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苏氨酸工业生产菌代谢工程系统改造
本成果从一株高产 L-异亮氨酸的 C. glutamicum 出发,运用反向代谢工程策略对其代谢通路进行理性重排,以期实现 L-苏氨酸高产,特别是近期,通过热诱导丙酮酸羧化酶和苏氨酸外排泵创苏氨酸产率纪录,开发了一种两段式温控发酵苏氨酸的重组大肠杆菌和工艺,发酵罐苏氨酸摩尔转化率达 103.28%。这套复杂中心代谢途径的自我调控维持了生产和生长的平衡。论文用实验室前期构建的一株产苏氨酸的重组大肠杆菌 TWF001 为宿主,首先编辑了涉及副产物有机酸合成、产物降解和转运的基因,并证实这一系列菌种在 37 度升至 42 度情况下的生长情况等同正常 37 度发酵;然后用一套大肠杆菌热敏启动子去转录四环素启动子阻遏蛋白,四环素启动子后的报告基因 37 度表达,42 度不表达。 
江南大学 2021-04-11
定向改造大肠杆菌类脂 A 生产疫苗佐剂 MPL
细菌脂多糖可刺激宿主免疫系统产生免疫反应,可利用这一性质开发既无毒性又能刺激免疫系统的类脂 A 分子疫苗佐剂。近年美国 Corixa 公司已开发出可用于乙肝病毒疫苗和过敏治疗的单磷酸类脂 A(MPL)疫苗佐剂。目前 MPL 生产方法是从沙门氏菌的突变株中提取类脂 A 并加以化学处理。本项目根据类脂 A 分 子的合成机理,通过基因工程技术将 pagL、lpxE 和 pagP 单启动子串联共表达,将大肠杆菌中类脂 A 的结构改造成为 MPL,菌株稳定性好,生产方法简单高效。
江南大学 2021-04-11
改造类脂 A 结构用于安全宿主菌构建及疫苗佐剂生产
类脂 A 是脂多糖分子的疏水基团,大量存在于革兰氏阴性细菌的外膜外层,能通过结合免疫细胞表面的受体 TLR4 来刺激人体免疫系统[50, 51],因而也是一种很好的免疫系统激活因子。美国 Corexa 公司已经开发出了可用于乙肝病毒疫苗和过敏治疗的疫苗佐剂 MPL。研究表明 MPL 刺激的免疫细胞中 IL-1β 的分泌量 显著降低,使得 MPL 的毒性降低但免疫活性还在。MPL 目前是通过从沙门氏菌的 突变株 Salmonella minnesota RC595 中提取类脂 A,然后用化学方法去除其多余的附加基团而得到。本项目拟利用这些类脂 A 修饰酶,根据类脂 A 分子的合成机理,通过基因工程技术将大肠杆菌中类脂 A 的结构改造成为 MPL,构建能合成 MPL 的大肠杆菌。这种新型的能合成 MPL 的大肠杆菌不仅可以作为宿主菌安全使用于食品和药物的发酵工业生产中,而且可以作为实验室研究中更安全的基因表达载体,最重要的是它可以直接用来生产类脂 A 疫苗佐剂 MPL。
江南大学 2021-04-11
高价值氨基酸生产菌株的合成生物学改造
各种支链氨基酸(如缬氨酸和异亮氨酸)、活性氨基酸(如 γ-氨基丁酸、谷胱甘肽)是目前需求市场巨大的高价值氨基酸,本研究室利用系统生物学和合成生物学最新原理,利用基因工程技术,构建了一序列具有自主知识产权的遗传转化工具,消除了开展代谢工程的制约因素;然后对氨基酸合成关键酶、代谢网络 进行了定向改造和针对性设计;最后系统改造宿主菌细胞膜壁成分,优化辅因子再生和生长效率,最终提升工业菌株产率。 创新要点 针对高价值氨基酸生产菌株,对其合成途径关键酶进行定向改造,赋予抗反馈抑制性性质,强化其转录表达;通过基因敲除优化其整体代谢网络,增大目的产物流量;优化菌株通透性、胞内能荷和氧化还原环境,增强其胁迫抗性和生长性能。 
江南大学 2021-04-11
异亮氨酸工业生产菌代谢工程系统改造
本项目首先借助比较蛋白组学研究技术,从细胞内异亮氨酸合成及转运的整体网络入手,揭示其中影响氨基酸胞外积累的若干关键蛋白质,研究氨基酸合成及转运、代谢调控、底物利用、细胞通透等相关蛋白质的作用机制。然后采用系统生物学和代谢工程研究手段,利用启动子改造、基因共表达、酶定向进化等技术进行系统改造,以显著提高乳糖发酵短杆菌支链氨基酸生产水平。比较蛋白组学分析将为支链氨基酸高产机理研究奠定坚实理论基础,乳糖发酵短杆菌代谢工程系统改造为工业化应用提供有力技术支撑。 关键技术 L-异亮氨酸是人体 8 种必需氨基酸之一,因其具特殊的结构和功能,其用量逐年增长,目前国际上日本生产 L-异亮氨酸且占垄断地位,厂家有味之素、协和发酵和田边制药三家,均已发酵法生产,产率达 30-35 g/L,提取率 60-70%,我国的异亮氨酸研究起步晚,目前分批发酵大罐产酸率为 20-22g/L,总得率为 40- 50%,与日本相比较,我国的 L-异亮氨酸生产水平还很低下,主要是由于生产菌株绝大多数通过诱变选育获得,少数菌株利用基因工程手段改造,但仅局限于少数合成酶基因,这严重制约了支链氨基酸产率的进一步提高。本成果克服了行业内的菌株瓶颈,并优化获得了工业发酵工艺。
