一种纳米纤维素晶体的制备方法，步骤如下：用pH4.8的乙酸-乙酸钠缓冲液配制浓度为0.03-0.05g/mL的纤维素溶液，加入纤维素酶进行酶解，纤维素酶在溶液中的浓度为10-15U/mL，酶解过程中每间隔12h进行一次超声，每次超声时间为30-60min；反应结束后，取出样品，离心分离，将沉淀物离心水洗，冷冻干燥制得纳米纤维素晶体。本发明采用纤维素内切酶结合超声物理方法制备一维棒状纳米纤维素，该方

一、技术(项目)内容简介 德国拜尔医药公司自1998年起生产和销售“一次施用一年有效”的草坪花卉专用控释肥(WUXAL)的消息在肥料界引起了不小的轰动。其产品的市场零售价高达260元/kg(估计原材料成本4元/kg)，产品的各种养分成分和含量均在产品包装盒上显著标识。值得深思的问题是，该肥料应用了什么技术才使得它的利润空间如此巨大呢？ 针对草坪草和花卉植物对养分需求的特殊性，运用土壤中氮素转化和植物体内氮素营养的理论，通过生物化学技术—

第二代促血小板生成素是采用重组技术将促血小板生成素模拟肽和长效载体蛋白人血清白蛋白连接形成融合蛋白，使它们互不影响各自的结构，而促血小板生成素模拟肽部分可维持正常的生物学活性，且肾脏对它的清除率降低，体内的半衰期延长。具有有自主知识产权，已获得国家发明专利授权 2 项，并成功进行 PCT 申请，已获欧盟专利授权 1 项，可申报治疗用生物制品注册分类 1 类新药。化疗、骨髓移植、白血病及恶性淋巴瘤等多种疾病均可诱导血小板减少症，严重者危及生命。尽管已上市多种药物可用于这一疾病的治疗，但是，目前临床上仍

植物红细胞凝集素，学名Phytohemagglutinin-E （PHA-E)，参考产品为Sigma公司产品，货号为L8629。 凝集素是从豆科植物种子中提取的一种含糖蛋白质，植物凝集素具有刺激外周血淋巴细胞RNA合成和有丝分裂，促进免疫反应，使细胞凝聚，肿瘤细胞失活，以及诱发人外周血淋巴细胞产生抗癌淋巴因子等生物学活性。PHA是由E、L两种亚基组成的四聚体蛋白质的混合物，按其亚基组成可分为L4、L3E、L2E2、LE3、E4具有相同物化性质和不同生物学活性的同工凝集素。其中红细胞凝集素（Erythrohemagglutinin ，PHA-E）含有4个相同的E亚基，具有最强的红血球凝集功能，没有白细胞凝集能力。 产品-红细胞凝集素是由英国红芸豆（俗称红腰豆，属于常见杂粮）为原料，采用亲和纯化技术制备得到，属于植物提取蛋白质，产品为白色粉末，安全无毒。目前，红细胞凝集素主要作为体外诊断试剂的重要组成部分，应用于去除临床血液样本中的红细胞。使得最终检验结果快速准确，有效避免了传统采用离心方法分离血浆和红血球中出现的细胞破裂等问题，因此近年来广泛用于临床和科研上凝集去除血液中的红细胞。 我们建立了一套低成本快速的分离纯化工艺，能特异性纯化得到PHA-E，同时生产成本能下降至进口同类商品售价的5%以下。该工艺不需要太多设备，普通实验室即可完成200mg-1000mg规模生产。产品质量已经得到国外公司的肯定。目前国内尚无该产品销售。

成果创新点 本项目开发了 5 种不同结构的 IL-15/IL-15RαSu 融合 蛋白，包括 IL-15/IL-15RαSu-Fc 单体，IL-15/IL-15RαSu 双体（类似 ATL803），IL-15/IL-15RSu 异源二聚体（类似 hetIL-15 ）， 以 及 IL-15-Linker-IL-15RSu ， IL-15RSu-Linker-IL-15。主要功能是促进 T 细胞和 NK 细

本项目开发了 5 种不同结构的 IL-15/IL-15RαSu 融合 蛋白，包括 IL-15/IL-15RαSu-Fc 单体，IL-15/IL-15RαSu 双体（类似 ATL803），IL-15/IL-15RSu 异源二聚体（类似 hetIL-15 ）， 以 及 IL-15-Linker-IL-15RSu ， IL-15RSu-Linker-IL-15。主要功能是促进 T 细胞和 NK 细 胞的增殖、活化和维持。 目 前 ， 为了提高 IL-15 的活性，主要是开发 IL-15/IL-15Rα 复合物。其中， IL-15/IL-15RαSu-Fc 单 体具有较强诱导 NK 和 CTL 细胞增生和活化作用，同时具有 较长半衰期，达到国际先进水平。IL-15/IL-15RαSu-Fc （ALT-803）已进入临床Ⅱ期实验，且在 2017 年获得了 FDA 的 Fast Track Designation 。 Novartis 开发的 Heterodimeric IL-15/sIL-15Rα（hetIL-15）也已进入临 床 I 期实验 

