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细胞互作的原位捕获技术
不同细胞之间的相互作用和信息传递在包括 免疫 响应 、 器官 发育、神经传导 在内的众多生命活动中都扮演 着 关键角色 。目前, 研究 细胞互作 的方法 大 都 需要 已知参与 的 细胞类型 ,难以在复杂的活体环境下发现或研究未知的细胞 间 相互作用 。 为了解决这一难题,陈鹏课题组 借助“定向进化”技术和“ 邻近标记 ”策略,实现了 细胞 之间 动态相互作用的 原位捕获。这一被命名为 EXCELL ( Enzyme- m ediated proximal cell labeling ) 的技术,通过将 作者 定向进化得到的分选酶( mg SrtA ) 展示在 待研究的 细胞表面, 能够对与其 相互作用 的 细胞 进行原位捕获与鉴定 ,为研究细胞 - 细胞相 互作用提供了有力的工具 。 源自 金黄色葡萄球菌 的 分选酶 Sortas e  A   ( SrtA ) 能够 催化 分选肽 ( LPETG ) 和寡聚甘氨酸 的 共价连接。近期有文献报道将 SrtA 用于监测小鼠体内特定受体 - 配体介导的免疫 细胞互作 过程 1 。但是该方法 需要将 SrtA 与 寡聚甘氨酸分别融合在相互作用 的 配体和受体 细胞 上, 因此需要预知 相互作用的 细胞 类型,并对两类细胞 同时进行 基因 改造 ,因此无法捕捉未知的细胞间相互作用 。本研究突破了这一瓶颈, 建立了 对 SrtA 进行定向进化的高通量 荧光 筛选 平台,并成功 获得 了 对单一甘氨酸进行标记的 高活性 SrtA 突变体 - mgSrtA , 能够 实现对 任意 细胞类型的有效标记。
北京大学 2021-04-11
活细胞核酸标记的研究
真核细胞具有复杂而高度有序的空间结构,研究生物大分子的亚细胞定位,对于阐明其生物学功能有着重要意义。核酸分子在细胞中的特异性分布直接影响基因表达的效率,在蛋白质翻译调控、学习与记忆形成等一系列生物学过程中扮演了重要角色。针对亚细胞区域中RNA组份的研究,传统手段依赖于化学交联、免疫沉淀、离心分离等技术,不但需要预先破坏细胞的天然结构,而且还局限于少数能够被机械分离的亚细胞区域,缺乏普适性。 本研究提出“邻近核酸标记”的策略。该策略的核心是在活细胞中利用酶促反应形成大量高活性的自由基,与酶邻近的核酸分子发生共价加成反应,从而实现空间特异性标记。从工程改造的过氧化物酶APEX2出发,邹鹏课题组首先设计并合成了十余种与生物素偶联的酶底物,并从中发现生物素-苯胺探针的核酸标记活性最高。他们进一步以线粒体、核纤层和核仁等亚细胞结构为例,建立了在活细胞中开展邻近核酸标记的方法,并通过定量PCR与高通量测序分析证实了标记方法具有良好的空间特异性。邻近核酸标记技术操作简单、具有普适性,为日后研究核酸的亚细胞定位与功能关系提供了必要的工具。
北京大学 2021-04-11
α-淀粉酶抑制蛋白的制备
α-淀粉酶抑制剂是一种纯天然生物活性物质,属于糖水解酶抑制剂的一种。 α-淀粉酶抑制剂通过对淀粉酶的抑制作用而发挥减肥效应,并经胃肠道排出体外,因此不必进入血液循环系统,不作用于大脑中枢,减肥的同时不抑制食欲,使用剂量很高时也无副作用,符合世界卫生组织的减肥原则。对于肥胖患者,可减少糖向脂肪转化,延缓肠道的排空,增加脂肪消耗以减少体重。因此,能用α-淀粉酶抑制剂来防止和治疗肥胖症、脂肪过多症、动脉硬化症、高血脂及糖尿病等。另外,纯化的α-淀粉酶抑制肽的另一重要作用是作为糖尿病的辅助治疗(中药一类),可以阻碍或延缓其对食物中主要的碳水化合物淀粉的消化作用,阻止血糖的升高,从而能使糖尿病人吃饱饭,消除饥饿感。