一种检测靶核酸序列的方法

一、项目分类

关键核心技术突破

二、技术分析

（1）本技术能够在仅使用一种标记探针(即,检测探针)的情况下，实现对多种靶核酸序列的同时检测(多重检测)。

（2）本技术能够实现对多种靶核酸序列的同时检测(多重检测),并且能够同时检测靶核酸序列的最大数目远远超出了所使用的标记探针(即,检测探针)的数目。

因此，本技术提供了一种简单、高效、低成本的多重检测法。本技术能够检测的靶核酸序列的最大数目不受限于所使用的标记探针(即,检测探针)的数目；能够基于相对有限数目的标记探针(即,检测探针)实现对显著更多数量的靶核酸序列的同时检测(多重检测)，这是特别有利的。

对比国内外同类技术，本技术的优势包括：①标记过程极为方便且成本低。假设同样需要识别15种高危型HPV，已商品化的实时PCR检测试剂盒、已报道的多管实时PCR检测体系、包括实时PCR熔解曲线技术均需要15条荧光探针进行检测。而本技术只需要4条荧光探针就可以完成15种高危型HPV的识别。②熔点温度不会受待检DNA序列的多态性位点或二级结构的影响。传统实时PCR技术和熔解曲线分析技术的检测结果经常会受到荧光探针覆盖区的SNP或二级结构的干扰。而本技术中荧光探针只与标签序列杂交，因此检测获得的熔点温度可以保持恒定。③具备优秀的兼容能力，一个熔点标签库可以适用于不同领域多个对象的检测，而且针对不同的检测对象可以采用相同的检测流程，试剂组份只需要更换杂交探针，设计上只需改动杂交探针的特异杂交序列。这种体系兼容能力大幅度缩短了新体系的研发时间。④判读统一规范，易于在临床应用中推广。目前大部分检测技术针对不同的检测对象需要建立不同的判读标准。而本技术则可以像条形码一样标记不同的检测对象，因此较容易实现自动化判读。