基于可切割自聚集标签的多肽表达纯化方法

01. 成果简介

本项成果提供了一种多肽的合成方法，利用了自聚集短肽诱导目标多肽的聚集，使得生物合成的多肽以沉淀形式保护下来，从而避免降解；然后通过体外切割，获得目标多肽，优化了多肽合成和分离的工艺，操作简便且不受多肽的长度限制，有望为多肽药物的高效制备提供一种解决方案。

具体的，在目标多肽的N端或C端融合一段自聚集短肽，这两者之间采用一个连接肽将两者融合。这个连接肽可以是化学切割、酶切割的识别序列或自切割肽（内含肽）。通过分子克隆，将这三段肽（目标肽、连接肽、自聚集短肽）克隆并转化至表达菌株（如大肠杆菌BL21（DE3））中进行表达。随后通过离心或过滤收获菌体，利用高压、超声波等技术进行细胞破碎；再通过离心或过滤收集不可溶部分（聚集体）；在简单洗涤后，根据所选的连接肽的属性进行切割，如化学切割，蛋白酶切割或诱导自切割；再通过离心或过滤去除不可溶部分，收集上清即可得到粗纯多肽产品。如下图所示：

02. 应用前景

基于本项技术可以合成糖尿病仿制药利拉鲁肽、矮小症仿制药生长激素（hGH）等。

03. 知识产权

相关成果已授权3项中国发明专利及1项美国专利。

04. 团队介绍

团队主要研究领域为合成生物学和生物制药（包括他汀类化学药物和多肽药物），负责人林章凛博士为教授、博士生导师，教育部长江学者，广东省“珠江人才计划”科技领军人才。先后承担973、863、国家重点研发计划专项、国家自然科学基金等科研项目，发表SCI论文50余篇，申请专利20余项。

05. 合作方式

商务合作。

06. 联系方式

lijiaoli2016@tsinghua.edu.cn

biyangxf@scut.edu.cn