本发明提出一株黑曲霉菌株及发酵菌剂及其应用。本发明提出一种黑曲霉H201KP280086菌株，该菌株的分类命名为黑曲霉Aspergillus niger，保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，其保藏编号为CGMCC No.3.17612。本发明的黑曲霉Aspergillus niger H201KP280086对花生壳中的纤维素、半纤维素和果胶组分同时具有较强的分解能力。本发明的高效花生壳降解真菌所制成的菌剂，可以加速花生壳基质的发酵过程，提高基质成品质量，为花生壳的有效利用提供了一条良好途径，减少了资源浪费。

一、项目分类 显著效益成果转化 二、技术分析 为了解决食用菌采后品质易劣变、货架期短等问题，研究团队基于食用菌采后生理特点，利用纳米保鲜技术，以聚乙烯为基质，研制了一种适合新鲜食用菌保鲜的纳米包装材料。本项成果获得国家授权发明专利3项（ZL201010293262.3、ZL201410366090.6、ZL201610188182.9），其中2项专利已成功转让，产品在江苏省灌南县金凯包装有限公司实现工厂化生产。 纳米包装膜厚度为40 μm，与普通聚乙烯包装膜相比，纵向拉伸强度提高了26.91%，水蒸气透过率降低了37.41%，CO2透过率降低了6.0%，O2透过率降低了8.0%。纳米保鲜技术的应用不仅显著提高包装材料的机械性能，并赋予了包材良好的抑菌、气体调节和清除自由基等特性，延缓了食用菌营养物质和风味物质的降解，将金针菇、双孢菇、杏鲍菇和草菇的货架期从14天、4天、17天和2天分别延长至22天、10天、35天和6天。

该技术利用生鲜水果、蔬菜、食用菌加工副产物，制作曲奇、饼干、面包、 面条、馒头等营养糕点，该技术适合糕点加工企业、面包生产企业、大众面食 生产企业。技术解决了生鲜果、菜、菌加工副产物综合高效利用问题，利用将 生鲜果、菜、菌的营养与保健功效与糕点、面点相结合，改善和提高了普通糕 点及面食制品的营养与功能，增加了糕点及面食制品的花色品种，以满足消费 者的多样化需求。 

该发明属于植物病害生物防治技术领域，具体涉及一种用于油菜根肿病生物防治的菌株拟康宁木霉ReTk1，该菌株能在油菜内进行内生性生长，同时还涉及一种生防菌拟康宁木霉ReTk1菌剂的制备方法，还涉及一种拟康宁木霉ReTk1菌株在制备治疗或预防油菜等十字花科植物根肿病药物中的应用。 可用于油菜等十字花科植物根肿病的生物防控。 转化条件：所需资金小，有大型固体发酵条件，能进行大量发酵产生分生孢子并进行孢子的收集分装等即可。 成果完成时间：2014年

本项目首先借助比较蛋白组学研究技术，从细胞内异亮氨酸合成及转运的整体网络入手，揭示其中影响氨基酸胞外积累的若干关键蛋白质，研究氨基酸合成及转运、代谢调控、底物利用、细胞通透等相关蛋白质的作用机制。然后采用系统生物学和代谢工程研究手段，利用启动子改造、基因共表达、酶定向进化等技术进行系统改造，以显著提高乳糖发酵短杆菌支链氨基酸生产水平。比较蛋白组学分析将为支链氨基酸高产机理研究奠定坚实理论基础，乳糖发酵短杆菌代谢工程系统改造为工业化应用提供有力技术支撑。 关键技术 L-异亮氨酸是人体 8 种必需氨基酸之一，因其具特殊的结构和功能，其用量逐年增长，目前国际上日本生产 L-异亮氨酸且占垄断地位，厂家有味之素、协和发酵和田边制药三家，均已发酵法生产，产率达 30-35 g/L，提取率 60-70%，我国的异亮氨酸研究起步晚，目前分批发酵大罐产酸率为 20-22g/L，总得率为 40- 50%，与日本相比较，我国的 L-异亮氨酸生产水平还很低下，主要是由于生产菌株绝大多数通过诱变选育获得，少数菌株利用基因工程手段改造，但仅局限于少数合成酶基因，这严重制约了支链氨基酸产率的进一步提高。本成果克服了行业内的菌株瓶颈，并优化获得了工业发酵工艺。

本项目分别从乳酸菌和大肠杆菌出发，通过基因工程和代谢工程改造菌株，并优化菌株发酵条件和发酵策略，提高了生物合成 GABA 的产量和生产效率, 1 L以玉米芯水解液为碳源的培养基中的培养的 L. buchneri WPZ001 细胞通过静置发酵和静息细胞转化累计可得到 GABA 117 g。主要创新点结论如下：发现 L. buchneri WPZ001 可利用木糖或玉米芯水解液为碳源生长并通过静置发酵高产 GABA；发现 E. coli BL21(DE3)/pET20b-torA-gadB 在信号肽 TorA 引导下可有效分泌表达 GadB 并可用于高效生产 GABA；发现在大肠杆菌中表达 Weimberg 途径可将木糖合成 GABA 的精简为 7 步反应；E. coli JWZ08/pWZt7-g3/pWZt7-xyl 以木糖直接合成 GABA 产量是此前葡萄糖直接合成 GABA 的报道的 3 倍。 

