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结核分枝杆菌融合蛋白 Mtb10.4-Hsp16.3 的构建.表达和 纯化方法及其应用
本发明选择结核杆菌生长期和休眠期主要的保护性抗原 Mtb10.4 和 Hsp16.3,构建融合蛋白 Mtb10.4-Hsp16.3(MH)。在大肠杆菌中表 达纯化该蛋白,将该蛋白和佐剂混合构建亚单位疫苗,分别于 BCG 初免后 12、14 周加强免疫 C57BL/6 小鼠两次,最后一次免疫 6 周后 检测细胞免疫反应,最后一次免疫后 10 周进行结核菌毒株&nb
兰州大学 2021-04-14
结核分枝杆菌融合蛋白Mtb10.4-Hsp16.3的构建.表达和纯化方法及其应用
本发明选择结核杆菌生长期和休眠期主要的保护性抗原Mtb10.4和Hsp16.3,构建融合蛋白Mtb10.4-Hsp16.3(MH)。在大肠杆菌中表达纯化该蛋白,将该蛋白和佐剂混合构建亚单位疫苗,分别于BCG初免后12、14周加强免疫C57BL/6小鼠两次,最后一次免疫6周后检测细胞免疫反应,最后一次免疫后10周进行结核菌毒株H37Rv攻击。结果:该融合蛋白能在大肠杆菌中稳定大量表达,经离子交换层析、凝胶过滤层析和疏水层析三步纯化得到纯度较高的蛋白;构建的亚单位疫苗免疫动物可产生针对结核杆菌特定抗原(Mtb10.4和Hsp16.3)的特异性细胞和体液免疫应答,具有较强的免疫原性;毒株攻击后,小鼠肺脏结核菌数量明显少于PBS组和BCG组。结论:本发明成功构建、表达和纯化不带任何标签的融合蛋白MH,此蛋白可诱导较强的细胞和体液免疫应答并具有一定的动物保护效应,有望成为临床结核病预防和治疗的候选疫苗。
兰州大学 2021-01-12
治疗2型糖尿病、脑卒中、结肠炎、胃溃疡的新型化学及生物药物
项目成果/简介:实验室研究概貌:衰老相关疾病就是随着年龄升高其发病率随之上升的疾病,包括2型糖尿病、脑卒中、肠胃溃疡等。根据我们的衰老理论,衰老就是各器官组织功能衰退导致的,而不同器官组织功能的加速衰退就会导致各种衰老相关疾病。因此,衰老与衰老相关疾病具有共同机制,解决了衰老相关疾病,就可以揭示衰老的关键机制,开发延缓衰老新策略。实验室研究成果:我们建立了新型药物筛选平台,以动物为研究模型,筛选了大量化合物(主要为临床用药、新合成化合物、天然产物提取液)、基因工程改造的益生菌。筛选发现了一系列有望治愈2型糖尿病(图1)、脑卒中(图2)、肠胃溃疡(图3)等疾病的候选药物。特点如下:疗效好:活性较治疗相应疾病的临床用药活性高,相同条件下,可更有效降低血糖、治疗蛋白尿、减少脑梗死体积、抑制肠胃溃疡。靶点新:药物相应靶点(target)不同于已经发表、各公司正在研发的靶点。同时新发现靶点有可能是导致疾病的真正基因。已知靶点有可能只是导致某些症状的表层靶点。剂量低:相对于现有临床药物,我们发现的小分子剂量为其临床应用剂量的1/400-1/10,因此长期使用副作用将会更低。有治愈潜力:根据我们的数据,益生菌、小分子可以避免现有临床药的毒副作用,比如现有糖尿病治疗药物的肝肾、心脏毒性,并具有保肝护肾、降低动脉粥样硬化的功能。同时,我们选用的益生菌,本身就具有优化肠道菌群,改善肠胃功能的效果。数量多:小分子化合物40余种,2020年底至今已申请专利14项。治疗性益生菌5种。适应症广:个别小分子、益生菌可同时预防和治疗多种疾病。如一种益生菌可治疗2型糖尿病(在2周内显著降低血糖)、缺血性脑卒中、肠胃溃疡。这说明经过改造的益生菌,可以分泌穿透大鼠血脑屏障的纳米尺度小泡,治疗大脑相关疾病。合作需求:关于小分子和治疗性益生菌,考虑在有生物医药产业基础的高新区建立企业,也希望与大型药企合作开发药物。同时,我们可在以上所述研究领域提供技术服务、咨询服务等。
兰州大学 2021-04-10
