犬细小病毒乳胶检测试剂及检测应用
犬细小病毒病是由犬细小病毒引起犬科动物的一种烈性传染病。具有发病率高、死亡率高和传染性强。目前检测犬细小病原的方法HA/HI与PCR和ELISA方法自身所限,及目前宠物医疗的门诊条件,都难以在宠物医疗门诊推广。乳胶凝集检测迅速,不需要特殊的仪器和专门的技能,具有很大的优势。
该项目提供一种犬细小病毒乳胶检测试剂,由犬细小病毒单克隆抗体和乳胶组成。该试剂具有特异性强,灵敏度高,检测时间短的特点。该项目提供了一种犬细小病毒乳胶凝集检测方法,该方法简单,易于操作,准确率高。提供了一种杂交瘤细胞株,能够分泌抗CPV的特异性的单克隆抗体。该细胞由骨髓瘤细胞SP2/0和犬细小病毒粒子免疫的小鼠脾细胞融合而得,该杂交瘤细胞株27D可以在含有20%胎牛血清的RPMI-1640培养基中以半贴壁方式生长,生长环境为37℃,5%CO2的培养箱。该杂交瘤细胞株为浑圆透亮,成簇生长,并能稳定的分泌抗犬细小病毒的单克隆抗体。提供了一种抗CPV-2b的单克隆抗体,能够特异性的识别CPV-2a 、CPV-2b 等CPV病毒。提供一种犬细小病毒乳胶在体外检测犬细小病毒中的应用。
该项目制备的抗是CPV-2b亚型的单克隆抗体。克服了普通乳胶致敏抗体时,致敏量少,不稳定,抗体容易脱落等缺点,提高了抗体的结合效率,而且致敏上的抗体不容易从乳胶上脱落,进而提高乳胶的敏感性和保质期,适合了产品开发和大规模生产的要求。
转化条件:具有GMP车间,实现规模化生产;宠物医院
成果完成时间:2016年
华中农业大学
2021-01-12