一、成果简介 目前，我国兽用细胞疫苗制备工艺主要使用转瓶进行，培养的细胞密度、抗原低，生产工艺落后，与国际上兽用疫苗生产水平存在较大差距。针对上述疫苗制备过程中存在的技术瓶颈结合我国狂犬病的流行情况，该项目使用与中国狂犬病毒街毒同源性最高的中国本土狂犬病疫苗毒株CTN-1株，采用微载体悬浮培养技术开发出了具有我国自主知识产权的狂犬病灭活疫苗。该项目已完成狂犬病毒微载体发酵培养技术平台的建立，并以之为基础研制出铝佐剂犬狂犬灭活疫苗(商品名：瑞倍尔安)，

1. 痛点问题 本项成果涉及新型疫苗的设计与应用，具体涉及生物大分子药物及疫苗的研发过程中的抗原精准设计。 2. 解决方案 基于AI的大分子药物及疫苗抗原设计。

“NMT界乔布斯”许越先生推荐创新平台 中关村NMT产业联盟推介成员单位创新产品 “生物安全，人人有责” 推出背景： 在国际竞争白热化，战争形态多样化的今天，生物安全已成为国家安全的重要组成部分，为积极应对这一挑战，2019年10月，生物安全法草案于首次提请十三届全国人大常委会第十四次会议审议。本次新冠肺炎疫情的爆发，让各界更加意识到，生物安全对于确保国家安全、保障社会稳定、人民群众生命安全和身体健康的重要性。 国家安全就是国家竞争，归根结底又是科技实力的竞争！因此，作为中国的高新技术企业，中关村NMT联盟的会员单位，旭月（北京）科技有限公司利用20多年的技术积累，以NMT：非损伤微测技术为底层核心技术，迅速推出了与国家生物安全相关多种检验，监测仪器设备，以及适用于多个学科及领域的研发平台： 《NMT生物安全创新平台》特制系列产品！   应对挑战： 1）有效性：随着研究的深入，单细胞的生理状态，以及对疫苗的生理反应，与处于机体组织器官中的细胞的差异，已逐渐成为研究中的瓶颈。NMT不仅可以检测单细胞，还可以实现对细胞的原位检测，以及对活体组织的在体检测，很好地弥补了这一研究手段的空白。 2）安全性：NMT是用于研究活体材料的生理环境，其所检测的Na+、H+、K+、Cl-等与细胞能量代谢、细胞凋亡、细胞形态维持等生理过程直接相关。 分类及用途： 1）《抗菌疫苗研究NMT工作站 》（型号：NMT-ABR-100） 基于底层核心NMT技术，以及成熟的技术解决方案，让科研人员可以马上投入相关科研创新工作。   2）《抗菌疫苗研究NMT工作站》（型号：NMT-ABR-200） 基于底层核心NMT技术，结合自身科研兴趣，以及其它相关技术参数，在我方技术人员协助下形成技术解决方案，让科研人员建立更具独有创新特色的实验平台。   《抗菌疫苗研究NMT工作站》（型号：NMT-ABR-100） 应对挑战： 1）有效性：随着研究的深入，单细胞的生理状态，以及对疫苗的生理反应，与处于机体组织器官中的细胞的差异，已逐渐成为研究中的瓶颈。NMT不仅可以检测单细胞，还可以实现对细胞的原位检测，以及对活体组织的在体检测，很好地弥补了这一研究手段的空白。 2）安全性：NMT是用于研究活体材料的生理环境，其所检测的Na+、H+、K+、Cl-等与细胞能量代谢、细胞凋亡、细胞形态维持等生理过程直接相关。 用途： 基于底层核心NMT技术，以及成熟的技术解决方案，让科研人员可以马上投入相关科研创新工作。   参数： 1.基本功能： 1.1针对抗菌疫苗研究设计 1.2活体、原位、非损伤检测 1.3可检测指标：H+、K+、Ca2+、Cl-、O2 2.性能： 2.1自动化操作 2.2长时间实时和动态监测 2.3无需标记 2.4立体3D流速检测 3.软件： 3.1imFluxes智能软件，可直接检测、输出离子分子的浓度与流速 《抗菌疫苗研究NMT工作站》（型号：NMT-ABR-200） 应对挑战： 1）有效性：随着研究的深入，单细胞的生理状态，以及对疫苗的生理反应，与处于机体组织器官中的细胞的差异，已逐渐成为研究中的瓶颈。NMT不仅可以检测单细胞，还可以实现对细胞的原位检测，以及对活体组织的在体检测，很好地弥补了这一研究手段的空白。 2）安全性：NMT是用于研究活体材料的生理环境，其所检测的Na+、H+、K+、Cl-等与细胞能量代谢、细胞凋亡、细胞形态维持等生理过程直接相关。 用途： 基于底层核心NMT技术，结合自身科研兴趣，以及其它相关技术参数，在我方技术人员协助下形成技术解决方案，让科研人员建立更具独有创新特色的实验平台。   参数： 1.基本功能： 1.1针对抗菌疫苗研究和研发设计 1.2活体、原位、非损伤检测 1.3可检测指标：H+、K+、Ca2+、Cl-、O2 1.4可实时监测和记录检测时的环境参数：温度、湿度、大气压、海拔、经纬度 1.5配备新指标拓展功能 2.性能： 2.1自动化操作 2.2长时间实时和动态监测 2.3无需标记 2.4立体3D流速检测 3.软件： 3.1imFluxes智能软件，可直接检测、输出离子分子的浓度与流速，以及检测时的环境参数

