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高品质麦芽糊精的酶法生产关键技术
麦芽糊精是以淀粉为原料,通过生物酶法控制淀粉水解程度,从而得到DE 值处于 5-20 的淀粉水解产物。麦芽糊精的分子量介于淀粉和淀粉糖之间,是一种价格低廉、口感滑腻、没有任何味道的营养性多糖。 高品质的麦芽糊精流动性良好,无异味,几乎没有甜度;溶解性能良好,有适度的粘度;吸湿性低,不易结团;有较好的载体作用,是各种甜味剂、香味剂、填充剂等的优良载体;成膜性能好,既能防止产品变形又能改善产品外观;极易被人体吸收,特别适宜作病人和婴幼儿童食品的基础原料;对食品饮料的泡沫有良好的稳定效果;对结晶性糖具有抑制晶体析出的作用;有很好的乳化作用和增稠效果;有促进产品成型和良好地抑制产品组织结构的作用。由于麦芽糊精所具有的优良使用特性,使其广泛应用于饮料、冷冻 食品、糖果、麦片、乳制品、保健品等行业,还可应用于纺织、日化、医药生产中。
江南大学 2021-04-13
固定化重组头孢菌素脱乙酰酶生产
本项目利用重组大肠杆菌异源表达来自枯草芽孢杆菌中的CAH基因,发酵生产头孢菌素脱乙酰酶蛋白。由于重组蛋白表达量高,采用简单的硫酸铵分级沉淀方法即可达到很好的纯化效果,极大程度地缩减了蛋白纯化的成本。在工业应用中,将游离酶固定在载体上可以实现多次重复利用,产物分离容易,可以连续操作。在众多固定化酶方法中,由于制备的固定化酶稳定性好,共价结合的方法在工业中最为常用。本项目采用共价结合的固定化方法,在温和条件下将游离酶连接在亲水性环氧基载体上,得到的固定化酶活力回收高,稳定性好,重复使用次数高。已完成整条工艺流程。重组大肠杆菌发酵生产CAH蛋白进入中试阶段,通过优化培养条件,发酵培养基等工作,降低生产成本,提高产酶量。目前完成的蛋白纯化及固定化酶制备工艺,对产品的性能已通过相关的实验得到很好的评价结果。在不断完善发酵和固定化酶制备工艺后,即可以进一步扩大生产试验规模,从而应用于工业生产。
华东理工大学 2021-04-13
一种酶提取紫锥菊多糖的方法
本发明公开了一种酶提取紫锥菊多糖的方法,将紫锥菊地上部分粉碎成适宜大小,脱脂,提取,加酶制剂酶解、灭酶、继续高温提取、离心、上清液进行旋转蒸发浓缩,醇沉,沉淀依次用无水乙醇、丙酮、乙醚洗涤,复溶后,喷干,得紫锥菊多糖。本发明的有益效果是:本制备方法,具有反应条件温和、提取时间短、提取率高等优点,并且重现性高,稳定,制备得到的紫锥菊多糖溶解性较好,外观均一、水溶性好,并且获得较好的活性组分,具有较好的免疫活性。
青岛农业大学 2021-04-13
迅裂细菌裂解酶与核酸提取试剂盒
已有样品/n迅裂细菌裂解酶与核酸提取试剂盒采用专利的噬菌体裂解酶,具有常温 5-10 分钟内裂解、无毒无害等特点,并结合特有的技术能实现在取样拭子上的原位裂解,大大简化从取样拭子上获得靶标物如细菌等的核酸提取过程,具有提取效率高、操作简便等优点,是临床PCR检测,如产道中B簇链球菌和鼻拭子中耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA),的 理想样本前处理试剂。同时还研发了通用的真菌和细菌核酸提取试剂盒,与简单的涡旋仪联用,可以裂解和提取任何真菌和细菌的核酸。市场前景:可广泛应用于细菌裂解提取,应用前景广阔。
中国科学院大学 2021-01-12
影响精子功能的唾液酸酶检测方法
本发明提出了一种影响精子功能的唾液酸酶检测方法。该方法是一种新的评估精子质量与功能的实验室检测方法,可为临床原因不明的男性不育患者提供检测及临床咨询。首次报道精子唾液酸酶的表达与受孕能力的影响(7年原创研究历史),国际与国内领先地位。已新近申请4项中国相关专利和2项国际专利协定( PCT)。
