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一种猪腹膜间皮细胞的培养方法
其他成果/n一种猪腹膜间皮细胞的培养方法,涉及细胞培养技术领域。所述猪腹膜间皮细胞的培养方法包括以下步骤:将清理后的腹膜平铺于培养皿中进行酶解消化,得原代细胞悬液;将所述原代细胞悬液离心,保留沉淀物,并将所述沉淀物用原代培养液重悬,筛选得原代细胞;其中,所述原代培养液包含15%~20%(v/v)胎牛血清、79%~85%(v/v)DMEM/F‑12基础培养基、0.8%~1.1%(v/v)青链霉素混合液、0.03~0.05%(v/v)EGF以及0.05%~0.12%(v/v)ITS。本发明旨在提供一种适
武汉轻工大学 2021-01-12
猪背膘厚CMYA1基因及其制备方法
研发阶段/n可用于猪胴体性状的遗传改良,在猪的遗传改良中胴体性状的测定需要进行屠宰测定,只有背膘厚度性状可在达到目标体重时进行活体测定,利用这3项专利,可以进行胴体性状的改良(不需要进行屠宰测定),降低背膘厚度,降低板油率和内脂率,提高瘦肉率和腿臀肉骨率。
华中农业大学 2021-01-12
猪胴体和免疫性状相关分子标记检测技术
ZL201110056015.6专利涉及作为猪标记辅助选择应用的与猪白细胞计数相关的分子标记及应用。所述的分子标记为蓝耳病毒受体唾液酸黏附素基因的片段,该专利中发现了一个SNP位点(367G-367A),建立了一种针对该SNP位点的PCR-Hin6I-RFLP检测方法。该SNP位点可作为猪白细胞计数的分子标记进行标记辅助选择改良猪的抗病力。 ZL201010223062.0专利涉及作为猪标记辅助选择应用的与免疫性状相关的分子标记及应用。所述的分子标记由蓝耳病毒受体硫酸乙酰肝素个的内切酶基因HPSE克隆得到,在该基因猪发现了一个SNP位点(782A-782G),建立了一种针对该SNP位点的PCR-AluⅠ-RFLP检测方法。该SNP位点可作为猪免疫性状的分子标记进行标记辅助选择改良猪的抗病力。 ZL201010278643.4专利涉及作为猪标记辅助选择应用的与板油率,内脂率,腿臀肉骨率和眼肌面积等性状相关的分子标记及应用。 成果可在猪胴体性状与抗病力改良标记辅助育种中进行应用,三个专利组合使用可以降低板油率、内脂率、提高腿臀肉骨率、瘦肉率和抗病力,对于猪的分子育种具有显著的社会效益和经济效益。 转化条件:分子生物学常规设备和条件。 成果完成时间:2016年2月
华中农业大学 2021-01-12
与猪产仔数性状相关的分子标记技术
该项目属于猪分子标记制备与应用技术领域,具体涉及一种与猪产仔数性状相关的分子标记及其应用,所述的分子标记从猪PTGS2基因内含子基因片段筛选得到。 该项目还公开了该分子标记的制备技术及其在与猪产仔数性状关联分析中的应用。 该项目为猪产仔数性状标记辅助检测提供了新的标记资源。 转化条件: 转化所需配套条件(资金、场地、设备等) 需要全自动DNA提取设备及联系大型种猪场实施。 成果完成时间:2016年
华中农业大学 2021-01-12
猪传染性胃肠炎、猪流行性腹泻二联灭活疫苗(WH-1株+AJ1102株)
该项目突破了猪流行性腹泻病毒培养条件苛刻的技术瓶颈,以目前流行的PEDV变异毒株和TGEV为基础,研制了猪流行性腹泻和猪传染性胃肠炎二联灭活疫苗。 市场预期: 作为目前国内被正式批准上市的首个PEDV流行毒株的疫苗,该疫苗具有低成本高效益的预防疗法, 同时具有很好的社会经济效益。 转化条件: 资金、场地、设备等条件均以具备,目前该疫苗已经转化。 成果完成时间:2016年
华中农业大学 2021-01-12
XM-402H冠状动脉粥硬化带血栓模型
XM-402H冠状动脉粥硬化带血栓模型   XM-402H冠状动脉粥硬化带血栓模型放大10倍,显示血管内凝血以及血栓在动脉斑块不同病理阶段,显示动脉狭窄对人体的危害。 尺寸:放大10倍,16×16×13cm 材质:PVC材料
上海欣曼科教设备有限公司 2021-08-23
H5N1亚型禽流感病毒与鸭肠炎病毒活载体疫苗