本发明涉及基因工程领域，具体地，本发明涉及一种豇豆胰蛋白酶抑制剂基因、及其应用、大量制备豇豆胰蛋白酶抑制剂的方法。如上所述本发明的发明人首先利用pcr反应从豇豆基因组dna中直接获得cpti基因(cpti基因不含有内含子)，然后优化改造所述cpti序列，改造后的序列在大肠杆菌中的表达量和表达比活性都有显著改进。

项目成果/简介:本发明涉及基因工程领域，具体地，本发明涉及一种豇豆胰蛋白酶抑制剂基因、及其应用、大量制备豇豆胰蛋白酶抑制剂的方法。如上所述本发明的发明人首先利用pcr反应从豇豆基因组dna中直接获得cpti基因(cpti基因不含有内含子)，然后优化改造所述cpti序列，改造后的序列在大肠杆菌中的表达量和表达比活性都有显著改进。

常见的纳米酶大多数是金属化合物纳米颗粒，其催化活性主要是来自在纳米颗粒表面的金属离子。在自然界中，生物酶的特征表明活性位点和支持、稳定活性位点的网络环境对于高催化效率同样重要。通过调整活性位点的成分和环境可以实现高的活性和选择性。水凝胶是一类具有良好生物相容性的三维亲水网络材料，其结构可以有效地保护酶分子活性中心，同时提供更好的底物迁移微环境，从而实现有效的催化作用，载酶水凝胶材料已成为生物学研究中的热点。纳米凝胶为水凝胶的纳米粒子，具有类似于宏观水凝胶材料的亲水网络及类似流体的传输特性，其纳米的尺寸可以作为进一步体内生物应用的理想载体。在受限的纳米空间中实现修饰或组装以获得杂化纳米凝胶仍然存在挑战。应对这一挑战，同济大学化学科学与工程学院王启刚团队从仿生的角度出发，设计了一种酶催化的原子转移自由基聚合（ATRPase）和金属配位交联方法成功制备出纳米人工多酶凝胶体系。该体系具有模拟超氧化物歧化酶（SOD-like）和过氧化物酶（POD-like）特性，可以实现肿瘤微环境级联催化的响应成像。日前，相关研究成果以“Multienzyme‐Mimic Nanogels Synthesized by Biocatalytic ATRP and Metal Coordination for Bioresponsive Fluorescence Imaging”为题，发表在国际著名学术期刊 Angewandte Chemie International Edition （《德国应用化学》） 上。同济大学化学科学与工程学院为该文的唯一通讯作者单位，硕士生齐美园为第一作者，王霞副教授和王启刚教授为共同通讯作者。 图1.（a）人工多酶凝胶体系的ATRPase及配位交联制备流程（b）模拟SOD和POD级联酶催化的肿瘤微环境响应的荧光成像机制。研究人员首先在纳米粒子表面修饰酶催化的原子转移自由基聚合的引发剂(-Br)，以具有良好生物相容性的生物酶为催化剂，修饰有双键的赖氨酸（N-acryloyl-L-lysine）为聚合单体，在纳米粒子周围聚合制备得到聚赖氨酸高分子刷，最后通过亚铁配位交联，从而构建出具有多酶活性的人工多酶凝胶体系（如图1所示）。凝胶体系中高分散的Fe离子一方面作为凝胶网络的交联剂，同时作为模拟酶的活性中心。通过模拟SOD和POD酶，先将肿瘤部位高水平的O 2 •− 催化转化为H 2 O 2 ，进一步基于肿瘤部位提升的H 2 O 2 通过级联酶催化反应实现肿瘤微环境响应的安全、高效的肿瘤成像。该人工多酶凝胶体系类似自然的过氧化物酶催化机制不产生羟基自由基，具有低毒性和高生物安全性。同时，ATRPase方法和金属配位交联技术可进一步实现多种纳米材料体系的制备，用于药物输送和其他生物医学应用。该研究成果得到了国家自然科学基金、国家重点研发计划等经费支持以及中国科学院强磁场科学中心的技术支持。王启刚教授团队多年来一直致力于高分子凝胶固定酶技术及其生物诊疗应用，近5年累计以通讯作者在 Adv.Mater. ,  Nat. Commun. ,  Angew. Chem. Inter. Ed. 等期刊发表SCI论文50多篇。文献链接：https://www.onlinelibrary.wiley.com/doi/abs/10.1002/anie.202002331  PDF：anie_202002331.pdf课题组网站：https://qgwang.tongji.edu.cn/

该成果具有智能化和高效除磷脱氮的特征，占地、投资和运行费用均低于传统A2/O型除磷脱氮工艺，本项目拥有两项发明专利。2006年11月8日以钱易院士为组长的专家组鉴定结论为国际领先水平。