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评估基因编辑工具酶的新方法以及高保真的新基因编辑酶
CRISPR/Cas9 (clustered regularly interspaced short palindromic repeats and CRISPR-associated proteins)是目前最常用的基因编辑工具酶,在科研领域被广泛应用,而在临床方面的应用因为其脱靶活性一度停滞不前。它通过guide RNA(gRNA)与靶向DNA序列的配对,从而将Cas9锚定在靶向基因并诱导产生DNA双链断裂(DSB)。在基因编辑诱发的DSB的修复过程中,一定几率会产生基因突变或者外源DNA片段的插入,从而达到基因编辑的目的。在实际应用过程中,一个好的基因编辑酶Cas9需要同时满足高效切割靶位点、低脱靶活性和低染色体异常三个特点。目前在这三个方面,有一部分基于PCR的方法用于估算基因编辑效率,但其结果可靠性有待提高;有一些基于高通量测序的方法可以在体内或者体外检测基因编辑酶的脱靶活性;尚无系统的可定量的测量基因组异常结构的方法。本项目开发了一种新的方法,可以用来同时定量检测Cas9编辑效率和脱靶活性以及编辑引起的染色体异常结构,即primer-extension-mediated sequencing(PEM-seq)。这是对基因编辑和DNA损伤修复等领域都有巨大促进作用的新技术。与此同时,该项目包括了该团队利用PEM-seq筛选出的一个相比于现有Cas9变体具有更低脱靶活性且与野生型Cas9切割效率相当的Cas9变体further enhanced Cas9 (FeCas9)。
北京大学 2021-02-01
一对特异识别绵羊KRT25基因的多肽及其编码基因和应用
本发明公开了一对特异识别绵羊KRT25基因的多肽及其编码基因和应用。该多肽由多肽甲和多肽乙组成;所述多肽甲由16个TAL核酸识别单元组成,每个TAL核酸识别单元中具有一个双连氨基酸;所述多肽乙由15个TAL核酸识别单元组成,每个TAL核酸识别单元中具有一个双连氨基酸。本发明可实现在细胞或个体水平上对绵羊KRT25基因进行敲除或修饰,以解析绵羊KRT25基因的功能、构建绵羊KRT25基因突变库或获得相关疾病模型,为绵羊育种及医药研发服务。
青岛农业大学 2021-04-13
南方感潮河网区水流水质耦合模型
南方感潮河网区水流水质耦合模拟系统根据南方感潮河网地区的地形、防洪设施、水利工程等特点, 采用计算机模拟技术,构建南方感潮河网区水动力水质数学模拟模型,定量模拟河网区水流流动状况以及 污染物在河网区迁移转化状况,着力研究解决新时期南方河网区水资源开发利用和水污染控制问题,加强 水资源科学管理,控制水环境污染,对促进南方河网区社会经济稳定发展有重要的意义。
中山大学 2021-04-10
体感式虚拟现实(VR)事故体验系统
应用多媒体、VR等技术,将已发生的重大事故或潜在重大安全事故制作成警示教育体验资源,应用VR体验硬件平台进行身临其境式体验,以提高体验者的安全意识与知识。体验内容包括事故发生发展过程、原因分析、处置措施、自我防护知识等内容。
中国石油大学(华东) 2021-05-11
粳稻—小麦周年协调高产高效生产模式创建与推广
归纳出不同生态区粳稻—小麦周年协调高产高效的适宜品种组合、 茬口衔接与适宜播(栽)收临界期、适宜播栽方式、适宜播栽群体起点与密度、适宜施肥量及运筹比例、适宜水分管理等“六适”关键技术要领, 以及现代农业生产条件下以秸秆全量还田、 农机选型与农艺融合、精确管理、易发气象灾害防御、病虫草害综合防治为主要内容的配套应变技术, 集成构建出粳稻—小麦周年协调高产高效生产模式; 编著可视性好、操作性强、 实用性广的《粳稻—小麦周年高产高效栽培与防灾减灾技术明白图》、《农事实用旬历手册》;通过多项目
扬州大学 2021-04-14
小麦高产稳产优质抗逆栽培技术集成推广
该成果 2011 年获得江苏省农业技术推广奖一等奖。成果明确了现阶段小麦高产超高产的技术思路, 创新集成以“精种、 调肥、 抗逆”为核心、 以“播期播量与播种方式协调、控氮补磷增钾、 综合化调化保”为关键的小麦高产稳产优质抗逆栽培技术体系, 创新提出了“因茬、 因墒、 因种、 因苗、 因境”栽培管理技术关键, 集成组装配套出 5 套适合不同茬口不同播种方式的高产超高产栽培模式。
扬州大学 2021-04-14
特早熟优质中筋小麦新品种华麦2152
研发阶段/n华麦2152选自复交组合(鄂恩1号×川农麦1号)×(华9515×川农6280),用系谱法育成。该品种属春性半矮杆品种,幼苗半匍匐,剑叶中等大小,上挺,茎秆有蜡粉,叶色淡绿,株型紧凑,抗倒伏能力较强,穗纺锤形,长芒,白壳,白粒,半角质。光合效率中等,对酸性不敏感。分蘖力中等,株高90厘米左右,全生育期185天左右(出苗-成熟),比对照品种郑麦9023早1-2天,为目前熟期最早的小麦新品种。穗层整齐度和熟相好。亩穗数26.37万,穗粒数40.1粒,千粒重42.79克。2006-2007年度品
