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基于CRISPR/Cas9基因编辑系统的载体组合及其应用
01.成果简介 CRISPR/Cas9是细菌在长期演化过程中形成的一种适应性免疫防御系统。其工作原理是crRNA通过碱基配对与tracrRNA结合形成tracrRNA/crRNA复合物，此复合物引导核酸酶cas9蛋白在与crRNA配对的序列靶位点剪切双链DNA。经过研究，通过人工设计tracrRNA/crRNA，改造形成具有引导作用的sgRNA，可以引导Cas9蛋白在多种细胞的特定基因组位点上进行切割、修饰，并最终实现基因突变、插入或缺失。因此，CRISPR/Cas9系统已经被广泛应用于基因编辑技术领域。 近年来，CRISPR/Cas9基因编辑系统在真核生物和原核生物中得到了广泛的应用。在大肠杆菌等革兰氏阴性菌中，用一个载体表达cas9基因，同时由于革兰氏阴性菌重组效率低，需要在这个载体上表达λ-RED重组酶；在另一个载体中表达sgRNA和用于同源重组的同源臂序列。两个载体都转入大肠杆菌中时，sgRNA介导Cas9蛋白切割基因组上特定序列，形成双链断裂，刺激同源重组的发生，从而实现基因编辑。 本项成果构建了适用于盐单胞菌的基于CRISPR/Cas9的基因编辑系统。该系统由两个载体组成：第一个载体表达Cas9基因，且不需要表达λ-RED重组酶，实际操作中不再需要诱导λ-RED重组酶的表达，简化了步骤流程；第二个载体表达sgRNA，并含有用于同源重组的同源臂序列。从而实现了基因编辑。本项成果的技术优势包括： （1）基因编辑时间由原有的20余天缩短到7-8天； （2）N个基因编辑时间由原有的N个月缩短到3+5N天； （3）无需表达λ-RED重组酶。 图1 盐单胞菌TD01进行基因编辑的流程示意图02.应用前景 本项成果可作为CRISPR/Cas9基因编辑系统的载体，广泛应用于基因编辑领域。03.知识产权 本项成果已申请1项发明专利。04.团队介绍 本项目为多团队合作项目，其中一个团队的负责人为清华大学教授，博士生导师，长江学者特聘教授，国家杰出青年基金获得者。主要研究方向为合成生物学、微生物代谢工程、生物材料、工业生物技术。已发表国内外高水平学术论文数十篇，申请专利70余项。05.合作方式 投融资。06.联系方式邮箱：zhangxinrui@tsinghua.edu.cn
清华大学
2021-04-13
治疗高雄激素性痤疮的外用中药组合物及应用
本发明提供一种用于治疗多囊卵巢综合征高雄激素性痤疮的外用中药组合物，由以下重量配比的原料药组成：蒲公英100-300份，全蝎?200-500份，紫草150-450份，土茯苓200-500份，金银花150-450份，蛇床子100-300份，黄柏100-300份。药物的制剂形式为洗剂。本发明药物组合物经临床研究验证了其治疗多囊卵巢综合征高雄激素性痤疮的安全性和有效性，组合物药味少，易于质量控制，同时成本低廉。可在制备用于治疗多囊卵巢综合征高雄激素性痤疮的外用药物中应用。
浙江大学
2021-04-13
一种色变助剂组合物及其制备方法与应用
本发明公开了一种色变助剂组合物，它包括以下重量份的组分：混合物5.0份～40份、增容剂0.2份～10.0份、载体聚合物50.0份～94.8份；所述混合物中，包括以下重量份的组分：金属粉末0.3份～10.0份、金属氧化物60.0份～75.0份、热塑性聚合物10.0份～39.6份。本发明提供了一种新的色变助剂组合物，能够大幅度提高标记与基体材料的色差对比度；特别是，加入二季戊四醇磷酸酯、甲基乙基次膦酸锌等作为促进剂后，色差的对比度更高；同时，本发明还提供了一种简便、易操作、产品质量好的制备色变助剂组合物的方法。
四川大学
2016-09-13
基于云工作流的 Web 服务组合与调度系统
成果简介：云计算的发展使越来越多的计算和业务服务通过云端提供。与传 统的内部服务相比较,云中的服务通常隶属于不同的机构,具有自主性,会为 了自己的效用随时加入、离开网络,使传统的仅考虑时间或者费用的服务组合与调度算法失效。本技术引入服务信任的概念融入到云工作流管理模型， 从而实现兼顾时间、费用和可靠性的 Web 服务组合及调度管理。 项目来源：自行开发 技术领域：云计算、服务
