本发明利用增强型绿色荧光蛋白(EGFP)和萤火虫荧光素酶(Fluc-Luciferase)报告基因组成的慢病毒载体感染IPSCs细胞,建立荧光示踪的诱导性多能干细胞,并诱导其分化为胰腺祖细胞,可以在不改变干性表达的情况下,对IPSCs进行示踪,经多次传代后,仍具有良好的生物发光成像能力;同时,不影响其发育为胰腺祖细胞,并且分化后的胰腺祖细胞仍然具有良好的荧光成像及生物发光成像能力。所以,本发明的构建方法能够在诱导性多能干细胞分化为胰岛类器官过程中精准实时监测类器官的分化发育过程,为1型糖尿病的临床治疗提供新的思路和理论依据。
一种可示踪诱导性多能干细胞的构建方法及鉴定
本发明的构建方法能够在诱导性多能干细胞分化为胰岛类器官过程中精准实时监测类器官的分化发育过程,为T1D的临床治疗提供新的思路和理论依据。
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