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无需抗体的酶辅助化学标记N6-甲基腺嘌呤(m6A)测序技术
随着首个RNA修饰N6-甲基腺嘌呤(m6A)的去修饰酶FTO的发现,RNA表观遗传学/表观转录组学开始兴起并成为表观遗传学新的研究热点。m6A作为首个被发现的可逆RNA修饰,广泛存在于mRNA,依赖修饰酶、去修饰酶和结合蛋白发挥调控功能。已发现m6A具有调控mRNA剪接、出核、稳定性和蛋白翻译等功能,可以参与发育、配子发生、细胞重编程、生物节律、疾病等多种生理和病理过程的功能调控。为了更好地研究m6A生物功能和临床病理研究,开发m6A高通量测序技术一直是研究的热点。 现有m6A测序技术主要依赖于m6A抗体富集技术,包括低分辨率的m6A-seq/MeRIP-seq和联用iCLIP或PAR-CLIP技术的高分辨率m6A测序技术miCLIP 或PA-m6A-seq。抗体存在对特定RNA序列或结构的潜在非特异性结合,为了解决抗体方法的种种问题,研究者们做出了各种尝试,近期开发了两类无需抗体的m6A测序技术,一类为利用对特定甲基化序列(m6ACA)敏感的RNA核酸内切酶MazF辅助的测序方法(m6A-REF-seq or MAZTER-seq),此类方法只能检测16~25%的m6A位点;另一种是在细胞内表达融合m6A-binding domain(YTH)与胞嘧啶脱氨酶(APOBEC1)的融合蛋白实现的m6A测序(DART-seq),但该方法依赖于细胞转染效率且受限于体外样品的使用。 贾桂芳课题组一直致力于开发和利用核酸化学生物学技术研究RNA化学修饰在动植物中的生物功能研究。在本课题中,贾桂芳课题组巧妙地利用m6A的去甲基酶FTO蛋白作为催化剂,将mRNA上化学惰性的m6A转化为高反应活性的中间态产物N6-羟甲基腺嘌呤(hm6A),然后利用二硫苏糖醇(DTT)的巯基与hm6A发生亚胺1,2加成反应,将不稳定的hm6A转化为更稳定的巯基加成产物dm6A。dm6A上的自由巯基可以与甲烷硫代磺酸(methanethiosulfonate,MTSEA)快速反应,实现在mRNA上m6A的位置标记生物素Biotin,最终可被链霉亲和素珠捕获,从而富集含有m6A修饰的RNA片段供后续高通量测序使用。
北京大学 2021-04-11
一种氨基化复合涂层及其制作方法和应用
本发明公开一种氨基化复合涂层,所述氨基化复合涂层是通过将3-氨丙基三乙氧基硅烷涂层在150~180℃与聚乙烯亚胺接触1~10小时得到.经过聚乙烯亚胺处理的3-氨丙基三乙氧基硅烷涂层的流动电势值随时间的变化减小,涂层的稳定性更好,该氨基化复合涂层在水溶液中的稳定性要比未改性的3-氨丙基三乙氧基硅烷涂层更为稳定。
兰州大学 2021-01-12
富含γ-氨基丁酸的稻米健康食品产业化关键技术
以米胚芽为原料,制备出富含γ-氨基丁酸(GABA)的功能性配料(GABA≥ 20.6g/100g);以米糠为原料富集 GABA,产品中 GABA≥10g/100g;以高浓度 GABA 和碎米为原料制备营养大米(GABA≥500mg/100g);制备得到 GABA≥100mg/100g 的发芽糙米,是普通发芽糙米中 GABA 含量的 2-3 倍。 创新要点 米胚内源性 GAD 激活技术、酶反应定向调控技术、固定化酶技术、和高效分 离技术、活性保持技术和低温挤压技术 。
江南大学 2021-04-11
2,5-二羟甲基-3,6-二甲基吡嗪的合成与精制方法
