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高性能聚苯胺- 尿酸酶传感器的制备方法
本发明采用一种新型的电流型生物传感器,该传感器由一四电极体系组成:一个聚苯胺-尿酸酶生物传感器,一个聚苯胺电极,一个铂片电极(辅助电极, C)和一个饱和甘汞电极(参比电极)。本发明设计的尿酸酶传感器,可以有效地消除人体血液中其它杂质的干扰。
扬州大学 2021-04-14
蔗糖合成酶在调控植物果实发育中的应用
本发明公开了一种蔗糖合成酶在调控植物果实发育中的应用。本发明提供了一种培育转基因植物的方法,是将蔗糖合成酶的编码基因导入目的植物中,得到转基因植物;所述转基因植物果实产量大于所述目的植物。所述蔗糖合成酶的编码基因具体可为蔗糖合成酶基因CsSus4。本发明发现了蔗糖合成酶基因CsSus4在黄瓜果实发育过程中发挥着的关键性作用,可以调节库强从而促进果实的
中国农业大学 2021-04-14
氧化还原酶的发现及其在生物催化中的应用
(1)针对氧化还原酶在对映选择性和催化活性等方面的适用局限性问题,建立分子改造与基因组挖掘技术平台。通过理性设计改造野生型酶,改善和强化酶的催化特性与功能,获得具有自主知识产权的高活性、高立体选择性制备芳基手性醇的重组氧化还原酶及新基因,拓展了酶的适用性,并为进一步认识酶分子催化机制奠定基础; (2)建立了高效稳定全细胞催化的(S)-苯基乙二醇公斤级制备体系,在 100L 罐中,将底物浓度从 15 g/L 提高到 25 g/L,获得了生产规模放大和产物的高效提取与精制等重要研究成果。产物光学纯度和产率分别达到 99%和 93%。最终产物收率为 85%; (3)以数种手性醇酸化合物(R)-苯基乙二醇、(S)-间氯苯基乙二醇、(R)- 扁桃酸、(R)-2-辛醇为模型产物,通过生物催化剂筛选、理性设计催化过程、合理修饰底物和采用原位分离策略等,大大提高微生物不对称还原潜手性化合物的效率,为手性化合物的制备提供了高效、安全的生物途径。
江南大学 2021-04-11
脂肪酶催化合成生物香料 -- 短链香酯技术
本项目从白酒大曲中分离筛选出具有自主知识产权的高效脂肪酶生产菌华根霉,建立了利用华根霉全细胞脂肪酶在非水相中催化合成以己酸乙酯为代表的短链芳香酯技术体系,并实现了产业化。此方法反应条件温和、反应特异性强、有毒副产物少、反应效率更高;转化产物品质高,合成的短链的脂肪酸酯主要包括己酸乙酯、戊酸乙酯、庚酸乙酯、辛酸乙酯等,属于天然等同生物香料,具有巨大的市场需求和商业价值。相关技术成果 2006 年获江苏省科技进步一等奖,2003 年获教育部提名国家技术进步二等奖。
江南大学 2021-04-11
广西大学合成生物学团队发现绿色植物中广泛保守的Met1泛素链水解分子开关
8月9日,我校生命科学与技术学院、亚热带农业生物资源保护与利用国家重点实验室何正国教授领衔的合成生物学团队与北京理工大学和北京科技大学相关团队合作联合在国际著名学术期刊《自然-通讯》(Nature Communications)发表题为《绿色植物OTUB亚家族中保守的Met1特异性基序使水稻OTUB1能够水解Met1泛素链》(Met1-specific Motifs conserved in OTUB subfamily of green plants enable rice OTUB1 to Hydrolyse Met1 Ubiquitin Chains)的研究论文。
广西大学 2022-09-27
适于家蚕丝腺表达的改造人酸性成纤维畑胞生长因子基因及其表达系统和应用
本项目利用转基因家蚕丝腺大规模重组表达具有生物活性人酸性成纤维细胞生长因子基因 (haFGF )及其表达系统和应用。根据家蚕密码子实用偏好性优化并改造haFGF的编码基因,将改造 haFGF基因与分泌型丝胶1基因启动子和分泌型丝胶1基因终止子构成表达框,并用增强子Hr3增强表达,同 时连入piggyBac转座臂和荧光筛选标记基因构建表达系统,该表达系统可实现在家蚕丝腺中高效表达重组 haFGF ,并分泌至蚕丝中。重组haFGF的含量可占蚕丝纤维重量的5%。从50g蚕丝中可以分离纯化获得 lmg具有促进细胞增殖功效的haFGF重组蛋白,纯度为98.5%。本项目表达的haFGF将会在美容化妆和医学 临床等领域具有良好的应用前景。
西南大学 2021-04-13
一种基于荧光共振能量转移方法检测Rab蛋白与其效应因子间相互作用的方法
本发明属于生物科学技术领域,具体的说是基于荧光共振能量转移方法检测Rab蛋白与其效应因子间相互作用的方法。通过天然GTP的荧光类似物mantGTP置换与Rab蛋白结合的GDP,作为荧光共振能量转移的供体;构建Rab蛋白的效应因子与绿色荧光蛋白GFP融合表达的载体,融合蛋白经过表达纯化之后作为荧光共振能量转移的受体;可以利用荧光光谱仪基于荧光共振能量转移的方法在体外直接检测以mantGTP形式结合的
青岛农业大学 2021-01-12
茶树咖啡碱合成酶基因启动子TCSP及其应用
项目成果/简介:本发明提供茶树咖啡碱合成酶基因启动子TCSP及其在制备转基因植物中的应用.本发明以茶树DNA为模板,用GenomeWalking方法克隆得到茶树TCS基因启动子序列,然后利用Gateway技术构建重组植物表达载体pKGWFS7TCSP,采用农杆菌介导的烟草遗传转化,以表达GUS基因的方式进行启动子活性功能验证.本发明首次从茶树中克隆出特异性咖啡碱合成酶基因启动子TCSP,并验证了其活性,对于揭示茶树咖啡碱合成的机理,生物调控茶树咖啡碱的含量具有重要意义.
