结合文献调研和数据库检索,选择 L-氨基酸脱氨酶在大肠杆菌中进行异源表达,对菌株进行发酵条件优化和转化条件优化,并对野生型 L-氨基酸脱氨酶进行蛋白质工程改造,一定程度上减轻了产物抑制作用,产量和转化率都有所提高。主要技术指标:湿菌体 15g/L,底物 L-缬氨酸 100 g/L,α-酮异戊酸产量为 95.6 g/L,转化率为 96.4%。
关键技术
(1)以大肠杆菌为宿主,生长快,周期短,催化效率高;
(2)对野生型 L-氨基酸脱氨酶进行蛋白质工程改造,一定程度上减轻了产物抑制作用,产量和转化率都有所提高;
(3)微生物转化具有专一性强、条件温和的优点,该法绿色、环保、可持续,具有经济竞争力,有很好的产业应用前景。
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