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评估基因编辑工具
酶
的新方法以及高保真的新基因编辑
酶
CRISPR/Cas9 (clustered regularly interspaced short palindromic repeats and CRISPR-associated proteins)是目前最常用的基因编辑工具酶,在科研领域被广泛应用,而在临床方面的应用因为其脱靶活性一度停滞不前。它通过guide RNA(gRNA)与靶向DNA序列的配对,从而将Cas9锚定在靶向基因并诱导产生DNA双链断裂(DSB)。在基因编辑诱发的DSB的修复过程中,一定几率会产生基因突变或者外源DNA片段的插入,从而达到基因编辑的目的。在实际应用过程中,一个好的基因编辑酶Cas9需要同时满足高效切割靶位点、低脱靶活性和低染色体异常三个特点。目前在这三个方面,有一部分基于PCR的方法用于估算基因编辑效率,但其结果可靠性有待提高;有一些基于高通量测序的方法可以在体内或者体外检测基因编辑酶的脱靶活性;尚无系统的可定量的测量基因组异常结构的方法。本项目开发了一种新的方法,可以用来同时定量检测Cas9编辑效率和脱靶活性以及编辑引起的染色体异常结构,即primer-extension-mediated sequencing(PEM-seq)。这是对基因编辑和DNA损伤修复等领域都有巨大促进作用的新技术。与此同时,该项目包括了该团队利用PEM-seq筛选出的一个相比于现有Cas9变体具有更低脱靶活性且与野生型Cas9切割效率相当的Cas9变体further enhanced Cas9 (FeCas9)。
北京大学
2021-02-01
发酵香肠
酶
法增香技术
发酵香肠是一类高档肉制品,以其风味受到消费者欢迎。本技术利用酶法促 进发酵香肠生产过程中风味的形成,在保持产品原有风味、香型不变的情况下, 使其风味物质形成量增大 7 倍(以 GC/MS 出峰面积计),生产时间明显缩短,产 品风味更浓、持久性更强。
江南大学
2021-04-11
酶
法生产5’-核苷酸
5’-核苷酸为生物体内重要的生化物质,参与多种生理生化反应。本项目即利用核糖核酸(RNA)为原料,通过酶催化反应生成四种5’-核苷酸,再经分离纯化,最后获得高品位的5’-腺苷酸(5’-AMP)、5’-鸟苷酸(5’-GMP)、5’-胞苷酸( ’-CMP)和5’-尿苷酸(5’-UMP)等四种5’-核苷酸产品。这四种核苷酸目前作为营养强化剂,添加到婴儿配方奶粉中,或作为各种核酸药物中间体。 本项目的特点是:1)提取高活力的磷酸二酯酶,代替桔青霉直接发酵液,大大减少了设备投资及生产成本,有效地消除了对环境的污染;2)通过对酶的预处理,有效地控制了酶反应过程中的副反应,使核苷酸转化率明显提高;3)通过新型离子交换树脂的有序排列组合,可一次分离纯化得到高纯度单核苷酸,技术上收率达80%以上;4)使用本项目生产出来的产品,含量和纯度均可达 %以上。达到国外先进水平。
华东理工大学
2021-02-01
酶
的新型固定化系列技术
已有样品/n针对酶在工程化应用中的缺陷,如易失活、不具回收性、抗逆性差 等,采用新型固定化技术,制备出具有高活性、高耐逆和工程化回用性 良好的固定化脂肪酶,提高酶活力 10-46 倍。如:以碳纳米管为载体整 合其它方法固定化 BCL,固定化酶最大蛋白比活达 50,200 U/min/g protein,酶活回收率达 3,740%,为游离酶的 54 倍,是 MPR-NKA 固定化 酶的 1.5 倍,且大幅缩短了酶促反应时间,10 分钟就能使手性拆分反应 达到平衡,较国际报道的最高水平提高 200 倍,
华中科技大学
2021-01-12
α-淀粉
酶
抑制蛋白的制备