治疗2型糖尿病、脑卒中、结肠炎、胃溃疡的新型化学及生物药物
实验室研究概貌: 衰老相关疾病就是随着年龄升高其发病率随之上升的疾病,包括2型糖尿病、脑卒中、肠胃溃疡等。 根据我们的衰老理论,衰老就是各器官组织功能衰退导致的,而不同器官组织功能的加速衰退就会导致各种衰老相关疾病。因此,衰老与衰老相关疾病具有共同机制,解决了衰老相关疾病,就可以揭示衰老的关键机制,开发延缓衰老新策略。 实验室研究成果: 我们建立了新型药物筛选平台,以动物为研究模型,筛选了大量化合物(主要为临床用药、新合成化合物、天然产物提取液)、基因工程改造的益生菌。筛选发现了一系列有望治愈2型糖尿病(图1)、脑卒中(图2)、肠胃溃疡(图3)等疾病的候选药物。 特点如下: 疗效好:活性较治疗相应疾病的临床用药活性高,相同条件下,可更有效降低血糖、治疗蛋白尿、减少脑梗死体积、抑制肠胃溃疡。 靶点新:药物相应靶点(target)不同于已经发表、各公司正在研发的靶点。同时新发现靶点有可能是导致疾病的真正基因。已知靶点有可能只是导致某些症状的表层靶点。 剂量低:相对于现有临床药物,我们发现的小分子剂量为其临床应用剂量的1/400-1/10,因此长期使用副作用将会更低。 有治愈潜力:根据我们的数据,益生菌、小分子可以避免现有临床药的毒副作用,比如现有糖尿病治疗药物的肝肾、心脏毒性,并具有保肝护肾、降低动脉粥样硬化的功能。同时,我们选用的益生菌,本身就具有优化肠道菌群,改善肠胃功能的效果。 数量多:小分子化合物40余种,2020年底至今已申请专利14项。治疗性益生菌5种。 适应症广:个别小分子、益生菌可同时预防和治疗多种疾病。如一种益生菌可治疗2型糖尿病(在2周内显著降低血糖)、缺血性脑卒中、肠胃溃疡。这说明经过改造的益生菌,可以分泌穿透大鼠血脑屏障的纳米尺度小泡,治疗大脑相关疾病。 合作需求: 关于小分子和治疗性益生菌,考虑在有生物医药产业基础的高新区建立企业,也希望与大型药企合作开发药物。同时,我们可在以上所述研究领域提供技术服务、咨询服务等。
兰州大学 2021-05-11
糖尿病性外周血管病变的特征和分子生物学基础
糖尿病性血管病变是导致患者致残和死亡的主要原因,目前糖尿病性外周血管病变 的形态病理学资料尚不完善,且发病机制尚未完全阐明,治疗方法也有待提高。 该课题利用动脉造影方法,直接观察糖尿病外周血管病变的形态学特征,为认识该 病变提供形态学基础。同时为部分患者实施介入治疗,以改善患者外周肢体的血供,从 而尽可能地保留肢体。该研究还采用了简单而易行的方法(静脉闭塞试验了解内皮 t PA 和 NO 储备释放功能以及超声法检测血管舒张功能)以判断血管的的内皮功能,有助于 了解血管病变的程度和预后。此外,采用基因芯片和免疫组化技术进行糖尿病性血管病 变的分子生物学研究,为临床上阐明糖尿病性血管病变的发病机制提供了理论根据。同 时利用此技术观察了糖尿病鼠外周血管在使用他汀药物时的基因谱差异性表达,及其相 关蛋白的表达,旨在循环医学证据的基础上阐明糖尿病使用他汀治疗外周血管病变的分 子学改变,从而说明糖尿病患者使用他汀的合理性和不同类别他汀的有效性,为糖尿病 患者的血管病变预防治疗提供依据。 该研究从不同层次探讨了糖尿病性外周血管病变的状况,有助于认识糖尿病外周血 管病变的发病规律,为诊断和治疗提供了合理方法和理论依据。经专家讨论认为该研究 达到国内先进水平。
同济大学 2021-04-13
一种治疗糖尿病的中药复方外用制剂 及其制备方法和应用
