基于核酸适配体的抗生素快速检测试纸
抗生素能有效防治动物疾病并促进生长,在畜牧业、养蜂业等领域被大量使用。而超过规定的滥用会造成抗生素在动物源性食品及环境中积累,对人体健康和环境安全产生危害。抗生素传统检测方法比如微生物检测、HPLC 等理化分析不仅灵敏度低,而且不能满足对食品和水源等抗生素含量的现场检测。目前市场上有一些基于抗体的抗生素检测试剂,但抗体种类有限,质量良莠不齐。核酸适配体本质上以单链 DNA 为主,不仅能特异性识别抗生素,而且具有亲和力高、温度稳定性好、成本低、质量高度稳定等特性,有望取代抗体在抗生素快检试剂中充当靶分子识别元件。 本实验室长期以来致力于抗生素特异性适配体的筛选和优化,已获得一批能高特异性高亲和力结合抗生素的适配体序列。利用这些适配体研制了抗生素 快速检测试纸。以卡那霉素为例,利用卡那霉素特异性适配体修饰的金纳米粒子(AuNPs-apt)作为探针,与适配体互补的寡核苷酸 DNA1 修饰的银纳米粒子(AgNPs-DNA1)作为信号放大元件,设计制备的试纸能够在 10 min 之内完成检测,利用肉眼辨别的检测限可达到 35 nmol/L,远低于欧盟规定乳制品中卡那 霉素含量不得超过 150 μg/kg (约 265 nmol/L)。若采用胶体金读数仪,不仅可实现定量测定,检测限更可达到 80 pmol/L。对于蜂蜜等成分相对简单的样品,可直接用试纸进行测定。对于牛奶、奶粉、肉类等成分较复杂或非液态样品,须经简单样品处理后测定。样品处理过程可采用标准化流程,时间小于 30 min。
江南大学
2021-04-11