本发明涉及生物技术领域,具体地,本发明涉及二维培养系统在小鼠肠上皮干细胞体外培养中的应用。本发明提出了一种培养系统。该培养系统用于单层细胞培养,该培养系统包括:基质胶、N2、B27、双抗、GlutaMAX、N‑acetylcysteine、R‑spondin1以及基础培养基,其中,所述基质胶的厚度为5μm~50μm。该培养系统适用于胃肠道的表皮细胞和干细胞的单层细胞的培养,尤其适用于肠道表皮细胞和肠道干细胞的单层细胞的培养。该培养系统可以更加直观的观察胃肠道表皮细胞和干细胞的一系列生化细胞水平的变化,能很好的模拟体内肠道表皮细胞的各项指标,能更加便捷地探索外泌体、炎症因子等对小肠干细胞稳态的影响,提供低成本、高效率的筛药体系。