戊酸叔丁酯。本发明采用微通道合成及在线分离技术，简化操作流程，强化反应过程传热传质，提升反应效率并拓宽安全操作条件边界；最小化不稳定的有机过氧化物存量，缩短反应停留时间，相比于传统间歇式合成工艺过程安全性得到显著提升。
南京工业大学
2021-01-12
地铁施工及运营对相邻文物的影响评估、监测及加固成套技术
本成果源于为江苏省科技厅资助的产学研重点项目，主要的成果内容：（1）地铁区间隧道及车站基坑开挖对文物等重要构筑物的影响预测评估技术；（2）地铁施工爆破对构筑物振动影响评估预测技术；（3）文物检测的新技术研究；（4）文物加固消险新技术。（5）地铁施工时文物监测新技术及远程监控系统开发。（6）地铁运营期间轨道振动对文物鼓楼影响的研究。目前针对地铁施工及运营对文物的影响分析及控制保护技术在国内外尚较少见，本项目组已经针对上述研究内容取得4项软著和多项相关专利，并且参与了南京地铁4、5、6、7及宁句城际等多条线路沿线的文物评估及加固项目取得了不错的成果。
南京工业大学
2021-01-12