细胞凋亡

团队对12例多灶肝癌患者的45个肿瘤样本及对应癌旁正常组织进行了全基因组测序、全外显子测序及RNA测序。研究发现同一患者的大癌灶和小癌灶的基因组特征存在极大的相似性，包括相同的HBV-DNA整合位点，相似的染色体结构变异、突变特征及拷贝数变化情况，提示12例多灶肝癌患者的大癌灶和小癌灶属于肝内转移瘤。该团队进一步分析45个癌灶的免疫微环境，发现同一患者中，与大癌灶相比，小癌灶具有更多的免疫细胞浸润，免疫活性刺激因子以及预测PD-1抗体治疗疗效的干扰素相关特征在小癌灶中表达上调。免疫相关通路在小癌灶中富集，而增殖及血管生成相关通路在大癌灶中更富集。此外，大部分小癌灶呈现sia分型中的“免疫反应亚型”。这些结果表明，同一肝癌患者的小癌灶比大癌灶具有更活跃的免疫状态。     为进一步探讨不同大小的癌灶对PD-1抗体治疗是否具有不同的治疗响应，该团队对8例接受PD-1抗体治疗的多灶肝癌患者全部癌灶的免疫治疗应答情况进行评估。结果发现其中5例多灶肝癌患者的大癌灶和小癌灶对PD-1抗体治疗存在混合反应，均体现为小癌灶具有更好的免疫治疗疗效——PD-1抗体治疗后，小癌灶平均缩小46.3%，而同一病例的大癌灶平均增加14.9%。

本研究利用人工合成的免疫抗原，经动物免疫后获得特异性好的多克隆抗体，建立了 MC-LR 高灵敏间接竞争 ELISA 检测方法，经和国外进口的同类产品比较，在很多关键指标上已经达到或超过进口产品。该藻毒素快速检测技术和检测产品，灵敏度较高，特异性好，制备简单，成本低廉，适合规模化试剂盒的生产。 创新要点 （1）性能指标达到国际先进水平。经第三方专业权威机构或部门的验证（附件 11），最低能检测出 0.05ng/ml 的 MC-LR 含量，本项目产品技术含量高，操作简便快捷，结果灵敏准确，检测成本低廉

通过对NMDA患者及健康南方汉族人群进行HLA基因分型，研究发现HLA_DRB1*16:02等位基因和抗NMDAR脑炎相关。另外，除了增加疾病易感性外，HLA_DRB1*16:02等位基因和该疾病针对治疗反应相关，表现为携带该等位基因患者对治疗反应较差。最后，利用生物信息技术分析发现，NMDAR的NR1亚单位上的抗原表位能够与HLA II类DRB1*16:02分子紧密结合，显示它可能是导致疾病的T细胞抗原表位。

本发明涉及一种新的免疫毒素，其特征在于利用人源性毒素穿孔素（Perforin）的活性片断作为毒素分子，通过基因工程技术将毒素分子与载体分子的基因重组在大肠杆菌中表达出的免疫毒素，其优点是对人体不具有免疫原性，有严格靶向性，可直接激发细胞损伤过程，杀灭靶细胞，不需要内化及细胞内转运过程，可用于治疗某些肿瘤和自身免疫性疾病。特别是适合于抑制器官移植时的免疫排斥

已有样品/n微粒均相免疫检测平台是新一代免疫检测技术，基于生物合成的纳米载体和新的标记技术，结合图像识别和微通道分析技术，能实现对微量样本（5-10μL 样本/次），在 1-10 分钟内对抗原或抗体的检测，灵敏度比传统的免疫凝集检测高 100-1000 倍。特别适合快速鉴定病原菌及对血清样本中特定抗体的筛查等。目前已成功应用于大肠杆菌 O157：H7 的鉴定及中东呼吸道综合征冠状病毒（MERS-CoV）的抗体检测。 市场前景:可广泛应用于各类病原快速检测，前景广阔。

涉及一种胶体金半定量免疫诊断试纸条的制作和装配方法。该试 纸条利用免疫层析原理，可迅速目检出纳米胶体金标记物和样品结合 后的颜色，并通过测试区与平行参比区的颜色对比的强弱来判定检测 的半定量结果，具有反应迅速，可迅速判定样品中待测物的有无及其 含量高低的特性。

