NMT和激光共聚焦技术的比较
(1)什么是激光共聚焦
激光扫描共聚焦荧光显微镜(laser scanning confocal microscopy, LSCM)是一种利用计算机、激光和图像处理技术获得生物样品三维数据、目前最先进的分子细胞生物学的分析仪器。
主要用于观察活细胞结构及特定分子、离子的生物学变化,定量分析,以及实时定量测定等。其不仅可以得到非常清晰的荧光图像,进行多重荧光标记的定位和定量分析,还具有图像三维重建、荧光共振能量转移谱测定,甚至膜电位测定等功能,成为生命科学研究的重要技术手段。
(2)激光共聚焦的局限
随着激光共聚焦技术应用范围的扩大,其在研究中的局限性也逐渐突显。
激光共聚焦技术主要采集的是生物样品内部的离子分子信息,这些离子分子信息的改变既可能源于样品内部离子/分子源的变化,也可能源于样品内外的离子/分子交换。这两种离子/分子变化过程是由完全不同的生命机制引发的。
这要求研究者必须通过其它实验结果,才能得出相对准确的结论。若单纯用激光共聚焦数据作为检测或诊断标准,往往面临较大的假阳性风险。
(3)NMT对比激光共聚焦
相同点: 实时
动态
数据可视化
测定游离的离子
区别: (1)激光共聚焦技术
使用染料和激光光源
需要标记
荧光易发生淬灭
测量时间短
半活体(有损伤)
检测内部的离子浓度变化
测定种类较少,依赖于染料
测量材料不能太大,以细胞为主
只能同时测定一种离子
(2) 非损伤微测技术
使用电极或者传感器
无需标记
电极或者传感器稳定
测量时间可短,可长
近似活体或者完全活体(测定无损伤)
检测跨膜的离子流速以及外部的离子浓度
测定种类多,可测Na+,K+,NO3-,O2等
测量材料不限,从细胞到整体都可以测量
可以同时测定两种离子
结合 共同使用,实现内外兼测
(1)什么是激光共聚焦
激光扫描共聚焦荧光显微镜(laser scanning confocal microscopy, LSCM)是一种利用计算机、激光和图像处理技术获得生物样品三维数据、目前最先进的分子细胞生物学的分析仪器。
主要用于观察活细胞结构及特定分子、离子的生物学变化,定量分析,以及实时定量测定等。其不仅可以得到非常清晰的荧光图像,进行多重荧光标记的定位和定量分析,还具有图像三维重建、荧光共振能量转移谱测定,甚至膜电位测定等功能,成为生命科学研究的重要技术手段。
(2)激光共聚焦的局限
随着激光共聚焦技术应用范围的扩大,其在研究中的局限性也逐渐突显。
激光共聚焦技术主要采集的是生物样品内部的离子分子信息,这些离子分子信息的改变既可能源于样品内部离子/分子源的变化,也可能源于样品内外的离子/分子交换。这两种离子/分子变化过程是由完全不同的生命机制引发的。
这要求研究者必须通过其它实验结果,才能得出相对准确的结论。若单纯用激光共聚焦数据作为检测或诊断标准,往往面临较大的假阳性风险。
(3)NMT对比激光共聚焦
相同点: 实时
动态
数据可视化
测定游离的离子
区别: (1)激光共聚焦技术
使用染料和激光光源
需要标记
荧光易发生淬灭
测量时间短
半活体(有损伤)
检测内部的离子浓度变化
测定种类较少,依赖于染料
测量材料不能太大,以细胞为主
只能同时测定一种离子
(2) 非损伤微测技术
使用电极或者传感器
无需标记
电极或者传感器稳定
测量时间可短,可长
近似活体或者完全活体(测定无损伤)
检测跨膜的离子流速以及外部的离子浓度
测定种类多,可测Na+,K+,NO3-,O2等
测量材料不限,从细胞到整体都可以测量
可以同时测定两种离子
结合 共同使用,实现内外兼测