该成果以鸭肠炎病毒弱毒疫苗株C-KCE为载体,运用基因编辑技术细菌人工染色体技术,在UL26和UL27的基因间隙,快速、稳定、精准的插入高致病性禽流感病毒H5N1的主要免疫源性基因血凝素HA。HA蛋白随着C-KCE的复制高效的表达。从而构建了鸭肠炎病毒载体高致病性禽流感病毒基因工程二价疫苗。该基因工程二价疫苗能不但同时抵御高致病性禽流感病毒和鸭肠炎病毒的攻击,而且能有效阻止排毒和散毒。对高致病性禽流感的抵御更是免疫后三天达到100%保护率。有效解决了当前肉鸭饲养周期短,传统的高致病性禽流感病毒灭活免疫不能在饲养周期内产生高水平的抗体,起到保护作用的缺陷。因此,该基因工程二价疫苗不但能用在蛋鸭也能用于肉鸭,减少感染鸭肠炎病毒和高致病性禽流感的风险。 我国具有悠久的水禽养殖的历史,水禽在我们国民经济中占据着举足轻重的地位。水禽是禽流感病毒重要的自然宿主,严重危害了我国水禽养殖业的健康可持续发展。该研究成果能有效的解决水禽感染高致病性禽流感的难题,起到一针防二病,省时省力。还能减少反复免疫对水禽的应激次数。因此,该基因工程二价疫苗具有广阔的市场前景。 转化条件:需建立该产品的GMP生产线。 成果完成时间:2017年12月
华中农业大学 2021-01-12
揭示病毒首先攻击肺泡的研究
2020年1月26日,同济大学医学院、附属东方医院左为团队在预印本网站bioRxiv上发布的研究成果显示:II型肺泡很可能正是2019-nCoV感染的靶细胞。 左为团队基于中国科学院上海巴斯德研究所和中国科学院武汉病毒研究所的两项最新研究成果,对新型冠状病毒感染人的机制和通路继续深入进行分析。团队利用共享数据库,采用高通量单细胞测序的方法,针对库中当时的8名患者,分析了43000多个人体肺细胞的单细胞RNA测序数据(健康人),希望找到病毒最先攻击的位置。“受体的门开在哪里,病毒会先攻击哪个部位?都是我们非常想知道的。”左为说,研究结果显示,病毒首先攻击的不是上呼吸道,而是位于人体深部的肺泡。 
同济大学 2021-04-10
新冠病毒全人源抗体研究
复旦大学生物医学研究院蓝斐课题组、复旦大学附属上海市公共卫生临床中心新冠研究团队与上海艾跃生物单抗部门组成的新冠病毒联合应急攻关团队传来好消息。该团队从新型冠状病毒肺炎康复患者来源的样本中,分离单B细胞并PCR克隆抗体可变区,快速获取且筛选了上百株全人源抗体,发现其中多株可识别新冠病毒(WHO最新命名为“SARS-CoV-2”)RBD抗原。这项研究为开发全人源中和性抗体药(Human NeutralizationAntibody)提供了有效的快速研发方案以及候选抗体。上述成果的最大特点在于,这些抗体是来自康复病人体内天然产生的全人源新冠病毒抗体。据悉,组成应急攻关团队的三方将进一步通过“产学研一体化”的方式紧密合作,继续从近期康复者来源的样本中筛选出更多病毒特异性抗体,完成中和性试验,以期获得可阻止病毒侵染人体细胞的全人源中和性抗体。应急攻关团队积极响应科技部号召,把研究成果第一时间公布出来应用到战胜疫情中,详细数据和结果将会在近期发布。
复旦大学 2021-04-10
新冠病毒干细胞移植疗法
近日,上海大学的赵春华教授团队在中国科学院科技论文预发布平台ChinaXiv发表重要工作,在7名新冠肺炎患者中进行临床实验,发现间充质干细胞移植疗法能迅速、显著改善重症及危重症患者的预后,有效规避细胞因子风暴,且无明显副作用,为新冠肺炎患者的临床治疗提出新思路。目前认为,由于ACE2受体在肺泡2型细胞、血管内皮细胞等高度、广泛表达,因此新冠病毒一旦入侵人体即迅速扩散,并容易过度刺激免疫系统,产生IL-2、IL-6、GSCF、IP10、MCP1等分子,进而触发细胞因子风暴甚至导致死亡。最近发表在柳叶刀上的研究也显示,重症监护室中的新冠肺炎重症患者血浆细胞因子水平显著升高,提示细胞因子风暴在新冠病毒致死过程中扮演的重要角色。针对这种情况,临床采用激素治疗抑制细胞因子的产生;采用非载体抗炎药和大剂量维生素C降低炎症反应的程度;或直接采用IL-6等细胞因子的单克隆抗体,减弱免疫系统的攻击性。但是这些手段主要针对免疫反应的下游,作用较为片面,免疫调节作用不强。