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高效溶血栓药—重组人纤溶酶原激活剂的研制
重组人纤溶酶原激活剂是由转基因动物(兔、羊)乳腺生物反应器生产的一种新颖溶血栓药,具有成本低、产量高、产物活性高的特点。目前,已经获得了高效表达(rhPA)的转基因兔和羊,并从中提取获得纯品,体内和体外的初步药效试验表明, rhPA 的溶栓活性是现有同类药物的 20 倍(体内)至 200 倍(体外),具有极高的开发价值。
扬州大学 2021-04-14
重组大肠杆菌生产磷脂酶D及转酯化产品开发
磷脂酶D(PLD,EC 3.1.4.4)是一类广泛存在于各种生物体的酶,具有水解作用和磷酰基转移作用(见图1)。作为一种酶制剂,PLD的转磷脂酰活性尤为重要,被用于制备具有生物活性的稀有磷脂。其中,以大豆磷脂酰胆碱(PC)为底物,PLD酶法制备磷脂酰丝氨酸(PS),受到广泛关注。PS作为脑健康营养补充剂,相继被美国FDA、日本HBM和中国国家卫生计生委所认证,列为新资源食品。相较于提取自牛脑和植物的PS,生物酶法制备的PS,避免了食品安全和植物源含量低的问题。进一步,一些新的结构和功能磷脂,通过PLD转磷脂酰反应被合成出来,例如,磷脂酰鲨肝醇、磷脂酰葡萄糖、心磷脂类似物、磷脂酰酪醇、磷脂酰萜烯和磷脂酰丝氨醇,它们中一些具有抗癌和抗氧化活性。 直到现在,受限于磷脂酶D来源不足和价格高(链霉菌属PLD,≥150 units/mg,6516.9¥/1000 U,Sigma公司),其工业上的广泛应用受到限制。例如,文献报道的PLD最高产量在104-105U·L-1,而制备转化得到每公斤PS,需要2.6×106U的PLD。这一障碍的主要原因是高水平表达的PLD对宿主的严重细胞毒性,导致细胞死亡。 历经5年时间,从上游到下游整体设计,我们解决了毒性蛋白(磷脂酶D,PLD)异源表达难的问题(质粒不稳定、蛋白合成时间短、细胞生长抑制和裂解),PLD生产达到目前世界最高水平106U·L-1(748 mg·L-1)(提高20倍);同时发展一种简单有效提取重组磷脂酶D的方法(无需破碎、无需添加溶菌酶和有机溶剂、室温进行),PLD生产成本有望降低20倍以上。按照实验室规模的一台5 L发酵罐,年产量可以提供3.5×108U的磷脂酶D,满足100 kg的PS转化需求计算(不计算PLD重复利用率),扩大反应器体积至100-1000 L,PLD产量可满足制备2-20吨PS的需求。
厦门大学 2021-01-12
关于印发《江西省重点实验室优化重组方案》的通知
根据国家重点实验室优化重组的文件精神,为培育我省战略科技力量,提升原始创新能力和产业技术创新能力,将对省重点实验室开展优化重组,充分激发创新活力,支撑创新型省份建设,特制定本方案。
江西省科技厅 2023-07-14
特异抑制沙眼衣原体的优化重组噬菌体蛋白的制备与应用
相关专利制备出一种对衣原体的生长具有明显的特异抑制作用。该蛋白对沙眼衣原体有确切的特异的清除效果
天津医科大学 2021-02-01
特异抑制沙眼衣原体的优化重组噬菌体蛋白的制备与应用
相关专利制备出一种对衣原体的生长具有明显的特异抑制作用。该蛋白对沙眼衣原体有确切的特异的清除效果应用范围:沙眼衣原体引起的泌尿生殖道感染的发病率居性传播疾病之首,是美国最常见的疾病之一,在全部人群中感染占 10-19%,是引起前列腺炎和盆腔炎最主要的致病菌,可导致不孕和异位妊娠。目前临床上沙眼衣原体的治疗以抗生素为主,不仅治疗效果不令人满意,而且引起菌群失调,抵抗力下降等众多的问题。 经过进一步的人体实验,这种衣原体噬菌体蛋白可以转化为临床最为需求的、国际上首创的最新生物治疗,特异性应用于临床沙眼衣原体感染的治疗。效益分析:基于相关专利开发应用在沙眼衣原体生殖道感染的生物治疗。 一、主要技术优势:分子量约 50kDa 的蛋白片段,免疫原性低,更容易进入组织深层,制造成本低; 二、抑制率可达 65%-92%,对各型衣原体标准株和临床病人中分离株。 三、这种良好的效果在生殖道衣原体感染小鼠模型中得到了验证
天津医科大学 2021-04-10
一种高效快速构建猪肠道冠状病毒重组病毒的方法
