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重组大肠杆菌生产磷脂酶D及转酯化产品开发
磷脂酶D(PLD,EC 3.1.4.4)是一类广泛存在于各种生物体的酶,具有水解作用和磷酰基转移作用(见图1)。作为一种酶制剂,PLD的转磷脂酰活性尤为重要,被用于制备具有生物活性的稀有磷脂。其中,以大豆磷脂酰胆碱(PC)为底物,PLD酶法制备磷脂酰丝氨酸(PS),受到广泛关注。PS作为脑健康营养补充剂,相继被美国FDA、日本HBM和中国国家卫生计生委所认证,列为新资源食品。相较于提取自牛脑和植物的PS,生物酶法制备的PS,避免了食品安全和植物源含量低的问题。进一步,一些新的结构和功能磷脂,通过PLD转磷脂酰反应被合成出来,例如,磷脂酰鲨肝醇、磷脂酰葡萄糖、心磷脂类似物、磷脂酰酪醇、磷脂酰萜烯和磷脂酰丝氨醇,它们中一些具有抗癌和抗氧化活性。 直到现在,受限于磷脂酶D来源不足和价格高(链霉菌属PLD,≥150 units/mg,6516.9¥/1000 U,Sigma公司),其工业上的广泛应用受到限制。例如,文献报道的PLD最高产量在104-105U·L-1,而制备转化得到每公斤PS,需要2.6×106U的PLD。这一障碍的主要原因是高水平表达的PLD对宿主的严重细胞毒性,导致细胞死亡。 历经5年时间,从上游到下游整体设计,我们解决了毒性蛋白(磷脂酶D,PLD)异源表达难的问题(质粒不稳定、蛋白合成时间短、细胞生长抑制和裂解),PLD生产达到目前世界最高水平106U·L-1(748 mg·L-1)(提高20倍);同时发展一种简单有效提取重组磷脂酶D的方法(无需破碎、无需添加溶菌酶和有机溶剂、室温进行),PLD生产成本有望降低20倍以上。按照实验室规模的一台5 L发酵罐,年产量可以提供3.5×108U的磷脂酶D,满足100 kg的PS转化需求计算(不计算PLD重复利用率),扩大反应器体积至100-1000 L,PLD产量可满足制备2-20吨PS的需求。
厦门大学 2021-01-12
一种巴斯德毕赤酵母、产生的耐高温酶及应用
本发明提供一种巴斯德毕赤酵母、产生的耐高温蛋白酶及应用,属于微生物技术领域;本发明通过选育一种可产生耐高温酶的巴斯德毕赤酵母(pichia pastoris)AN‑PK‑9K‑GS115,然后将其进行培养,从发酵液中提取耐高温蛋白酶,将其用于羽毛粉的水解,可以有效水解羽毛粉,将其中蛋白质组分高效降解为小肽成分或者氨基酸成分,从而提高蛋白质的消化率,增加采食量,提高动物健康水平。 (注:本项目发布于2019年)
华中农业大学 2021-01-12
固定化磷脂酶A1在制备磷脂DHA中的应用
本发明提供了一种固定化磷脂酶A1在制备磷脂DHA中的应用,具体过程为,六水硝酸钴和2‑甲基咪唑分别溶于无水甲醇得到六水硝酸钴溶液和2‑甲基咪唑溶液,将2‑甲基咪唑溶液滴加至六水硝酸钴溶液中,搅拌反应、静置、干燥,得到ZIF‑67纳米材料,将ZIF‑67纳米材料于磷酸钠缓冲液中混悬,加入磷脂酶A1溶液,调节pH,置于摇床孵育,离心、干燥,获得ZIF‑67纳米材料固定化磷脂酶A1;将游离脂肪酸和大豆卵磷脂组成的底物和固定化磷脂酶A1在有机反应体系中进行催化反应,分离纯化获得磷脂DHA。固定化磷脂酶A1,稳定性好,催化制备磷脂DHA,DHA掺入率高达51.04%。
南京工业大学 2021-01-12
基于固定化酶生产低分子量肝素的新工艺
