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手工教室-智慧教室-录播室-图书馆-创客空间
产品详细介绍
北京鼎盛青创科技有限公司 2021-08-23
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北京鼎盛青创科技有限公司 2021-08-23
高价值氨基酸生产菌株的合成生物学改造
各种支链氨基酸(如缬氨酸和异亮氨酸)、活性氨基酸(如 γ-氨基丁酸、谷胱甘肽)是目前需求市场巨大的高价值氨基酸,本研究室利用系统生物学和合成生物学最新原理,利用基因工程技术,构建了一序列具有自主知识产权的遗传转化工具,消除了开展代谢工程的制约因素;然后对氨基酸合成关键酶、代谢网络 进行了定向改造和针对性设计;最后系统改造宿主菌细胞膜壁成分,优化辅因子再生和生长效率,最终提升工业菌株产率。 创新要点 针对高价值氨基酸生产菌株,对其合成途径关键酶进行定向改造,赋予抗反馈抑制性性质,强化其转录表达;通过基因敲除优化其整体代谢网络,增大目的产物流量;优化菌株通透性、胞内能荷和氧化还原环境,增强其胁迫抗性和生长性能。 
江南大学 2021-04-11
异亮氨酸工业生产菌代谢工程系统改造
本项目首先借助比较蛋白组学研究技术,从细胞内异亮氨酸合成及转运的整体网络入手,揭示其中影响氨基酸胞外积累的若干关键蛋白质,研究氨基酸合成及转运、代谢调控、底物利用、细胞通透等相关蛋白质的作用机制。然后采用系统生物学和代谢工程研究手段,利用启动子改造、基因共表达、酶定向进化等技术进行系统改造,以显著提高乳糖发酵短杆菌支链氨基酸生产水平。比较蛋白组学分析将为支链氨基酸高产机理研究奠定坚实理论基础,乳糖发酵短杆菌代谢工程系统改造为工业化应用提供有力技术支撑。 关键技术 L-异亮氨酸是人体 8 种必需氨基酸之一,因其具特殊的结构和功能,其用量逐年增长,目前国际上日本生产 L-异亮氨酸且占垄断地位,厂家有味之素、协和发酵和田边制药三家,均已发酵法生产,产率达 30-35 g/L,提取率 60-70%,我国的异亮氨酸研究起步晚,目前分批发酵大罐产酸率为 20-22g/L,总得率为 40- 50%,与日本相比较,我国的 L-异亮氨酸生产水平还很低下,主要是由于生产菌株绝大多数通过诱变选育获得,少数菌株利用基因工程手段改造,但仅局限于少数合成酶基因,这严重制约了支链氨基酸产率的进一步提高。本成果克服了行业内的菌株瓶颈,并优化获得了工业发酵工艺。
江南大学 2021-04-11
γ-氨基丁酸工业生产菌代谢工程系统改造
本项目分别从乳酸菌和大肠杆菌出发,通过基因工程和代谢工程改造菌株,并优化菌株发酵条件和发酵策略,提高了生物合成 GABA 的产量和生产效率, 1 L以玉米芯水解液为碳源的培养基中的培养的 L. buchneri WPZ001 细胞通过静置发酵和静息细胞转化累计可得到 GABA 117 g。主要创新点结论如下:发现 L. buchneri WPZ001 可利用木糖或玉米芯水解液为碳源生长并通过静置发酵高产 GABA;发现 E. coli BL21(DE3)/pET20b-torA-gadB 在信号肽 TorA 引导下可有效分泌表达 GadB 并可用于高效生产 GABA;发现在大肠杆菌中表达 Weimberg 途径可将木糖合成 GABA 的精简为 7 步反应;E. coli JWZ08/pWZt7-g3/pWZt7-xyl 以木糖直接合成 GABA 产量是此前葡萄糖直接合成 GABA 的报道的 3 倍。 
江南大学 2021-04-11
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