安徽农业大学 2021-04-10
解析致病菌细胞壁成分胞壁酸翻转酶结构功能机制
中国科大陈宇星教授、周丛照教授和孙林峰教授课题组合作阐明了金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)胞壁酸(WTA)翻转酶TarGH转运WTA的机制和TarGH特异性抑制剂Targocil的抑制机制。该研究成果在线发表在微生物领域专业杂志mBio上。耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)是主要的临床致病菌之一,其引发的感染难以治愈甚至可能致死。由于近年来抗生素滥用,出现了对所有的β-内酰胺类药物都具有抗性的MRSA菌株。研究表明S. aureus细胞壁主要成分WTA是引起耐药性的关键因素之一。在革兰氏阳性菌中,WTA是一类共价连接在肽聚糖上的阴离子多聚物。WTA在细菌分裂、生物膜形成、宿主定殖以及细菌感染等过程中起着重要作用。因此,WTA合成路径中的关键酶是新型抗菌药物的重要靶点。在S. aureus中,WTA合成前体是N-乙酰葡糖胺修饰的多聚核糖醇长链,其通过共价键连接在锚定在细胞膜上的脂质载体Und-PP上。该Und-PP连接的多聚核糖醇长链前体先在细胞内完成合成,最后通过ABC转运蛋白TarGH翻转出细胞膜。作为最具潜力的抗生素靶标之一,TarGH及其抑制剂得到广泛研究。先导化合物小分子Targocil是近期被鉴定出来特异性抑制TarGH效率较高的抑制剂,但是其抑制的分子机制并不清楚。为阐明TarGH转运WTA的机理以及Targocil的抑制机制,作者用冷冻电镜方法,解析了金黄色葡萄球菌WTA翻转酶TarGH的同源蛋白,来自Alicyclobacillus herbarius菌的TarGH结构。其同源性为50%。TarGH结构总体分辨率为3.9 Å,其核心结构区域分辨率达到3.6Å。由于未结合ATP,TarGH结构处于开口朝向细胞内的构象状态。基于结构,作者计算出了底物转运通道,通过对组成通道的氨基酸残基性质分析并结合生理实验,阐明了底物特异性识别机制。通过结构比对作者提出TarGH及其同源蛋白利用“曲柄连杆”原理来实现底物转运的分子机制。具有类似结构特点的ABC转运蛋白都可以利用这一机制通过相对微小的总体构象变化转运较大的底物。作者进一步通过生化实验和计算机模拟确定了Targocil结合TarGH的精确位点,并阐明了其抑制TarGH转运胞壁酸的分子机制。
中国科学技术大学 2021-04-10
重组大肠杆菌生产磷脂酶D及转酯化产品开发
"磷脂酶 D (PLD)是一类具有水解作用和磷酰基转移作用的酶, 在磷脂改性方面发挥着重要作用。它可以将大量磷脂酰胆碱(PC) 催化合成为自然界稀有的磷脂质,如磷脂酰乙醇胺(PE)、磷脂酰丝氨酸(PS)和磷脂酰甘油(PG)等,合成的磷脂质在医药和食品工业具有很大的应用前景。但由于来源不足和价格高,PLD的工业应用一直受到限制。本项目通过基因工程和微生物发酵技术,解决了PLD工业化应用中难表达和表达量不足的难题,利用重组大肠杆菌发酵实现了PLD的高水平表达,其酶活为106 U•L-1,产量为748 mg•L-1,分别比目前报道的最高水平提高了100倍和20倍;同时,本项目还建立了一种简单有效提取重组PLD的方法,可望大大降低PLD的生产成本。本技术先进,应用前景看好,如按106 U•L-1的发酵水平生产,成本约100元人民币/1000 U,目前市场售价在3000-6000元/1000 U,利润空间很大。 "
厦门大学 2021-04-10
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