本发明公开了一种地衣芽孢杆菌分泌的抗菌肽及其制备方法和应用。所述的抗菌肽氨基酸序列为序列表SEQIDNO.1所示,分子量为1290.4道尔顿,等电点5.23。其制备方法是:硫酸铵沉淀培养基中地衣芽孢杆菌分泌的的抗菌肽,利用阴离子交换、分子筛层析和反向高效液相色谱法纯化抗菌肽。该抗菌肽具有显著的抗菌活性,且不会对猪的红细胞产生溶血作用,可用于开发制备饲用抗菌药物。