植物RNA化学修饰m6A
                                        
                                            鉴定了拟南芥中的	m6A	去甲基酶	ALKBH10B	,发现	ALKBH10B	缺失会导致拟南芥显著的晚花表型,	ALKBH10B	通过影响	FT	,	SPL3	和	SPL9	的甲基化水平调控拟南芥的成花诱导。不同的识别蛋白通过对	m6A	的结合,对	mRNA	的加工代谢产生不同的调控作用,	进而	影响细胞不同的生理功能。通过开发甲醛交联-	免疫共沉淀(Formaldehyde-crosslinking and immunoprecipitation, FA-CLIP)	技术,鉴定出全转录组水平的ECT2-mRNA	相互作用位点,揭示ECT2	主要结合mRNA	的	3'	非翻译区(3'UTR),	并且倾向于结合保守序列	URUAY (R=G>A, Y=U>A, 	其中	UGUAY	序列 占	90%	以上	)	。使用植物细胞核裂解液进行的体外酶活实验和凝胶迁移实验(	EMSA	)证明	UGUA	序列为	植物特有的m6A	保守序列,且UGUm6A	可以被ECT2	高特异性识别。亚细胞定位实验表明ECT2	蛋白分布于细胞核和细胞质,结合高通量测序数据分析,推测ECT2	具有双重功能,ECT2	可能在细胞核中通过结合甲基化的UGUA	调控pre-mRNA	的	3'UTR	加工,在细胞质中ECT2	促进mRNA	的稳定性。进一步机理研究发现影响表皮毛发育的三个基因ITB1, TTG1	及DIS2	的转录本可以被m6A	修饰且被ECT2	结合,在	ECT2	的T-DNA	插入突变体中,ITB1, TTG1	及DIS2	的mRNA	稳定性降低,mRNA	表达量水平降低,继而导致	ect2	突变体中表皮毛分叉数增多。
                                        
                                        
                                            北京大学
                                            2021-04-11