α-淀粉酶抑制剂是一种纯天然生物活性物质,属于糖水解酶抑制剂的一种。 α-淀粉酶抑制剂通过对淀粉酶的抑制作用而发挥减肥效应,并经胃肠道排出体外,因此不必进入血液循环系统,不作用于大脑中枢,减肥的同时不抑制食欲,使用剂量很高时也无副作用,符合世界卫生组织的减肥原则。对于肥胖患者,可减少糖向脂肪转化,延缓肠道的排空,增加脂肪消耗以减少体重。因此,能用α-淀粉酶抑制剂来防止和治疗肥胖症、脂肪过多症、动脉硬化症、高血脂及糖尿病等。另外,纯化的α-淀粉酶抑制肽的另一重要作用是作为糖尿病的辅助治疗(中药一类),可以阻碍或延缓其对食物中主要的碳水化合物淀粉的消化作用,阻止血糖的升高,从而能使糖尿病人吃饱饭,消除饥饿感。本成果利用固液萃取技术、膜技术、双水相萃取技术和层析技术等现代生物分离技术从小麦中分离纯化了 -淀粉酶抑制剂( -淀粉酶抑制剂的活性大于2500U/mg.protein),达到了日本国应用的要求。新工艺较原工艺相比具有操作方便,收率高,成本低,产品质量好,易于工业化生产等优点。据悉,欧美已将 -淀粉酶抑制剂开发成保健食品,如starch blocker。每年的用量在100吨以上,且近年来每年以30%的速度在递增。预计到2010年我国将有2亿人口加入肥胖者行列,而糖尿病早已成为我国中老年人的常见病、多发病,因此将本成果应用于治疗上述疾病方面是极有市场潜力的。
南京工业大学
2021-04-13
植物油
酶
法脱胶(技术)
成果简介:油脂精炼过程中,脱胶是非常重要的一步工序,脱胶效果的好坏 直接影响到油脂精炼的效率和最终产品的质量。传统的脱胶方法常存在产品 质量不稳定、消耗大、得率低、“三废”排放量大等问题。酶法脱胶工艺是现 代工业生物催化技术在传统油脂行业中的应用,是对现有化学或物理脱胶工 艺的改进,以提高其经济性和环保性,有着广泛的发展前景和重要的经济和社会价值。本技术以自行筛选所得菌株 BIT-18表达的磷脂酶为对象
北京理工大学
2021-04-14
基于干法
活化
的食用油脱色吸附材料开发与应用
我国是食用植物油消费大国,以 2012 年为例,我国食用植物油消费量为 2800 多万吨,其中精炼植物油占 70%以上。吸附脱色是食用油精炼的关键工序,其目 的是去除油中的色素、残皀、残磷、金属离子、氧化分解产物、农残、重质多环 芳烃等微量杂质组分,其效果优劣将直接影响食用油终端产品的质量与食用安全 性。传统脱色吸附材料是以膨润土为原料,采用高温高酸高能耗湿法加工而成, 其特点是活性度高,催化能力和脱色力强,但用于食用油吸附脱色时存在选择性 差、吸油率高、副反应(氧化、异构化、环化)严重和过滤性能差的缺陷。为此,本项目系统研究了油脂吸附脱色作用机制、脱色对油品品质影响、凹凸棒石黏土 (简称凹土)的显微结构、纳米效应及表面特性,发明了食用油脱色吸附材料的干法活化工艺和符合其特性的食用油“两步”脱色工艺;在此基础上,进一步对 脱色吸附材料进行多元复合改性,开发了具有高吸湿性的凹土系列干燥剂。
江南大学
2021-04-11
一种玄武岩纤维无钯
活化
化学镀铜方法
本发明涉及一种玄武岩纤维无钯活化化学镀铜方法,首先将有机溶剂去除玄武岩纤维表面杂质,然后采用氢氧化钠进行刻蚀,对玄武岩纤维进行无钯活化处理,采用乙醛酸为还原剂的化学镀铜方法将金属铜镀在玄武岩纤维表面,从而获得镀铜玄武岩纤维。本发明获得的镀铜玄武岩纤维的方法工艺简便、成本低廉、生产效率高、镀层结合力好、易于批量生产与控制导电镀层的图案形状和大小,该方法制备的玄武岩纤维导电效果好,金属镀层与玄武岩纤维结合牢度。
四川大学
2016-10-09
自由基不对称碳氢键
活化
领域取得新进展
有机分子中碳氢键的直接对映选择性官能化反应,具有原子经济性和步骤简洁性等特性,是构建碳手性中心的理想方法。近年来,过渡金属催化的碳氢键不对称反应得到了快速发展,但目前发展的这些方法一般只适用于前手性碳氢键的不对称官能团化。针对普遍存在的外消旋的三级碳氢键,目前仍缺少有效方法利用不对称催化实现其立体汇聚式不对称官能团化,以100%的理论收率得到手性季
南方科技大学
2021-04-14
生物
组织摊片烤片机
1.微电脑控制,中文界面,液晶显示,触摸键操作,简洁、直观、方便。全程电脑自动控制,开机自动加热并恒温。2.分摊片、烤片、烘片三个功能区。3.温度控制:0-99 ℃预设,恒温精度±1℃
孝感奥华医疗科技有限公司
2025-01-21
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