江南大学 2021-04-11
γ-氨基丁酸工业生产菌代谢工程系统改造
本项目分别从乳酸菌和大肠杆菌出发,通过基因工程和代谢工程改造菌株,并优化菌株发酵条件和发酵策略,提高了生物合成 GABA 的产量和生产效率, 1 L以玉米芯水解液为碳源的培养基中的培养的 L. buchneri WPZ001 细胞通过静置发酵和静息细胞转化累计可得到 GABA 117 g。主要创新点结论如下:发现 L. buchneri WPZ001 可利用木糖或玉米芯水解液为碳源生长并通过静置发酵高产 GABA;发现 E. coli BL21(DE3)/pET20b-torA-gadB 在信号肽 TorA 引导下可有效分泌表达 GadB 并可用于高效生产 GABA;发现在大肠杆菌中表达 Weimberg 途径可将木糖合成 GABA 的精简为 7 步反应;E. coli JWZ08/pWZt7-g3/pWZt7-xyl 以木糖直接合成 GABA 产量是此前葡萄糖直接合成 GABA 的报道的 3 倍。 
江南大学 2021-04-11
江苏省大型灌区节水改造关键技术研究与应用
本成果规划设计阶段:提出了江苏省节水型生态灌区概念,提出了灌区渠道(渠段、渠系)优化设计、灌区续建配套与节水改造方案选优方法,开发了《江苏省大中型灌区工程设计概(估)算编制规定及定额》与软件、灌区计算机辅助设计专家系统等。建设实施阶段:在渠道衬砌方案优选、混凝土衬砌渠道的生态修复、生态排水沟的构建等方面进行了建设节水型生态灌区的实践;研制了系列化渠系量水设备;对渠系配套建筑物进行了靓化设计,开发了系列化、标准化、装配式田间配套建筑物等。运行管理阶段:开发了灌区信息化系统、规范了系统标准,提出了平原自
扬州大学 2021-04-14
历史建筑结构检测与加固和建筑节能改造技术
历史建筑结构检测与加固和建筑节能改造技术
上海理工大学 2021-01-12
聚 β 羟基丁酸酯与异亮氨酸联产菌代谢工程改造
本研究构建一种谷氨酸棒杆菌基因工程菌,使其同时发酵生产两种产品:聚羟基脂肪酸酯和异亮氨酸;前者是胞内产品,后者是胞外产品。该基因工程菌可以降低生产成本,具有工业应用前景。研究结果显示:将 phaCAB 基因簇导入 WM001后,WM001/pDXW-8-phaCAB 96h 产量为 9.58 g/L,而 WM001/pDXW-8 96h 产量为6.65 g/L,产率提高 65%达到 0.15g 异亮氨酸/g 葡萄糖。PHA 产量达到 28.7%(w/w)。 关键技术 聚羟基脂肪酸酯(PHAs)是部分微生物生存在具有较高碳源与氮源的条件下,生成的一类微生物自身碳源、能源储备物的胞内聚酯。根据相关报道,将 PHB 合成代谢基因簇导入细胞内,可实现 PHB 与某些代谢产物的联产和增产,提高底物的利用率。L-异亮氨酸是一种人体必需氨基酸,因其在医药、食品和健康保健领域有广泛的应用,而使其近几年的生产能力发展迅速,目前国际上比较先进的主流生产方式为发酵法生产 L-异亮氨酸。谷氨酸棒杆菌(Corynebacteriumglutamicum)是一种小棒状、革兰氏阳性的食品安全生产菌,目前已经用于工业生产 L-异亮氨酸,本成果构建能高产 PHAs 的 C. glutamicum 菌株,具有工业化应用潜力。 
江南大学 2021-04-11
上海帝光管中管节能灯厂家提供节能改造工程
产品详细介绍 上海富粟电子有限公司专业生产帝光T8管中管节能灯,本公司节能灯以其超节能、省电超亮、使用寿命和保固期长等等优点而深受广大用户的青睐,尤其是为中小企业节省下一笔后备发展资金。在当今商业主流社会中,节能环保已经成为公司企业的一种无形竞争的软实力和时代潮流。 台湾帝光管中管节能灯的功能特征: 1. 超高节能,省电达60%以上,用一年省半年,亮度比原来更亮 2.换装方便:取下启辉器,直接更换灯管,即为电子式节能灯 3. 低管温38度C,较T8灯管降温42度,可节省空调费用. 4.低温启动,自研专利科技产品,零下30度可以正常启动照明 5. 超长寿命,履约保固16个月,质量有保证. 6. 点灯频率100000HZ,无频闪、无噪音,保护眼睛健康. 6.显色指数在85以上,颜色不失真,色彩更艳丽 7. 超高光效,发光采用纯三基色粉,光效好、光衰低,亮度维持率更长久 8. 低温启动,常温至零下30度仍能正常启动照明. 上海管中管节能灯厂家诚招全国经销商
上海富粟电子有限公司 2021-08-23
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