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结核分枝杆菌疫苗新型免疫佐剂及其应
小试阶段/n该项目开发了能特异性结合BCG糖脂抗原的DNA适配子及其应用，属于分子微生物学和感染免疫学领域。发明的DNA适配子可特异性与BCG表面ManLAM结合，募集并活化更多树突状细胞到外周淋巴结、抑制调节性T细胞、调节性B细胞增殖、增强Th1型细胞反应等，提高BCG的免疫原性；小鼠结核攻毒动物实验表明BCG与本发明DNA适配子联合免疫小鼠后，获得比单独BCG免疫更强的免疫保护作用。该发明公开的DNA适配子可以用于制备新型免疫佐剂以增强BCG抗结核感染的免疫原性，为结核病防治提供了新的策略和新的
武汉大学
2021-01-12
结核分枝杆菌融合蛋白 EAMMH、其构建、表达和纯化 方法及其应用
本发明成功将 EAMM 蛋白和抗原 HspX 在基因水平进行融合构 建了新的融合蛋白 EAMMH，并将该不带标签的融合蛋白成功进行表 达和纯化。EAMMH 融合蛋白以可溶形式表达，明显改善了 EAMM 以包涵体进行表达的状况。此外，EAMMH 蛋白融合了结核分枝杆菌 主要的生长期抗原和休眠期抗原，并可诱导较强的针对各期抗原的特 异性细胞免疫和体液免疫应答。小鼠结核分枝杆菌气雾攻击模型证 明，该新的融合蛋白疫苗具
兰州大学
2021-04-14
结核分枝杆菌融合蛋白EAMMH、其构建、表达和纯化方法及其应用
本发明成功将EAMM蛋白和抗原HspX在基因水平进行融合构建了 新的融合蛋白EAMMH，并将该不带标签的融合蛋白成功进行表达和纯 化。EAMMH融合蛋白以可溶形式表达，明显改善了EAMM以包涵体进行 表达的状况。此外，EAMMH蛋白融合了结核分枝杆菌主要的生长期抗原和休眠期抗原，并可诱导较强的针对各期抗原的特异性细胞免疫和体液免疫应答。
兰州大学
2021-01-12
多重PCR-反向斑点杂交技术检测结核分枝杆菌耐药性的方法
本发明涉及到一种多重PCR-反向斑点杂交技术检测结核分枝杆菌耐药性的方法,即是一种基于多重PCR的反向斑点杂交技术检测结核分枝杆菌耐药性的方法,包括了引物的设计、探针的设计、杂交试验、结果判定,能够同时检测结核分枝杆菌对RIF、INH和EMB三种药的耐药性,大大缩短了检测的时间,结果可靠。
四川大学
2017-12-28
结核分枝杆菌融合蛋白 Mtb10.4-Hsp16.3 的构建.表达和 纯化方法及其应用
本发明选择结核杆菌生长期和休眠期主要的保护性抗原 Mtb10.4 和 Hsp16.3，构建融合蛋白 Mtb10.4-Hsp16.3(MH)。在大肠杆菌中表 达纯化该蛋白，将该蛋白和佐剂混合构建亚单位疫苗，分别于 BCG 初免后 12、14 周加强免疫 C57BL/6 小鼠两次，最后一次免疫 6 周后 检测细胞免疫反应，最后一次免疫后 10 周进行结核菌毒株&nb
兰州大学
2021-04-14
结核分枝杆菌融合蛋白 Mtb10.4-Hsp16.3 的构建.表达和 纯化方法及其应用
本发明选择结核杆菌生长期和休眠期主要的保护性抗原 Mtb10.4 和 Hsp16.3，构建融合蛋白 Mtb10.4-Hsp16.3(MH)。在大肠杆菌中表 达纯化该蛋白，将该蛋白和佐剂混合构建亚单位疫苗，分别于 BCG 初免后 12、14 周加强免疫 C57BL/6 小鼠两次，最后一次免疫 6 周后 检测细胞免疫反应，最后一次免疫后 10 周进行结核菌毒株&nb
兰州大学
2021-04-14
结核分枝杆菌融合蛋白Mtb10.4-Hsp16.3的构建.表达和纯化方法及其应用