因此,研究者将目光转向间充质干细胞(MSCs)移植:这是一项成熟可靠的技术,已在移植排异和系统性红斑狼疮等免疫介导的炎症疾病治疗中得到广泛应用。间充质干细胞存在于骨髓、器官间质等结缔组织中,具有极强的分化能力;可通过干扰抗原提呈细胞的激活和成熟、抑制 T 淋巴细胞的增殖、诱导活化T细胞凋亡和影响树突状细胞的风化,进而起到免疫调节和免疫抑制作用。在2020年1月23日至2月16日期间,研究者共征集了首都医科大学附属北京安佑医院的7名COVID-19患者,其中包括1名危重症患者、4名重症患者和2名轻症患者,探究间充质干细胞移植后14天内,患者的免疫系统和炎症系统功能变化,以及副作用的发生情况。新冠肺炎患者移植时间轴1. 无显著不良反应间充质干细胞移植前,患者存在高烧(38.5°C±0.5°C)、虚弱、呼吸急促和低氧饱和度的症状;移植后2?4天,所有患者的所有症状均消失,安静时血氧饱和度上升至95%以上。此外,移植后两小时内未观察到急性过敏反应,此后也未出现迟发性超敏反应或继发感染,初步证明该疗法的安全性。2. 迅速显著改善患者临床症状和生化指标研究中1例危重症患者存在高血压史,一度达到3级高血压,1月31日接受间充质干细胞移植,疗效尤其显著。其直接效应表现在:移植后2周内,血浆淋巴细胞水平明显下降,血浆C反应蛋白水平从105.5 g/L(2月1日达峰191.0 g/L)降低10倍左右,恢复到10.1 g/L,表明炎症反应迅速缓解;在不额外吸氧的情况下,血氧饱和度从89%升高至98%,表明肺泡换气功能基本恢复。间充质干细胞移植有效阻止免疫系统对器官的攻击。2月1日,患者血浆天冬氨酸转氨酶、肌酸激酶活性和肌红蛋白分别激增至57 U/L、513 U/L和138 ng/ml,表明肝脏和心脏遭受严重损害;但这些功能性生化指标的水平均在移植后2?4天降至正常参考值,2月13日恢复至正常水平,分别为19 U/L,40 U/L和43 ng/ml。另外,MSC移植能显著加快治疗进程。移植后4天,新冠肺炎危重症患者呼吸频率降至正常范围、发烧和呼吸急促等症状消失。移植后9天,胸部CT成像显示毛玻璃样混浊和肺炎浸润已大大减少。危重患者肺部影像学显示症状改善3. 有效规避细胞因子风暴研究者通过质谱流式分析发现间充质干细胞移植后,导致细胞因子风暴的元凶——过度活化的免疫细胞CXCR3 + CD4 + T细胞、CXCR3 + CD8 + T细胞和CXCR3 + NK细胞在3-6天内消失。另外,CD14 + CD11c + CD11bmid调控的树突状细胞数量急剧增加。另外,与安慰剂对照组相比,MSC治疗组的TNF-α水平显着降低而IL-10水平升高。以上结果在重症患者中尤其显著。轻症和危重症患者外周血细胞分析4. 间充质干细胞本身不会感染新冠病毒研究者对患者体内移植的间充质干细胞作RNA测序,发现其不表达新冠病毒受体ACE2或TMPRSS2。此外,抗炎和营养因子如TGF-β、HGF、LIF、GAL、NOA1、FGF、VEGF、EGF、BDNF和NGF等在MSC中高表达,进一步证明了其免疫调节和保护功能。此外,SPA和SPC在MSC中也高度表达,提示MSC后续分化为新冠病毒易感的肺泡2型细胞的潜在可能性。 移植患者血浆细胞因子的改变本研究为新冠肺炎重症患者提出了除激素治疗、抗炎治疗以外的新思路,运用成熟的间充质干细胞移植技术有效规避细胞因子风暴,大大减少副作用,并显著促进治疗的进展。该方法的安全可靠性已经临床实践检验,为降低新冠重症、危重症患者的死亡率提供新的希望!参考文献:Zikuan Leng, et al. Transplantation of ACE2- mesenchymal stem cells improves the outcome of patients with COVID-19 pneumonia. ChinaXiv. 28 Feb, 2020.张礼翼,等. 间充质干细胞在器官移植中发挥免疫抑制作用及机制探讨的研究进展. 器官移植. 2019.点击查看原文
上海大学 2021-04-10
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