2020年3月8日，福建师范大学在bioRxiv上上传了一篇题为 Cryo-electron microscopy structure of the SADS-CoV spike glycoprotein provides insights into an evolution of unique coronavirus spike proteins 的研究，识别了SARS-CoV-2的S蛋白的低温-EM的融合前结构，分辨率为3.55埃。

抗感染功能蛋白质的发现与应用由山东大学微生物技术国家重点实验室谷立川教授团队研发，主要成果为：1. 抗铜绿假单胞菌功能蛋白质PslG，纳摩尔浓度可以降解>80%生物被膜并使其耐药性降低一个数量级。2. 抗龋齿功能蛋白，龋齿发病率>40%，全球累计20亿人收到影响。化学杀菌药物副作用太大，甚至会火上浇油。抗龋齿蛋白质第一次可以实现精准破坏压菌斑而不影响人体正常菌群。3. 抗生殖道感染功能蛋白质，与抗生素治疗相比，特异性攻击病原菌，对人体正常菌群没有任何不良影响。

本发明涉及一种蚕丝蛋白的提取方法，目前还没有一种提取条件温和、有利于减轻提取条件对蚕丝蛋白结构与性能影响的蚕丝蛋白的提取方法。本发明包括如下步骤：将蚕丝蛋白原料置于温度为95-100℃的CaCl2水溶液中溶解至未溶解部分呈胶状物，得溶解处理液；将溶解处理液用滤纸过滤，得蚕丝蛋白/CaCl2混合水溶液和未溶胶状物；将未溶胶状物清洗后得蚕丝蛋白胶体；和/或将蚕丝蛋白/CaCl2混合水溶液置于透析袋中透析纯化得蚕丝蛋白溶液；将蚕丝蛋白胶体和/或蚕丝蛋白溶液进行加工而制得成品蚕丝蛋白。本发明提取条件温和、有利于提高蚕丝蛋白的提取效率、减少蚕丝蛋白资源浪费、减轻提取条件对蚕丝蛋白结构与性能影响。

拓扑在数学上指图形在连续形变中所保持不变的空间性质，在化学领域则被用来描述分子在不断裂化学键的前提下保有的原子间和链段间的连接关系和空间关系。在高分子中，拓扑结构常常是调控高分子物理性能与功能的重要参数。在生命体系中，由于受到其生物合成机制的限制，新生蛋白质的主链拓扑结构均为线性结构。然而，从自然界中存在的少数非线性拓扑蛋白质（如套索蛋白、打结蛋白以及索烃蛋白等）的例子中，人们发现拓扑结构可赋予蛋白质额外的稳定性和生物功能，因此拓扑调控可成为蛋白质工程的一种新的策略。目前，人工设计的拓扑蛋白质结构仍然较少，其合成方法单一，亟需发展新的合成方法，以适应更多样、更复杂的拓扑结构的制备。 

本发明公开了一种融合蛋白 CMFO，其应用于制备的结核病亚单位疫苗。所述结核病亚单位疫苗，含有融合蛋白 CMFO，其浓度为0.1mg/ml 至 1mg/ml。本发明通过选择抗原基因和融合顺序制造出融合蛋白 CMFO，配合相应的疫苗佐剂 DMT 作为结核病亚单位疫苗，用于预防结核病潜伏感染的效果良好，安全性高。