华中农业大学 2021-01-12
猪多肋基因育种新技术
哺乳动物的胸椎数决定肋骨数,肋骨数是养猪生产中的重要经济性状。除猪和羊外,几乎所有哺乳动物的脊椎数都是固定的,目前主流的杜洛克、长白、大白猪种的肋骨数变异明显,通常是14-16根,每增加一根肋骨,100Kg商品猪体长增加200px,产肉量增加1%以上。因此,肋骨数的选育改良具有重大的经济价值。 项目组在猪7号染色体上鉴别到影响效应大1根肋骨的基因关键变异位点,由此创建了新型的种猪肋骨数增加基因育种新技术,申请并获得国家发明专利一项,代表性论文发表于国际知名在线学术期刊PLoS one(2013,8:e20534)。
江西农业大学 2021-05-05
谷子SiASR4基因及应用
本发明提供了谷子SiASR4基因及其应用,属于植物基因工程技术领域。本发明首次克隆得到与植物逆境胁迫相关的SiASR4基因,其核苷酸序列如SEQ ID No.1所示,将所述基因转化到植物中可提高植物抗逆性。本发明还提供了用于PCR扩增及检测SiASR4基因的特异引物对,其核苷酸序列如SEQ ID No.2‑3所示;用于实时荧光定量PCR检测SiASR4基因的特异性引物对,其核苷酸序列如SEQ ID No.4‑5所示。本发明的SiASR4基因可用于植物抗逆新品种的培育,具有广阔的应用前景。
中国农业大学 2021-04-11
核酸基因药物的体内递送载体
项目简介 基因治疗可用于包括癌症、艾滋病、心血管病、传染性疾病等在内的各种获得性和遗传性疾病。近几年来核酸及基因药物得到快速发展,已有多个核酸药物经FDA批准应用于临床治疗。基因治疗相对其它治疗方法有着若干优势,但在实际应用过程中也面临着一些挑战。其中,基因输送载体对于基因治疗来说是十分关键。目前开发基因输送载体的策略主要分为病毒和非病毒介导的输送系统。病毒载体具有非常高的输送效率并且可以保证基因的长期表达,因此是目前临床上应用最多的载体。但病毒载体在临床使用过程中也暴露出了许多缺陷,这些缺陷大大限制了病毒载体的应用。为了克服病毒载体的诸多不足,近些年来非病毒载体得到了迅速发展。这其中就包括研究最广泛的非病毒载体聚乙烯亚胺。PEI是最好的体外转染试剂之一并且已经被一些研究工作者当成聚合物类基因转染试剂的“金标准”。 PEI的转染效率和细胞毒性主要受其分子量、支化程度、表面电势和粒径的影响。随着分子量的升高,支链PEI转染效率升高;然而,细胞毒性也同时升高。为了消除或降低与PEI有关的细胞毒性,目前已经发展出了多种不同的策略。这些策略主要包括使用直链高分子量PEI,用多糖、亲水性聚合物(如PEG)、二硫键连接臂、脂质基团等取代或连接高分子量和低分子量的支链PEI市场上销售的PEI分子量范围非常广泛,从1000 Da以下到1.6 × 103 kDa都有。 维生素E是一种脂溶性化合物,它包括生育酚和生育三烯酚,其中α-生育酚是自然界中分布最广泛、含量最丰富并且活性最高的维生素E形式。维生素E的生物功能除了最熟知的抗氧化功能之外,还涉及酶活性的调节、基因表达调控以及神经生物学功能等。通过消化道吸收进入血浆的维生素E经受体介导进入肝细胞,进入肝细胞的维生素E又在维生素E结合蛋白的运输下进入肝外组织。维生素E本身的疏水性质、丰富的生物调节功能以及其受体介导的肝细胞摄取方式都预示着用它来修饰PEI有助于实现基因的器官靶向的递送。 因此,我们开发了维生素E修饰的聚乙烯亚胺衍生物及其合成方法和应用。维生素E的修饰有利于基因质粒的包载、递送和释放,其毒性随着PEI上的维生素E饰数目的增加而降低,维生素E的修饰能够大大增加pDNA质粒的细胞摄取后基因编码蛋白的表达。动物体内实验表明PEI衍生物可成功将pDNA质粒输送到小鼠的肝脏和肺脏中,该复合物(PEI/pDNA)能进入肝脏和肺脏细胞并进一步释放质粒DNA和基因表达。本成果具有聚乙烯亚胺衍生物作为基因输送载体具有毒性低、转染效率高和基因药物已释放等优点。项目团队 项目团队包括北京大学药学院汤新景教授,以及课题博士后和研究生组成。汤新景教授为天然药物及仿生药物国家实验室PI,国家自然科学基金委优青、教育部青年长江学者和新世纪人才。应用范围 该项目可用于核酸基因药物的包载和递送材料,实验研究中的基因递送试剂盒等。项目阶段 目前该项目处于临床前研究(动物研究阶段)。知识产权 已申请专利(201610802130.6),北京大学为唯一专利权人。合作方式 技术转让、技术许可、技术入股、共同开发等。
北京大学 2021-04-11
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