盐碱、干旱、高温、冻害和洪涝等逆境胁迫严重影响作物的正常生长发育，是造成农作物减产和品质下降的主要原因之一，严重影响农业的可持续发展。另一方面，对于粮食作物和多数经济作物来说，其功能叶片中的同化产物和衰老叶片中的营养物质不断向产量器官的转运，对作物产量和品质性状的形成具有重要的作用，作物的过早衰老不仅直接影响粮食作物的产量和品质等要素，对于绿叶类作物和观赏花卉还会影响到其货架寿命以及观赏价值等。 克隆叶片衰老和逆境抗性相关基因，并利用生物工程技术调控其在主要经济作物中的表达方式和表达水平，是提高和稳定作物产量、改善作物品质性状的有效手段，具有重大的经济效益和社会效益。然而，很多衰老或逆境抗性相关基因在植物细胞中高表达后，在增强转基因植株对特定胁迫的抗性、延缓植株衰老的同时，往往伴随着对植株正常生长和发育的不利影响，如导致植株矮小、生长迟缓或产量下降等，导致该基因无法直接应用于抗逆作物的培育。如果可以特异性地表达这些基因，让它们在特定的发育阶段或胁迫条件下高表达，而在正常的生长过程中维持在较低的基础水平，可以大大提高它们在基因工程中的应用性。 课题组前期克隆了一个植物叶片衰老的负调控因子。在转基因植物中过表达该基因可以显著延缓植物的衰老，并赋予植物对高盐、干旱等胁迫的抗性，但是，转基因植物的生长发育受到明显抑制，导致该基因无法被直接应用于抗逆作物的育种工作。课题组前期还分离鉴定了一段含有 14 个氨基酸的多肽序列，命名为 WX01。我们对 WX01的功能研究发现其包含独特的蛋白降解信号，能够响应发育与环境信号，在转录后水平调控与它融合的目的蛋白的稳定性，从而使目的蛋白在光下正常旺盛生长的植株中降解、但在启动衰老或者高盐、高温和失水等多种逆境胁迫条件下特异积累。我们利用 WX01 与前述衰老负调节因子构建了融合基因 WX02，并转入模式植物拟南芥中，发现该融合基因可以恢复衰老负调节因子积累造成的植株矮小、生长抑制的表型，但是保留了其延缓衰老、促进光合和提高转基因植物对高盐、干旱等逆境胁迫的抗性的功能。课题组进一步将 WX02 融合基因转入经济作物大豆中进行功能验证，获得了可稳定遗传的多个株系单拷贝纯合转基因大豆材料。对转基因大豆的表型分析同样证明，WX02 转基因大豆对高盐、干旱胁迫的抗性显著提高。上述研究结果表明 WX02 融合基因在抗逆转基因作物新品种培育中具有重要的应用价值。围绕该项目已经申请了 2 项国家发明专利，1 项国际 PCT 专利，其中 1 项国家发明专利已经获得授权。 

本发明公开了一种抗龙卷风格栅设计方法，首先确定格栅竖直高度H，实际需求的格栅通风面积A，与框架前侧横向连接杆连接的平面板的宽度l1，挡板的厚度t，然后选取挡板中间的弯折角，确定格栅中挡板的层数n，上下相邻两块挡板弯折角顶点之间的距离h，最后计算格栅的水平厚度W，确定抗龙卷风格栅的结构。本发明方法设计的框架和连接杆件主要起到保持整体结构稳定的作用，挡板则用来提供通风面积与对内部的防护作用，经过实际验证具有非常好的通风和防护性能，对于核电站等相关设施具有十分主要的意义。

一种抗弯扭的组合式箱体，由至少２个箱体构件单元沿纵向拼装而成，箱体构件单元包括截面为Ｈ形的中心梁和由两块钣金分别经多次折弯后对拼焊接而成的边梁，中心梁和边梁之间焊有斜撑梁，中心梁、边梁和斜撑梁的长度方向均布焊接有从两侧放入的侧隔板和从上下放入的竖隔板，中心梁、边梁、斜撑梁的两头分别焊接有前端板和后端板，边梁、侧隔板、前端板、后端板的左右两侧分别焊接有左侧板和右侧板，边梁、竖隔板、前端板、后端板、左侧板、右侧板的上下两侧分别焊接有顶板和底板。本发明以解决现有箱体结构的抗弯刚度、抗扭刚度不足的问题，该抗弯扭组合式箱体抗弯抗扭能力强，结构简单、对称，并且可组合使用以达到所需长度，实际使用灵活性强。

石油化工、冶金、电力等生产装置中加热炉余热回收系统中加热炉对流段炉管及空气预热器中普遍存在着低温硫酸露点腐蚀，造成加热炉对流段钉头管、空气预热器、省煤器等腐蚀穿孔。化学镀镍磷合金是以次亚磷酸盐为还原剂，经过自催化的氧化-还原反应而析出Ni-P合金镀层的工艺。在Ni-P化学镀层中加入硬颗粒形成复合镀层，在保持一定耐蚀性能的基础上，可以提高镀层的综合性能，从而具有更为广泛的应用前景。本项目将纳米技术应用到化学镀中，开发出纳米二氧化硅颗粒强化复合化学镀层，复合镀层为非晶结构，具有优良的耐蚀、耐磨性能，且结合强度较好，不会对炉管产生附加热阻，并成功实现工业化，将该技术应用于中石化公司茂名分公司重质白土装置加热炉对流段炉管，该加热炉对流段炉管原使用2个月后就发生腐蚀穿孔泄漏，而采用纳米复合镀防护后的炉管已安全运行18个月，状况良好。2011年通过中石化股份公司的鉴定，成果达到国际先进水平。