【发 明 人】王旭;洪兵;孙斯凡;徐奚如;金晶【摘要】本发明公开了一种治疗糖尿病的中药复方外用制剂及其制备方法和应用,该中药复方由下列重量份数的原料组成:生大黄5~15份,黄柏5~15份,黄连3~10份,苦参10~50份,金银花10~30份,乳香5~15份,没药5~15份,白及10~30份。本发明提供的中药复方外用制剂,根据中医药理论,采用辨证论治的理论进行中药配比组方,实验结果表明,本发明提供的中药复方能够有效纠正糖代谢紊乱,降低血糖,改善胰岛B细胞功能,改善胰岛素抵抗,且实验结果表明,本发明提供的中药复方具有很好的抗炎和促进伤口愈合的作用,可以有效防治糖尿病的并发症,且可以方便制备成喷雾剂或洗液等剂型,临床使用方便,安全。
南京中医药大学 2021-04-13
经济作物抑病型土壤微生物区系调控技术创建与应用
本项目研发出防控土传病害的全元生物有机肥系列产品以及配套施用技术,利用这些技术能有效控制土传病害的发生,田间应用效果十分显著,技术水平处于国际领先。 一、项目分类 显著效益成果转化 二、成果简介 针对经济作物土传病害已经成为我国发展高效益农业的瓶颈(由于我国经济作物的生产都是集约化生产模式,过量施用化学氮肥导致土壤酸化和养分不平衡,这给土传病原菌创造了更有利的生长环境,使我国土传病害发生比国际上更严重)问题,成果完成团队长期从事高产和抑病型土壤微生物区系特征解析研究,并在此基础上研发调控高产和抑病型土壤微生物区系的技术途径,从理论到实践,收到了很好的效果。在实践上,研发出防控土传病害的全元生物有机肥系列产品以及配套施用技术,利用这些技术能有效控制土传病害的发生,田间应用效果十分显著,技术水平处于国际领先。所研发的系列全元生物有机肥专利技术和产品已被全国20多家大型生物有机肥企业转让和转化,产生了显著经济和社会效益。在学术上,揭示了经济作物抑病型土壤微生物群落中的关键微生物和核心微生物,及其种群间互作关系,在国际土壤微生物领域权威刊物上发表了大量研究论文,产生了较大的学术影响,吸引了众多国际著名专家前来开展合作研究。
南京农业大学 2022-07-25
一种抗大肠杆菌k88ac的单链抗体及其编码基因与应用
本发明涉及基因工程,具体公开了一种抗大肠杆菌k88ac的单链抗体及其编码基因。本发明将抗k88ac抗原的抗体可变区基因,与猪的抗体恒定区通过linker序列连接,形成scFv‑Fc结构。构建CMV启动子调控scFv‑Fc基因表达的重组载体k88‑p CMV5,使其在细胞水平高效表达。通过western和ELISA检测抗体可正常表达;且具有与k88ac抗原的结合能力。本发明成功获得了针对k88ac大肠杆菌的抗体基因,为得到抗腹泻转基因猪群提供了新方法,对于农业发展具有很大的经济效益。
中国农业大学 2021-04-11
一株植物乳杆菌在降低大规模肉鸡养殖时抗生素残留中的应用
本发明公开了一株植物乳杆菌在降低大规模肉鸡养殖时抗生素残留中的应用,属于畜禽饲用微生态制剂领域。本发明将植物乳杆菌P?8发酵液作为饲料添加剂,结果发现其可以有效降低大规模肉鸡养殖过程中抗生素在鸡肉中的残留,从而避免对环境造成的污染,以及避免抗生素残留肉鸡对人类健康造成的危害,具有重要的经济意义和社会意义。
青岛农业大学 2021-04-13
一种从花椒内生耐寒短杆菌发酵液中制备L-酪氨酸的方法
本发明公开了一种从花椒内生耐寒短杆菌发酵液中制备L-酪氨酸的方法,其特点是将花椒内生耐寒短杆菌于温度30℃恒温培养活化24h后,接种到发酵培养基中,于温度28~37℃,120~180r/min水浴中恒温振荡发酵培养24~72h;将发酵液在常温下以4000~6000r/min的速度离心15min后除去菌体获得上清液冷冻干燥;按样品与Sephadex LH-20质量比1:20~50且上样量为柱体积的20%将发酵液过Sephadex LH-20层析柱,用100mL纯水等度洗脱,按每份收集量20mL等份收集洗脱液F1~F5;将组分F3用制备型液相色谱仪进行分离纯化,冷冻干燥即得到L-酪氨酸,得率为8~15mg/L发酵液。
四川大学 2016-10-11
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