磁性壳聚糖复合微球制备固定化葡萄糖异构酶的方法
一种磁性壳聚糖复合微球制备固定化葡萄糖异构酶的方法,其特征在于:这种磁性壳聚糖复合微球制备固定化葡萄糖异构酶的方法为:一、向0.4~0.6mol/L的FeCl230~100ml和FeCl350~100ml中,加入分子量为4000的聚乙二醇6.0~10.0g,在磁力搅拌器下充分溶解,再用氨水调节溶液至pH8~10,继续搅拌30min~50min,用重蒸水洗涤抽滤后真空冷冻干燥即得Fe3O4磁核;二、将壳聚糖粉末在3%~6%乙酸中超声分散10min,制0.02~0.08g/ml壳聚糖溶液,通过乳化剂与Fe3O4磁核超声分散并电动搅拌10min进行混合,使之形成微乳体系,并与1%~5%戊二醛交联在2000r/min下继续搅拌2~4h,然后用石油醚、丙酮和重蒸水洗涤,抽滤真空冷冻干燥后即得磁性壳聚糖复合微球;三、将制备好的磁性壳聚糖复合微球先用磷酸缓冲液pH7.0~7.8浸泡,抽滤后加入用缓冲液稀释后的浓度为4mg/ml~16mg/ml的葡萄糖异构酶15~20ml,在室温摇床上振荡4~10h,取出放入4℃静置过夜,倾出上清液,沉淀用蒸馏水洗涤再用上述磷酸缓冲液洗涤,直至洗涤液检测不到戊二醛和游离酶,无紫外吸收,抽滤得固定化葡萄糖异构酶
黑龙江八一农垦大学
2021-05-04