本成果利用固液萃取技术、膜技术、双水相萃取技术和层析技术等现代生物分离技术从小麦中分离纯化了 -淀粉酶抑制剂( -淀粉酶抑制剂的活性大于2500U/mg.protein),达到了日本国应用的要求。新工艺较原工艺相比具有操作方便,收率高,成本低,产品质量好,易于工业化生产等优点。据悉,欧美已将 -淀粉酶抑制剂开发成保健食品,如starch blocker。每年的用量在100吨以上,且近年来每年以30%的速度在递增。预计到2010年我国将有2亿人口加入肥胖者行列,而糖尿病早已成为我国中老年人的常见病、多发病,因此将本成果应用于治疗上述疾病方面是极有市场潜力的。
南京工业大学 2021-04-13
血管活性肠肽的融合蛋白
涉及一种血管活性肠肽的融合蛋白,所述融合蛋白包含 1 个人血 清白蛋白(Albumin Human,HSA)和 1 个血管活性肠肽(vasoactive intestinal peptide,VIP),该融合蛋白所具有的独特的氨基酸序列可以 保证其在宿主体内高水平稳定表达,在保留 VIP 原有功能的同时,体 内半衰期显著延长。本发明同时提供该融合蛋白的制备方法及其在制 备抗炎、抗损伤、脑血管疾病、提高睡眠质量的药物中的应用。
兰州大学 2021-04-14
活性胶原蛋白的制备与应用
本品治疗骨质疏松的疗效比国内外的钙制剂,活性VD及降钙素药物在提高骨密度(BMD)与骨矿含量(BMC)上占优势,可补充因年龄增长而丧失的骨基质的有机成分,恢复有机成分与无机成分二者的平衡,促进骨胶原纤维与羟基磷灰石的结合,使骨坚硬而富有弹性,增加或维持骨量,因而减少骨折的发生,缓解骨质疏松而引起的骨痛,总有效率达90%。缓解因缺钙而造成的小腿肌肉痉挛,总有效率达92%。
北京航空航天大学 2021-04-13
血管活性肠肽的融合蛋白
本成果所述融合蛋白包含1个人血清白蛋白(Albumin Human,HSA)和1个血管活性肠肽(vasoactive intestinal peptide,VIP),该融合蛋白所具有的独特的氨基酸序列可以保证其在宿主体内高水平稳定表达,在保留VIP原有功能的同时,体内半衰期显著延长。
兰州大学 2021-01-12
含碳耐火材料用系列粘结剂生产技术
含碳耐火材料按显微结构分,有陶瓷结合型和炭结合型两大类,而炭结合型属于不少耐火材料,一般所谓的含碳耐火材料均指此类。其生产工艺是先将粘结剂和粗颗粒骨料混匀,使粘结剂在粗颗粒表面形成一层薄膜,然后加入耐火材料细粉和石墨粉混匀后成型,经200℃热处理后的粘结剂固化形成固体框架把耐火材料和石墨粉结合起来得到不烧含碳耐火材料制品。显然,所形成的碳框架的连续性及强度对制品的性质有很大的影响。只有对耐火材料浸润性好且高温残碳高的粘结剂,才能形成完整性好且强度高的碳框架。因此对含碳耐火材料用粘结剂必须具有浸润性好,残碳率高的特性,同时对工业生产而言还要求其常温流动性好,无刺激性气味等。 伴随着含碳耐火材料的研制与生产,曾先后试用过煤焦油沥青、石油沥青、酚醛清漆等作为粘结剂,但均因存在各种各样问题,工艺过程有严重污染或者制品性能不能满足要求等。因此,研制满足含碳耐火材料要求的粘结剂是含碳耐火材料得以广泛应用的关键之一。 本技术是用焦化副产酚类产品和甲醛为主要原料,以1.2~1.5mol比按照一定的方式投入反应釜,在A、B两种催化剂的作用下,在25~90℃范围内,以0.6~0.8℃/分钟的升温速度先后经过升温反应→维温反应→减压脱水→粘度调整→质量检验→冷却放料等工艺过程,最终获得满足要求的粘结剂制品。整个工艺过程的时间为6~7小时。 产品质量: 1.外  观            淡黄色至棕红色 2.密  度(30℃)      1.220~1.240 3.粘  度(30℃)      3.0~8.0Pa.s 4.固含量(205℃)       >76.0% 5.残碳率(900℃)       >46.0% 6.