北京理工大学
2021-04-14
生物基聚氨酯类产品的生物-化学组合合成技术
本成果聚焦于可再生木本植物油脂的生物-化学组合合成技术，合成了基于油脂的新型聚氨酯系列产品，并结合分子结构设计-性能调控构建了多功能、高性能且稳定的生物油脂基聚氨酯及其复合材料，为获得综合性能优良的新型生物基聚氨酯材料提供理论依据和技术支持。
华中科技大学
2021-12-09
一种基于组合指标的图像分割结果定量评价方法
本发明公开了一种基于组合指标的图像分割结果定量评价方法，包括：选择与待评测分割结果的图像所属类别相同的多张图片，将这些图片进行分割，得到分割结果集；对上述分割结果集进行人工主观评价，获取各分割结果的主观评价结果，得到主观评价集；对上述分割结果集进行多指标客观评价，计算各分割结果的客观评价指标值，得到客观评价集；用客观评价集作为分类器的输入，主观评价集作为输出，训练得到经过训练的分类器；计算待评测图像分割结果的客观评价指标值；将客观评价指标值输入经过训练的分类器中，得到评价结果。通过本发明方法可得到代
华中科技大学
2021-04-14
城市污水一体化组合工艺处理反应器
本发明采取先深入研究城市污水传统A2/O工艺等同步脱氮除磷的优缺点、重点研究反硝化脱氮除磷的新技术原理，再开发同步脱氮除磷新工艺。本发明对单泥SBR系统、双泥SBR系统的反硝化除磷的原理与工艺进行深入研究, 以此为基础，按反硝化除磷原理进行一体化扩大设计（7920倍）, 研发出新的工程流程和示范设备系统, 获得成功，为城市污水的大规模处理与工程化应用奠定了基础。从而，解决了城市污水处理领域同步脱氮除磷的关键性、共性技术难题。 本发明开发的同步脱氮除磷新工艺，对比当前国内外同类相关技术
华南理工大学
2021-04-14
一种利用组合结构实现承重墙托换方法
本发明公开了一种利用组合结构实现承重墙托换方法，该方法包括步骤:施工前障碍物清除，掏空 钢柱位置砖墙，设置支撑安全措施;基础放线定位开挖，钢筋制作，架设模板，预埋地脚螺栓，浇筑基 础混凝土并养护;钢柱及节点板制作，柱脚安装及节点连接;原砖墙包钢加固，加固框梁包钢处理;钢 梁制作与安装;钢结构防腐处理;待钢框架稳定无异常后，清理钢框架周围杂物并进行基础回填，对钢 梁和混凝土楼
武汉大学
2021-04-14
水处理组合工艺与生态高效低耗技术创新与研发
一、项目分类
关键核心技术突破
二、成果简介
主要内容：
① 用吸附-混凝-超滤组合工艺，高效去除水中天然有机物；采用光催化-吸附-膜分离组合工艺，有效去除水中亚硝胺类污染物；同时采用正反冲清洗方式的膜滤装置，最大程度提升清洗效果；研制了一种简单且高效的三相分离器，解决污泥沉淀区入流口和回流口的重合问题，提高了气液固的分离效果。
② 研制了具有不同内部构造的EDI工作模型，实现了无酸碱再生、零废酸废碱排放条件下的连续、高效的废水直接处理，所得淡化纯水和高浓度浓缩液均得到回收利用。
③ 研发了铝盐型、铁盐型、硅酸盐型、天然有机高分子型等一系列复合高效絮凝剂，在提高其絮凝性能、注重技术的经济性与实用性的同时保障了生态安全性。
④ 开发了以生物膜叠球填料为特征的剩余污泥减量型有机废水处理工艺，建立了基于生物电化学系统的有机废水能源化处理技术体系，实现了污泥减量化和污水处理能源化；通过开发联合改性催化剂和泥炭吸附剂，解决了既不能生物处理、也不具备能源化的废水处理问题。
⑤ 提供了一种高效低耗、应用范围广、使用便利的挂膜式浮动链曝气污染水体修复方法，有效实现区域污染水体的原位修复；系列重金属污染水体生态修复技术，特别是利用水生植物千屈菜修复铬污染水体，治理效果明显，美化景观环境。
项目特色：
本成果明显使操作费用降低、膜使用寿命延长、污水处理排污费减少，具有显著的技术优势，已在天津、江苏、辽宁、海南和广东等省市多家企业进行成功的实施转化与应用，取得了较好的经济效益及明显的生态、环境和社会效益。
南开大学
2022-07-28
一种鲁棒凸组合自适应电话回声消除方法
本成果是国家授权发明专利。该发明提供一种鲁棒凸组合自适应电话回声消除方法，该方法一方面能获得快的收敛速度和低的稳态误差，另一方面能获得较好的抗干扰能力；其回声消除效果好，能在电话双端通话的情况下，保持良好的工作状态。
西南交通大学
2016-06-27