一种高效快速构建猪肠道冠状病毒重组病毒的方法
本发明属于动物传染病防制技术领域。具体涉及一种高效快速构建猪肠道冠状病毒重组病毒的方法。利用CRISPR/Cas9系统对含有PEDV AJ1102株全长cDNA的BAC质粒进行切割,再通过同源重组方式获得EGFP基因替换PEDV AJ1102株ORF3基因的重组BAC质粒,转染细胞后拯救出重组病毒rAJ1102‑△ORF3‑EGFP。由于不同的猪肠道冠状病毒具有相似的基因组结构与复制策略,本发明也适合于其它猪肠道冠状病毒重组病毒的构建。与传统方法相比,本发明具有靶点选择宽泛,特异性强,操作简单,效率高和实验周期短等突出优点,在一周之内便可获得重组病毒,是一种高效快速构建猪肠道冠状病毒重组病毒的方法。
(注:本项目发布于2019年)
华中农业大学
2021-04-11