水  分                <6.0% 与国内外同类型产品比较,本产品及生产技术具有以下特点:1.产品适用范围广:适用于镁碳砖、铝碳砖、镁铝碳砖、铝锆碳砖等含碳耐火材料的生产;2.保质期长:室内保存产品的保质期可达三个月;3.粘度可调:可以按照使用对象的制品性能要求和生产工艺要求,季节要求,气温要求灵活调整产品的粘度;4.浸润性好:混料均匀,成型性好;5.生产工艺全封闭:6.基本无污染;7.工艺条件温和,易于控制;8.使用量少:用量仅为耐火材料的3.8%~4.0%,明显降低含碳耐火材料的成本;9.耐火材料制品的性能提高:使高温抗折强度明显提高,转炉炉龄提高。
上海理工大学 2021-04-11
用地沟油生产地铁隧道用盾构密封油脂技术
可以量产/n成果简介:有关资料显示,21世纪我国城市地下空间开发利用的广阔市场,我国将有20多座城市建设地铁,一般采用盾构掘进机施工,正在建设中的深圳地铁和南京地铁采用盾构掘进区间隧道;广州地铁2号线、上海地铁3号线、北京地铁5号线均采用的是盾构法施工。直径4-6m的地铁盾构的需求量约达40多台,铁路隧道有部分采用TBM掘进机,在这10年内直径8.6m的TBM掘进机需求量约为6台。水电隧道将有相当一部分采用TBM掘进机,直径4m的TBM掘进机的需求量约20台。其他城市管道的建设,直径1.5—5m的盾
湖北工业大学 2021-01-12
用微波还原弱磁性铁矿物制取铁精矿的方法
本项目针对现行碳热还原工艺存在的不足,提供一种实用用微波还原弱磁性铁矿物制取铁精矿的方法,它无需用碳作为还原剂和热源,因而没有碳的消耗和由此产生的CO2对环境的污染,生产成本低,特别适于铁品位为15~45%的难选低品位红铁矿和含铁工业废料中弱磁性铁矿物的磁化改性,再用弱磁选机磁选获得高品质铁精矿。 本发明解决上述技术问题所采用的技术方案是: 利用微波具有通过物体内部原子和分子发生高速振动的方式,选择性加热能够吸收微波的矿物之特点,以微波场中升温极快的铁粉或铁泥代替碳作为还原剂,铁粉或铁泥同时也是促进剂,通过微波磁化还原焙烧,使难选低品位红铁矿和含铁工业废料中的弱磁性铁矿物还原为磁铁矿,再用弱磁选机磁选获得高品质合格铁精矿。  与传统的碳热还原技术相比,本发明的有益效果在于: (1)用废铁粉或铁泥作还原剂,用弱磁选可将其作为铁精矿回收,可变废为宝,没有还原剂的消耗、过程清洁、成本大幅度降低;而且由于铁粉或铁泥在微波场中升温极快,对高温还原反应具有促进作用。 (2)由于微波仅选择性加热铁矿物,导致铁矿物和脉石矿物热膨胀系数不同,在晶格间应力的作用下,铁矿物更容易在晶界断裂单体解离,有利于后续的磁选回收富集。 (3)微波焙烧不仅可降低磁化还原反应的活化能,而且因其可选择性地加热铁矿物,不需要象碳热还原那样将整个物料加热至600~800℃的高温,还原反应效率高,可显著降低过程所需的能耗。实验表明:将同样二份1kg的红铁矿粉,一份用焦炭作还原剂,在4kw的马弗炉中还原焙烧,另一份用废铁粉作还原剂,在频率2450MHz、功率1.3kw的微波炉中还原焙烧6分钟,还原剂加入量均为处理物料的20%,后者在6分钟内可将98%的弱磁性铁矿物还原为强磁性的磁铁矿,而前者50分钟内弱磁性铁矿物的还原率不到60%,本发明所处理的弱磁性铁矿物物料含铁品位为15~45%,得到的铁精矿其铁品位大于60%,回收率大于80%。(4)突破传统工艺处理贫、细、杂难选红铁矿和含铁工业废料成本高、效率低的瓶颈,使目前传统工艺难以处理的大量铁矿资源得到回收和利用。
武汉工程大学 2021-04-11
一种新型棉用阻燃剂的制备方法
高校科技成果尽在科转云
青岛大学 2021-04-10
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