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结核分枝杆菌融合蛋白 Mtb10.4-Hsp16.3 的构建.表达和 纯化方法及其应用
本发明选择结核杆菌生长期和休眠期主要的保护性抗原 Mtb10.4 和 Hsp16.3，构建融合蛋白 Mtb10.4-Hsp16.3(MH)。在大肠杆菌中表 达纯化该蛋白，将该蛋白和佐剂混合构建亚单位疫苗，分别于 BCG 初免后 12、14 周加强免疫 C57BL/6 小鼠两次，最后一次免疫 6 周后 检测细胞免疫反应，最后一次免疫后 10 周进行结核菌毒株&nb
兰州大学
2021-04-14
结核分枝杆菌融合蛋白Mtb10.4-Hsp16.3的构建.表达和纯化方法及其应用
本发明选择结核杆菌生长期和休眠期主要的保护性抗原Mtb10.4和Hsp16.3，构建融合蛋白Mtb10.4-Hsp16.3（MH）。在大肠杆菌中表达纯化该蛋白，将该蛋白和佐剂混合构建亚单位疫苗，分别于BCG初免后12、14周加强免疫C57BL/6小鼠两次，最后一次免疫6周后检测细胞免疫反应，最后一次免疫后10周进行结核菌毒株H37Rv攻击。结果：该融合蛋白能在大肠杆菌中稳定大量表达，经离子交换层析、凝胶过滤层析和疏水层析三步纯化得到纯度较高的蛋白；构建的亚单位疫苗免疫动物可产生针对结核杆菌特定抗原（Mtb10.4和Hsp16.3）的特异性细胞和体液免疫应答，具有较强的免疫原性；毒株攻击后，小鼠肺脏结核菌数量明显少于PBS组和BCG组。结论：本发明成功构建、表达和纯化不带任何标签的融合蛋白MH,此蛋白可诱导较强的细胞和体液免疫应答并具有一定的动物保护效应，有望成为临床结核病预防和治疗的候选疫苗。
兰州大学
2021-01-12
一种猪蓝耳病基因重组猪霍乱沙门氏菌疫苗及应用
研发阶段/n一种猪蓝耳病基因重组猪霍乱沙门氏菌疫苗及应用。 成果简介：沙门氏菌是一种胞内寄生的革兰氏阴性肠道杆菌，具有侵袭性。减毒沙门氏菌为载体的基因工程疫苗具有无法比拟的优越性，口服该种基因工程疫苗可以在激发产生抗沙门氏菌免疫应答的同时诱发特异性针对外源蛋白的体液和细胞免疫。猪蓝耳病是由猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）引起的一种以妊娠母猪繁殖障碍以及仔猪呼吸道疾病的高度接触传染病，可对猪场造成巨大的损失。本发明涉及一种猪蓝耳病基因重组猪霍乱沙门氏菌疫苗及应用，属于动物细菌基因工程技术领域，具
华中农业大学
2021-01-12
用于治疗或预防中东呼吸综合征冠状病毒的抗体药物及疫苗候选物
01. 成果简介 中东呼吸综合征冠状病毒（MERS-CoV）是2012年在中东地区首先发现的一种新型冠状病毒，与严重急性呼吸综合征冠状病毒（SARS-CoV）同属于β冠状病毒，能够引发严重的人类呼吸系统疾病。据世界卫生组织的最新统计表明，MERS-CoV已造成全球27个国家2428例感染，致死率高达35%。 MERS-CoV表面刺突蛋白（Spike）蛋白是病毒颗粒与细胞受体二肽基肽酶4（DPP4）作用的关键蛋白，也是MERS-CoV疫苗与保护性单克隆抗体研究的热门靶点。本项目团队在靶向刺突蛋白的高活性中和抗体筛选、鉴定、分子结构研究中取得了一系列突破。本团队在国际上首批报道了两株人源MERS-CoV中和抗体MERS-4与MERS-27，它们均能高效抑制假病毒与活病毒对体外培养细胞的侵染，在动物模型中也显示了很好的保护作用。该团队还综合运用结构生物学、生物化学以及病毒学研究方法阐明了这两株抗体识别Spike受体结合结构域（RBD）的不同位点，并阻断Spike与受体DPP4的结合。 本项目团队还利用一种稀有黑猩猩腺病毒AdC68为载体，搭载MERS-CoV表面全长的Spike蛋白，在转基因小鼠（hDPP4-KI）模型中，一次滴鼻免疫即可诱导产生长期保护性免疫反应，并完全预防小鼠感染或降低感染后的疾病进展速度。解决了目前研发的MERS-CoV疫苗大多需要进行多次免疫注射的复杂程序问题。进一步的抗体分析表明，免疫动物血清中含有广谱高滴度针对RBD的多克隆和单克隆中和抗体，能够有效阻断病毒与受体DPP4的结合，从而解析了其长期保护性免疫反应的分子基础和机制，为疫苗下一阶段进入大动物模型和人体临床试验做好了准备。 MERS-CoV及其相关中和抗体和疫苗研究时间轴AdC68-S重组疫苗在hDPP4-KI转基因小鼠模型上的保护效果02. 应用前景 本项成果可应用于治疗或预防中东呼吸综合征冠状病毒的抗体药物及疫苗候选物。03. 知识产权 本项成果已申请4项发明专利，其中3项已授权。04. 团队介绍 本项目团队由生命学院实验室与医学院实验室联合组成，两位实验室负责人分别为清华大学生命学院和医学院教授、博士生导师，主要研究方向分别为结构生物学与病毒学，已发表国内外高水平学术论文数十篇，联合申请专利4项。05.合作方式 技术许可。06.联系方式 邮箱：zhangxinrui@tsinghua.edu.cn