四川大学 2016-06-15
复合酶皮胶原处理剂系列产品
本项目来源于国家863计划项目成果,核心技术已获得国家发明专利。复合酶皮胶原处理剂系列产品有A-G7个系列、12个品种,这些酶制剂可以分别用于以下不同的用途:(1)猪皮的臀部处理(复合酶皮胶原处理剂A和复合酶皮胶原处理剂B);(2)牛皮、山羊皮的颈纹处理(复合酶皮胶原处理剂C);(3)猪皮、山羊皮全皮脱毛处理(复合酶皮胶原处理剂D),这种脱毛完全不同于文件1的有温有浴酶脱毛,它是通过涂刷在皮的肉面进行脱毛的;(4)水解动物皮提取胶原(复合酶皮胶原处理剂E);(5)猪皮、牛皮以及羊皮的浸酸软化和蓝坯革处理(复合酶皮胶原处理剂F);(6)猪、牛、羊皮的软化处理(复合酶皮胶原处理剂G)。经批量生产并应用结果表明,本项目系列产品,综合性能优于或接近国内外同类产品,技术成熟。
四川大学 2015-12-21
农药快速检测用新酶源 的筛选与鉴定
由于基于酶抑制法的农药快速 检验中所使用的动物来源的酣酶普遍存在着提取成本高,活 性不稳定, 不易于保存的间题。本团队从芸豆中筛选并纯化出一种植物酣酶。通过底
西华大学 2021-04-14
Happy-T4M酶标板离心机
性能特点: 1、微机控制,触摸面板,LCD显示。 2、采用交流变频电机。 3、可直接设定转速,自动计算RCF值。可直接设定RCF值,自动转换成转速。 4、具有10档升降速。 5、运行中可修改参数,运行参数自动记忆。 6、具有10种自定义程序存储功能。 7、具有软刹车功能。 8、具有转子号识别功能。 9、具有超速、不平衡和门盖安全保护功能,并在显示窗口显示故障信息和声音报警。
济南福的机械有限公司 2022-04-27
基于光固化丝蛋白水凝胶边缘封闭的一体化双层丝蛋白支架用于骨软骨再生
新生软骨与缺损周围软骨间的水平整合是骨软骨修复中常被忽略的问题,也是软骨修复成功的关键。
科技部生物中心 2022-04-12
关于蛋白质机器动力学的研究
泛素-蛋白酶体体系(Ubiquitin-Proteasome System,简称UPS)是细胞内最重要的蛋白质降解通路,对维持生物体内蛋白质的浓度平衡,以及对调控蛋白、错误折叠或受到损伤的蛋白的快速降解起着至关重要的作用,参与了细胞周期、基因表达调控等多种细胞进程,由UPS失常引发的蛋白质新陈代谢异常与众多人类重大疾病直接相关。2004年,Aaron Ciechanover, Irwin Rose和Avram Hershko三位科学家被授予了诺贝尔化学奖,以表彰他们对该降解通路的发现。UPS中蛋白酶体是细胞中最基本的、最重要的不可或缺的、最为复杂的大型全酶超分子复合机器之一,人源蛋白酶体全酶包含至少33种不同的亚基,总原子质量约为2.5MDa。美国FDA批准的多种治疗癌症的药物分子即以蛋白酶体为直接靶标。近年来,随着冷冻电镜技术的发展和应用,人们对这一大分子机器的结构和功能研究得以不断深入。2016年,毛有东课题组与合作者报道了人源蛋白酶体基态的3.6Å冷冻电镜结构及其他三个亚纳米分辨构象,并首次发现一个亚稳态构象的核心颗粒(Core Particle,简称CP)底物转运通道处于开放状态(见PNAS 2016, 113: 12991-12996)。2018年4月,该课题组又报道了6个ATPγS结合状态下的26S动态结构,包括三个CP开放态对应的亚稳简并态近原子分辨(4~5Å)结构(见Nature Communications 2018, 9: 1360)。