本发明选择结核杆菌生长期和休眠期主要的保护性抗原Mtb10.4 和Hsp16.3，构建融合蛋白Mtb10.4-Hsp16.3（MH）。在大肠杆菌中表 达纯化该蛋白，将该蛋白和佐剂混合构建亚单位疫苗，分别于BCG初 免后12、14周加强免疫C57BL/6小鼠两次，最后一次免疫6周后检测细 胞免疫反应，最后一次免疫后10周进行结核菌毒株H37Rv攻击。结果： 该融合蛋白能在大肠杆菌中稳定大量表达，经离子交换层析、凝胶过 滤层析和疏水层析三步纯化得到纯度较高的蛋白；构建的亚单位疫苗 免疫动物可产生
兰州大学
2021-01-12
乙胺丁醇靶标蛋白，分枝杆菌细胞壁阿拉伯糖基转移酶结构
南开大学药物化学生物学国家重点实验室、生命科学学院、药学院教授饶子和院士，南开大学生命科学学院2014届博士毕业生、上海科技大学王权教授，英国伯明翰大学Gurdyal Besra教授，上海科技大学李俊副研究员为论文共同通讯作者。南开大学生命科学学院2019届博士毕业生张璐（排名第一）、上海科技大学博士生赵耀为论文共同第一作者，南开大学药学院赵炜教授是该成果合作者之一，南开大学生命科学学院2016级本科生吴方羽参与文章发表。南开大学细胞应答交叉科学中心为论文通讯单位之一。据介绍，该联合研究团队综合利用冷冻电子显微镜技术和X射线晶体学技术解析了抗结核一线药物乙胺丁醇与靶标蛋白，分枝杆菌膜蛋白糖基转移酶EmbA-EmbB-AcpM2蛋白复合物，及与EmbC2-AcpM2蛋白复合物与乙胺丁醇结合的高分辨率三维结构，首次阐明这个使用了近60年，治愈了无数结核病感染者的一线药物的抑制作用机理，并首次揭示了临床耐药的分子机制。研究结果显示，每个Emb蛋白单体均为含有氨基端15次跨膜螺旋的跨膜区和羧基端可溶区结构域的折叠形式，并且以EmbA-EmbB或EmbC-EmbC组成异源或同源二聚体，并首次报道了每个Emb蛋白均在胞内结合一个酰基载脂蛋白AcpM，最终组成EmbA-EmbB-AcpM2/EmbC2-AcpM2蛋白复合物。据悉，这是世界上第一个解析的源于结核分枝杆菌的膜蛋白三维结构，该研究共解析并向蛋白质数据库（protein data bank, PDB）投递5个蛋白质结构坐标，为全世界范围研发设计新型抗结核抑制剂提供可靠的数据支撑。饶子和院士团队长期致力于抗结核药物重要靶标蛋白质的结构和功能研究以及抗结核新药研发，此项最新研究成果是继2018年饶子和院士南开团队在《科学》杂志发表分枝杆菌呼吸链超级复合物高分辨率结构，2019年上海科技大学团队在《细胞》杂志发表分枝杆菌关键药靶跨膜转运蛋白MmpL3与抑制剂复合物结构后，在抗结核药物研发领域的又一重大科研成果。
南开大学
2021-04-11
一种结核分枝杆菌自然感染非人灵长类动物模型的建立方法及装置
本发明提供一种结核分枝杆菌自然感染非人灵长类动物模型的建立方法，通过将健康非人灵长类动 物与经过人工感染结核并有咳嗽的非人灵长类动物一起饲养于气流自循环组合式负压隔离器中，使其自 然感染上结核。自然感染模型的建立有助于揭示激活结核潜伏感染的条件因子(如艾滋病毒)及相关机 制。并且为研发和评估抗结核疫苗和药物提供了更有临床意义的非人灵长类动物模型。
武汉大学
2021-04-14
一种用于等温扩增检测结核分枝杆菌的引物及包含该引物的检测试剂和方法
本发明公开了一种用于等温扩增检测结核分枝杆菌的引物及包含该引物的检测试剂和方法，所述引物包括上游序列和下游序列，其序列分别如SEQ ID NO:1和SEQ ID NO:2所示；包含该引物的检测试剂包括上游引物85BPF1、下游引物85BPR1和探针85BPB1(SEQ ID NO:3)；利用所述检测试剂等温扩增检测结核分枝杆菌的方法，包括以下步骤：将待检测基因样本与所述检测试剂混合，放置在可收集FAM荧光的仪器中，在35?45℃条件下孵育，检测荧光值，根据有无阳性扩增反应，判断待检测基因样本是否属于结核分枝杆菌的基因。相对于现有技术，本发明通过检测结核杆菌中的基因组，可以特异地检测结核杆菌基因，能够有效区分结核分枝杆菌和非结核分支杆菌，特异性高，反应时间短，温度过程简单。
东南大学
2021-04-11