清华大学
2021-04-13
一种高转矩密度多盘-多气隙轴向磁通磁场调制永磁电机
本发明提供了一种高转矩密度多盘-多气隙轴向磁通磁场调制永 磁电机，其中该永磁电机具有多盘多气隙结构，由沿轴向方向上依次 交错排列的若干定子与转子构成而成，若定子数目为 Ns，转子数目为 Nr，定子与转子数目满足：Ns＝Nr+1(Nr＝2，3，4...)，最外侧两定子 不放置绕组，内侧定子放置环形绕组。按照本发明实现的调制永磁电 机，降低了绕组端部长度，减小了电机铜耗，提高了效率，两侧外定 子作为辅助磁路，保留了磁场调制电机的高电磁转矩密度、高功率因 数等特点，提高了电机的整体转矩密度，同时两侧外定子
华中科技大学
2021-04-14
一种抗大肠杆菌k88ac的单链抗体及其编码基因与应用
本发明涉及基因工程，具体公开了一种抗大肠杆菌k88ac的单链抗体及其编码基因。本发明将抗k88ac抗原的抗体可变区基因，与猪的抗体恒定区通过linker序列连接，形成scFv‑Fc结构。构建CMV启动子调控scFv‑Fc基因表达的重组载体k88‑p CMV5，使其在细胞水平高效表达。通过western和ELISA检测抗体可正常表达；且具有与k88ac抗原的结合能力。本发明成功获得了针对k88ac大肠杆菌的抗体基因，为得到抗腹泻转基因猪群提供了新方法，对于农业发展具有很大的经济效益。
中国农业大学
2021-04-11
一株植物乳杆菌在降低大规模肉鸡养殖时抗生素残留中的应用
本发明公开了一株植物乳杆菌在降低大规模肉鸡养殖时抗生素残留中的应用，属于畜禽饲用微生态制剂领域。本发明将植物乳杆菌P?8发酵液作为饲料添加剂，结果发现其可以有效降低大规模肉鸡养殖过程中抗生素在鸡肉中的残留，从而避免对环境造成的污染，以及避免抗生素残留肉鸡对人类健康造成的危害，具有重要的经济意义和社会意义。
青岛农业大学
2021-04-13
一种从花椒内生耐寒短杆菌发酵液中制备L-酪氨酸的方法
本发明公开了一种从花椒内生耐寒短杆菌发酵液中制备L-酪氨酸的方法，其特点是将花椒内生耐寒短杆菌于温度30℃恒温培养活化24h后，接种到发酵培养基中，于温度28～37℃，120～180r/min水浴中恒温振荡发酵培养24～72h；将发酵液在常温下以4000～6000r/min的速度离心15min后除去菌体获得上清液冷冻干燥；按样品与Sephadex LH-20质量比1:20～50且上样量为柱体积的20％将发酵液过Sephadex LH-20层析柱，用100mL纯水等度洗脱，按每份收集量20mL等份收集洗脱液F1～F5；将组分F3用制备型液相色谱仪进行分离纯化，冷冻干燥即得到L-酪氨酸，得率为8～15mg/L发酵液。
四川大学
2016-10-11
长寿老人源短双歧杆菌生理功能研究及直投式发酵剂的制备
一、成果简介 “长寿老人源短双歧杆菌生理功能研究及直投式发酵剂的制备”受国家高技术研究发展计划 (863 项目)的资助。本课题从我国广西巴马百岁以上长寿老人肠道筛选适于直投式发酵剂制备 的优良双歧杆菌菌株，构建膜过滤高密度培养体系，优化冻干发酵剂制备技术，生产高活性 直投式双歧杆菌菌粉。 技术指标：分
中国农业大学
2021-04-14
一种高产胞外多糖的枯草芽孢杆菌修复盐碱地土壤的方法
本发明属于土壤修复技术领域，具体为一种微生物修复盐碱地土壤的方法，步骤一：挑取保藏管菌株，接入LB液体培养基试管，5 mL/瓶，在37℃，180rpm下振荡培养过夜；按照0.1%的接种量将种子液接入250 mL的LB液体培养液试管基中，在37℃,静息培养48 h，以5000g离心10min，将菌体加入至0.1M的CaCl<subgt;2</subgt;溶液。本发明当中使用的微生物菌株不仅有耐盐碱的能力，同时还有能修复盐碱地的能力，由于海水倒灌导致水盐迁移，盐分停留在土壤表面，经过反复倒灌和风沙霜化，滨海周围土壤逐渐形成盐碱地。本实验这株高产胞外多糖的枯草芽孢杆菌可以促进土壤团聚体生成、减少盐结晶生成、促进土壤孔隙度增大。经修复后的土壤EC值能降低9.8%；>2mm、1‑2mm的团聚体分别增多了43.45%、25.09%；0.5mm‑1mm、0.25‑5mm的团聚体分别减少了48.6%、15.15%；孔隙度增加了17.92%。
南京工业大学
2021-01-12