【发 明 人】李伟;文红梅;王天麟;周莹;陈磊【摘要】本发明公开了一种2,5-二羟甲基-3,6-二甲基吡嗪(liguzinediol)的合成和精制方法,该方法以2,5-二甲基吡嗪为原料,通过自由基反应直接生成liguzinediol。此工艺仅一步反应,反应温和,操作简便,反应时间短,成本低,收率高,易分离纯化,适于工业化生产。
南京中医药大学 2021-04-13
利用聚二甲基硅氧烷疏水材料板分离微丝菌的方法
本发明提供一种利用聚二甲基硅氧烷疏水材料板分离微丝菌的方法,该方法的步骤是将污水处理厂曝气池中已发生以微丝菌为优势菌的膨胀污泥混合液滴加在具有凹槽结构的聚二甲基硅氧烷疏水材料板上,冷藏放置保存后,采用氯化钠溶液对聚二甲基硅氧烷疏水材料板进行冲洗,利用相似相容原理实现微丝菌从活性污泥混合液中的分离。本发明的效果是该方法操作简单易行,可快速地实现微丝菌从活性污泥混合液中的分离,克服了微丝菌从活性污泥系统中分离困难的问题,可将分离有微丝菌的聚二甲基硅氧烷疏水板上置于培养基中,进行微丝菌的纯培养,与传统的稀释平板法和涂布平板法等微丝菌纯培养方法相比,加快了微丝菌菌种的筛选,可将微丝菌的纯培养周期缩短3~6周。
天津城建大学 2021-04-11
具抗肿瘤活性的羊毛甾烷三萜化合物及制备方法和应用
研发阶段/n本发明公开了具抗肿瘤活性的羊毛甾烷型三萜化合物及其制备方法和应用。其制备方法包括:制备灵芝子菌丝体或子实体的乙醇提取物;将灵芝子菌丝体或子实体的乙醇提取物清膏以水分散后,用石油醚反复萃取,再用乙酸乙酯萃取,得乙酸乙酯提取物;将乙酸乙酯提取物通过正相、反相以及凝胶柱层析反复分离得到三部分;用制备高效液相色谱,分别以乙腈-甲醇-水体系洗脱,收集相应组分后,减压蒸干后即得。本发明从灵芝子实体或发酵菌丝体中分离得到5种新的羊毛甾烷衍生物,经生物活性评价,本发明新分离的5种羊毛甾烷衍生物能够有效抑
湖北工业大学 2021-01-12
甲基硅氧烷大气转化导致低挥发性物种及高产率甲醛的形成
该研究发现一种新的过氧自由基自氧化机制,阐明甲基硅氧烷大气转化会生成甲醛,增加其释放的环境风险。该研究不仅拓展了对大气过氧自由基化学的理解,还为甲基硅氧烷环境行为模拟和风险评估提供了重要的基础数据。 <span style="background-color: rgb(255, 255, 255); color: rgb(92, 101, 96);"
大连理工大学 2021-01-12
抗旱耐盐碱小麦“青麦 6 号”
半冬性小麦品种,越冬性强,熟期较早;具有极强的抗旱性、抗病性和耐盐性。株型较紧凑,较抗倒伏,熟相好;亩最大分蘖 89.5 万,亩有效穗 36.5万,分蘖成穗率 40.7%;株高 76.1 厘米,生育期在 233 天左右。分别在 2010 年和 2012 年创出旱地全生育期无浇水情况下千亩方和百亩方平均亩产 620.7 公斤和 703.5 公斤的高产纪录。2013 年~2015 年连续三年创造盐碱地小麦高产纪录,其中 2014 年东
青岛农业大学 2021-01-12
植物RNA化学修饰m6A
鉴定了拟南芥中的 m6A 去甲基酶 ALKBH10B ,发现 ALKBH10B 缺失会导致拟南芥显著的晚花表型, ALKBH10B 通过影响 FT , SPL3 和 SPL9 的甲基化水平调控拟南芥的成花诱导。不同的识别蛋白通过对 m6A 的结合,对 mRNA 的加工代谢产生不同的调控作用, 进而 影响细胞不同的生理功能。通过开发甲醛交联- 免疫共沉淀(Formaldehyde-crosslinking and immunoprecipitation, FA-CLIP) 技术,鉴定出全转录组水平的ECT2-mRNA 相互作用位点,揭示ECT2 主要结合mRNA 的 3' 非翻译区(3'UTR), 并且倾向于结合保守序列 URUAY (R=G>A, Y=U>A,  其中 UGUAY 序列 占 90% 以上 ) 。