低分子量肝素(LMWH)是临床上最主要的天然抗凝剂,目前主要是通过动物来源的肝素进行酶降解制得。欧洲药典要求 LMWH 的分子量为 6000~8000,质量控制是生产 LMWH 的重要环节。而肝素酶的活性和利用率直接影响 LMWH 生产成本和产业经济。 本项目组利用融合肝素酶 I (Hep I)与甲壳素之间的亲和作用,实现酶的循环利用,同时融合酶活性和稳定性提高。利用绿色溶剂体系制备形态完好、尺寸均一的甲壳素微球。用固定化酶制备的 LMWH 产品达到欧洲药典要求,实现了分子量可控,生产过程可实时监测。该项目将对 LMWH 产业的绿色和经济生产提供技术支持。目前已发表 SCI 论文 2 篇,并与相关企业开展了合作。 
江南大学 2021-04-13
一种液位检测与控制装置和方法
本发明提供一种液位检测与控制装置和方法用于解决水纹波动和接触抖动等一些实际中常见的不良工况,而水纹波动和接触抖动会严重影响液位开关的正常工作的问题。其中包括浮子开关、进水压传感器、波幅及频率传感器和脉宽模式设定单元及液位控制单元;所述浮子开关和脉宽模式设定单元连接液位控制单元,所述波幅及频率传感器和进水传感器连接脉宽模式设定单元;所述液位控制单元,用于接收浮子开关输入的第一信号和脉宽信号,根据脉宽信号消除浮子开关的信号的波动,获得第二信号;用于根据第二信号控制进水或出水。通过脉宽信号消除因为液面波动而导致的浮子开关的电信号波动,从而准确的识别液面的状态,消除液面波动对液位控制造成的影响。
中国农业大学 2021-04-11
灵芝氨基酸口服液保健食品开发
成果描述:市售氨基酸类产品较为单一,少见复配产品。并且灵芝一直以来作为保健佳品,具有抗肿瘤和免疫调节、降血糖、保肝、抗衰老、抗炎镇痛等多种功效。现市场中灵芝类保健产品多以胶囊、粉剂为主。本品以氨基酸和灵芝配伍,剂型为口服液,具有良好的免疫调节作用且利于吸收。市场前景分析:产业化,目前已经成功转让一家企业,取得国家保健食品字号。保健食品市场。与同类成果相比的优势分析:所用原料符合中国卫生部关于保健食品的原料要求,产品的卫生指标、理化指标、功效成分指标和安全性指标等均符合卫生部关于保健食品的相关要求。
四川大学 2021-04-10
改善硫酸亚铁结晶减少钛液夹带流失技术
本项目旨在解决钛白工厂硫酸亚铁结晶太细,过滤困难,滤饼夹带钛液流失严重的问题
四川大学 2021-04-10
工业级发酵液分离提取或天然产物提取技术
依托丰富的发酵、食品、医药、中草药、经济作物或植物等过程物料分离提取纯化的开 发、工程经验,本平台积累了丰富的上述领域生理活性物质或天然产物分离提取技术、工艺 包、装备选型、工程设计经验和资料库,可为合作伙伴提供成熟工艺技术或中试阶段起步技术 开发,实现具有国内领先水平的工艺技术应用,产生显著经济效益。
华东理工大学 2021-04-11
一种深共晶溶液电镀铁镀液
本发明提供一种在深共晶溶液中电镀铁的方法,属于电镀科学领域。由氯化胆碱和乙二醇按照1∶2的摩尔比混合,在温度为20℃~100℃的油浴中加热保温10min~4h,得到深共晶溶液,再加入亚铁盐与抗氧化剂,继续搅拌至完全溶解,最后将所得溶液放入真空环境中保持恒温30~80℃,持续24h,得到所需的电镀液。
电子科技大学 2021-04-10
加米霉素原料及加米霉素注射液
加米霉素原料及注射液通过药物合成工艺改进创新,提高了原 料产出率,降低了原料药的成本;加强新剂型研究,改善药物的药动学特征, 从而提高药效,通过药动-药效同步模型制定出最佳给药方案;药物逐步推广应 用于家畜呼吸系统疾病的防治中,可以最大程度地提高治愈率,减少直接经济 损失;通过药效及安全性评价平台,保证药物的高效低毒低残留等。 目前已完成加米霉素原料实验室试制,正在进行加米霉素原料中试。
青岛农业大学 2021-04-11
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