尽管这些工作揭示了蛋白酶体的基本架构和内在运动行为,但由于缺乏蛋白酶体与底物之间的相互作用,人们对于蛋白酶体如何实现底物降解的原子水平工作机制仍一无所知。此外,尽管冷冻电镜技术近年来广泛应用于分析具有动态特征的蛋白复合体结构和平衡态构象,但对其中间态结构和非平衡构象分析的分辨率水平往往局限在4~6埃或更低,离真正的全原子水平动力学分析还有相当一段距离。 为了真正实现原子水平的蛋白酶体底物降解动态过程的冷冻电镜三维重建和动力学表征,毛有东课题组攻克了两大技术难题。其一,如何在蛋白酶体完成底物降解之前抓到它的所有可能的中间态构象?课题组发展了一种新颖的核酸置换法,利用ATPγS降低AAA-ATPase激酶水解活性的特点,在底物降解中间过程,通过将ATP快速置换成ATPγS,结合快速冷冻的优势,从而扑捉到蛋白酶体在底物降解过程的中间态。其二,如何在从冷冻电镜数据中分析出更多构象的同时,还把分辨率做到3埃甚至更好?课题组通过多年持续努力,发展了多种基于人工智能和机器学习的冷冻电镜图像聚类的新型算法,并针对蛋白酶体的动力学特征,设计了一套极其有效的整合了多种算法的多构象分类流程。通过这两套技术方案的完美结合,课题组成功解析了人源蛋白酶体在降解底物过程中的七种不同的、但差别甚微的、高分辨原子水平的天然态构象(Native states),完整展示了蛋白酶体从泛素结合到去泛素化,再到底物转运的动态过程。与同期在Science上发表的与底物结合的酵母蛋白酶体的4.2-4.7埃冷冻电镜结构(Science doi: 10.1126/science.aav0725,来自加州伯克利分校和Scripps研究所)相比,该Nature论文不仅总构象数量多一倍,全部构象分辨率还高1-2埃。由于Science论文采用了抑制Rpn11去泛素活性的策略,其非天然态结构中底物并不能真正自由转运,所推测的机理仅限于底物转运这一步,对于其他三大Nature论文所回答重要问题均无法给出答案。这体现了该Nature论文不仅在实验方法的原创性上和数据分析水平和质量上,更在科学发现和问题探究的深度和广度上大幅超越了来自Science的竞争性论文。图一 七个利用冷冻电镜解析的精细原子结构完整揭示了从泛素识别、去泛素化反应、转运启动和持续降解的核心功能动态过程。 作为整个蛋白酶体的动力来源与运转核心,AAA-ATPase激酶分子马达展现出了三种不同的核苷酸水解协作模式,6个ATPase亚基协调工作,交替与底物发生相互作用。在去泛素化过程(EB态)中,处于对立位置的两个ATPase亚基Rpt2与Rpt4水解ATP,而Rpt5与Rpt6则释放ADP,ATPase内的底物转运通道被打开,使得底物可以进入轴心通道;与此同时,去泛素化酶Rpn11亚基与泛素及底物发生相互作用,执行其作为去泛素化酶的功能;在转运起始过程(EC态)中,相邻的两个ATPase亚基Rpt1与Rpt5会同时水解ATP,调控颗粒(Regulatory Particle,简称RP)发生大规模转动并释放泛素;在底物去折叠与转运过程(ED态)中,三个相邻的ATPase亚基会分别同步进行ATP的结合、ADP的释放与ATP的水解,这一过程会单向传递下去,将ATP水解释放的化学能转换为机械能,使得相应的ATPase亚基发生刚体转动,推动底物的去折叠和单向输运,同时CP的转运通道入口打开,底物被送入通道中进行降解。这些研究结果为几十年来对蛋白酶体功能的研究提供了宝贵的第一手原子结构和动力学信息,对于理解生物体内蛋白质的降解过程和一系列负责物质输运的ATPase马达分子的一般工作原理具有极为重要的科学意义。
北京大学 2021-04-11
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