本发明属于动物传染病防制技术领域。具体涉及一种高效快速构建猪肠道冠状病毒重组病毒的方法。利用CRISPR/Cas9系统对含有PEDV AJ1102株全长cDNA的BAC质粒进行切割,再通过同源重组方式获得EGFP基因替换PEDV AJ1102株ORF3基因的重组BAC质粒,转染细胞后拯救出重组病毒rAJ1102‑△ORF3‑EGFP。由于不同的猪肠道冠状病毒具有相似的基因组结构与复制策略,本发明也适合于其它猪肠道冠状病毒重组病毒的构建。与传统方法相比,本发明具有靶点选择宽泛,特异性强,操作简单,效率高和实验周期短等突出优点,在一周之内便可获得重组病毒,是一种高效快速构建猪肠道冠状病毒重组病毒的方法。 (注:本项目发布于2019年)
华中农业大学 2021-04-11
一种重组抗菌黏附纤维蛋白及其制备方法和应用
本发明提供了一种重组抗菌黏附纤维蛋白及其制备方法和应用。本发明根据芽孢杆菌密码子偏好性优化合成重组抗菌黏附纤维蛋白的基因,采用多片段重组方法实现抗菌黏附消炎纤维蛋白的功效;本发明生产的重组抗菌黏附纤维蛋白可广泛应用于医疗领域的创伤敷料、手术止血材料、组织工程材料、医疗器械涂层,医美领域的皮肤修复产品、注射填充材料,生物材料领域的细胞培养基、抗菌涂层,以及慢性炎症治疗、药物载体等。本发明所述的重组抗菌黏附纤维蛋白具有可高效生产、低成本、产品纯度高、生物活性好等优点,满足了医疗、医美、生物材料等领域对抗菌消炎功能材料的迫切需求,具有广阔的应用前景和市场价值。
南京工业大学 2021-01-12
膀胱癌治疗用重组hIFN(人干扰素)-α-2b- BCG(卡介苗)
本 项 目 是 我 国 唯 一 拥 有 自 主 知 识 产 权 的 膀 胱 腔 内 灌 注 专 用 型 重 组hIFN-α-2b-BCG,是针对浅表性膀胱癌的预防肿瘤复发、治疗残留肿瘤和原位癌的免疫治疗专用,高效、低副作用的 I 类生物新药。
天津医科大学 2021-02-01
膀胱癌治疗用重组hIFN(人干扰素)-α-2b- BCG(卡介苗)
本 项 目 是 我 国 唯 一 拥 有 自 主 知 识 产 权 的 膀 胱 腔 内 灌 注 专 用 型 重 组hIFN-α-2b-BCG,是针对浅表性膀胱癌的预防肿瘤复发、治疗残留肿瘤和原位癌的免疫治疗专用,高效、低副作用的 I 类生物新药。应用范围:可应用于治疗膀胱原位癌和预防膀胱癌术后复发的新型生物制剂。效益分析:基于相关专利开发的在线高速分选矿用设备,具有分选速度快、系统集成度高、运行成本低等优点,其主要技术优势和性能指标如下: 一、主要技术优势 (1)一种重组干扰素卡介苗菌株,其特征在于该菌株利用基因工程技术构建 的 phIFN-α-2B 穿 梭 质 粒 , 转 导 到 丹 麦 I 型 BCG 菌 株 内 , 构 建 出rBCG-hIFN-α-2B 菌株,该卡介苗菌株可以分泌 hIFN-α-2B。 (2)既发挥 IFN-α-2b 的直接作用又可增强 BCG 介导的抗肿瘤效应,增强与放大了野生 BCG 预防与治疗高危浅表膀胱癌的临床效果,降低了 BCG 的灌注剂量和局部与全身严重并发症发生率,同时也节省了大剂量干扰素腔内灌注的昂贵费用。 (3)将重组人干扰素-α-2b-BCG 使用生物反应发生器进行大规模深层发酵培养,原位连接切向流中空过滤柱,离散洗涤菌体;经真空冷冻干燥成干粉剂。这样获得的菌苗活性率高,降低了生产过程中污染的可能性。 二、主要性能指标 (1)纯度:100%; (2)活菌量:≥60%; (3)体外和小鼠体内抗肿瘤活性优于 BCG 。
天津医科大学 2021-04-10
鱼类NKEF-A重组蛋白对适应性体液免疫的活化效应及其应用
本发明公开了一种鱼类NKEF-A重组蛋白对适应性体液免疫的活化效应及其应用,所述的应用为用于制备能够促进鱼类体液免疫能力的免疫增强剂,所述鱼类NKEF-A重组蛋白的氨基酸序列为SEQID?NO:1所示;本发明提供的NKEF-A重组蛋白作为适应性体液免疫增强剂,其优点在于:(1)使用剂量小,效率高;以1:100(NKEF-A蛋白:抗原)的NKEF-A重组蛋白剂量即可发挥显著的免疫促进作用;(2)易于制备免疫混合液:NKEF-A重组蛋白是可溶性蛋白,容易与抗原混合,克服了传统矿物油乳剂类制剂不易乳化抗原的缺点;(3)安全性高;与细菌毒素或化合物制剂不同,NKEF-A是宿主自身的蛋白,不存在外源物质导入产生的潜在毒副作用。
浙江大学 2021-04-13
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