使用植物细胞核裂解液进行的体外酶活实验和凝胶迁移实验( EMSA )证明 UGUA 序列为 植物特有的m6A 保守序列,且UGUm6A 可以被ECT2 高特异性识别。亚细胞定位实验表明ECT2 蛋白分布于细胞核和细胞质,结合高通量测序数据分析,推测ECT2 具有双重功能,ECT2 可能在细胞核中通过结合甲基化的UGUA 调控pre-mRNA 的 3'UTR 加工,在细胞质中ECT2 促进mRNA 的稳定性。进一步机理研究发现影响表皮毛发育的三个基因ITB1, TTG1 及DIS2 的转录本可以被m6A 修饰且被ECT2 结合,在 ECT2 的T-DNA 插入突变体中,ITB1, TTG1 及DIS2 的mRNA 稳定性降低,mRNA 表达量水平降低,继而导致 ect2 突变体中表皮毛分叉数增多。
北京大学 2021-04-11
IPv6无线/移动路由器
BJTU WR2600/2601 IPv6无线/移动路由器由北京交通大学自主研制,该设备以国家“863”重大项目等课题为基础,实现了移动IPv6技术、移动子网技术、无线接口技术等,并于2004年8月通过了教育部组织的科技成果鉴定,与会专家一致认为该产品填补了国内空白,达到国际先进水平。该产品已在国内多所科研教学机构组建的IPv6网络中应用,性能稳定可靠,运行效果良好。该产品获得了2005年度北京市科学技术一等奖,并通过了国际IPv6 Ready 认证(ID 01-000335)。 技术指标: ☉提供无线接入,使无线终端设备无须线缆访问网络资源    ☉利用2.4 GHz 频段 (DSSS)    ☉传送数据速率达11 Mbps    ☉动态适应 11, 5.5,,2和1 Mbps 网络速率, 视信号强弱, 最大限度确保可靠有效地连接    ☉确保最大安全通过IEEE 802.11b标准定义的64位和128位有线等效保密(WEP)    ☉可充当移动节点的家乡代理,即可以为不属本地子网的节点提供漫游服务,通过隧道为移动节点转发数据,并采用IPSec加密。 参数: 标准:IEEE 802.11b 无线局域网标准    天线:外置 2dbi 天线 (长度103 mm),可旋转结构化(SMA)连接    数据速率:11Mbps, 5.5Mbps, 2Mbps和1Mbps    调制技术:直接序列扩频 (DSSS)    使用频率;2.4 G to 2.4835GHz(ISM频段)    通道:11 通道 (US & Canada)    电源:220V 网络接口: 1个无线网接口 2个以太网接口(选配) RJ45 10/100自适应,支持全双、半双工模式 1个千兆以太网口(多模光纤,选配) 支持的协议: IPv6、IP、TCP、UDP、ICMP、ICMPv6、IPsec等(移动IPv6协议在研中) 移动IP的特性: 可同时处理的最大注册请求数:200; 对移动节点注册请求的处理延迟:≤0.5秒; 路由器通告报文间隔:0.01秒。 产品特色: 该无线路由器的主要特色如下: ☉双协议栈,同时支持IPv6和IPv4,可以用于IPv6无线网络中,也可以用于IPv4无线网络中,具有很广的适用范围,特别是在从IPv4向IPv6过渡的阶段具有很大的优势; ☉集成宽带路由器和接入点,802.11b 无线网络和有线以太网客户都能共享宽带因特网连接; ☉具有良好的安全特性。
北京交通大学 2021-04-13
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