本申请公开了一种3D打印构建菌丝体活体材料并调控生长行为的方法,通过制备封装了真菌孢子的微凝胶颗粒,形成具有优异流变性能的双相微凝胶生物墨水;该墨水适用于挤出式3D打印,可支持真菌孢子的萌芽和菌丝网络的生长,实现菌丝体自生长行为在空间约束、营养浓度和基质刚度等关键因素上的精准调控。本申请通过设计构建自引导菌丝体生长通道结构,为工程化活体材料的设计与应用提供了创新解决方案,具有广阔的应用前景。