揭示了酪氨酸磷酸化对于植物免疫受体激酶活性调控的重要作用，解析了作为分子开关的关键酪氨酸位点的“预磷酸化-去磷酸化-再磷酸化”循环调控机理，促进了人们对于植物先天免疫信号调控机制的理解。 蛋白的磷酸化和去磷酸化是调控植物细胞信号转导的主要机制之一，蛋白酪氨酸磷酸化在动物细胞中的重要作用被广泛证实。然而，植物免疫受体激酶通常被归入丝苏氨酸激酶。本研究提示酪氨酸磷酸化对于植物先天免疫的重要调控作用，揭示了植物受体激酶与磷酸酶协同作用，通过对分子开关（关键酪氨酸位点）的循环磷酸化修饰，实现免疫信号转导的精细调控。

利用团队自主创新的、用于全基因组APA位点扫描的IVT-SAPAS技术，对RNA病毒感染免疫细胞后的不同时间点进行了全基因组APA位点扫描，发现全基因组水平平均tandem 3’ UTR长度随着病毒的感染而逐渐缩短，大量抗病毒免疫信号通路相关基因在病毒感染后发生APA。通过敲低核心3’ 加工因子，发现当全基因组水平poly (A) 位点的使用受到影响后，病毒复制也受到显著影响，揭示了APA在抗病毒免疫中的重要调节作用。

跨越胚胎和成年两个时期、涵盖八大系统、建立70多万个单细胞的转录组数据库、鉴定人体100余种细胞大类和800余种细胞亚类……世界首个人类细胞图谱在浙大绘制成功了。北京时间2020年3月26日，国际顶级期刊《自然》在线刊登了浙江大学医学院郭国骥教授团队的这项最新研究成果。 细胞是生命的基本单位。在过去的数百年时间里，科学家主要利用显微镜和流式分析等技术，依靠若干表型特征对自然界里不同物种的细胞进行分类和鉴定。这些表型特征的选取往往引入了较多的人为主观性。而单细胞测序技术的出现对这一传统的细胞认知体系带来了革命性的变化。 此前，郭国骥团队自主研发了Microwell-seq高通量单细胞分析平台，并于2018年在国际顶级期刊《细胞》上发表了世界首个小鼠细胞图谱。此后，郭国骥团队一直在这个领域精耕细作，并与浙江大学医学院几家附属医院的张丹团队、王伟林团队、陈江华团队、梁廷波团队和黄河团队等保持紧密合作，时隔两年，再出重量级成果。一张单细胞水平的人类细胞图谱 团队对60种人体组织样品和7种细胞培养样品进行了Microwell-seq高通量单细胞测序分析，系统性地绘制了跨越胚胎和成年两个时期、涵盖八大系统的人类细胞图谱。 郭国骥介绍说，Microwell-seq具有成本低廉、双细胞污染率低和细胞普适性广等优势，由此团队建立了70多万个单细胞的转录组数据库，鉴定了人体100余种细胞大类和800余种细胞亚类。同时，团队开发了scHCL单细胞比对系统用于人体细胞类型的识别，并搭建了人类细胞蓝图网站。 “这项工作概括地说就是人体细胞数字化。我们能用数字矩阵描述每一个细胞的特征，并对它们进行系统性的分类。我们定义了许多之前未知的细胞种类，还发现了一些特殊的表达模式。” 通过这张图谱，团队发现，多种成人的上皮、内皮和基质细胞在组织中似乎扮演着免疫细胞的角色。“趋化因子阳性上皮细胞、抗原呈递阳性内皮细胞和白介素阳性成纤维细胞广泛地分布在成体的各种组织器官之中，并在分类上独立于传统的上皮、内皮、基质和免疫细胞。这些非专职的免疫细胞也在兼职干着免疫的活。我们认为成年人非免疫细胞的广泛免疫激活是人体区域免疫的一种重要调节机制。” 此外，通过跨时期、跨组织和跨物种的细胞图谱分析，团队揭示了一个普适性的哺乳动物细胞命运决定机制：干细胞和祖细胞的转录状态混杂且随机，而分化和成熟细胞的转录状态就变得分明且稳定，也就是说，细胞分化经历了一个从混乱到有序的发展过程。 该研究首次从单细胞水平上全面分析了胚胎和成年时期的人体细胞种类，研究数据将成为探索细胞命运决定机制的资源宝库，研究方法将对人体正常与疾病细胞状态的鉴定带来深远影响。在未来，临床医生就可能通过参照正常的细胞状态来鉴别异常的细胞状态和起源。 论文的第一作者包括浙江大学医学院韩晓平副教授（并列通讯）、17级硕士生周子茗、19级博士生费丽江、17级直博生孙慧宇、18级博士生汪仁英、16级直博生陈瑶、博士后陈海德和王晶晶。论文最后通讯作者为浙江大学医学院郭国骥教授。项目获得了国家自然科学基金和科技部干细胞与转化医学重点专项的支持。