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自然界中首例 [6+4] 环加成反应的酶
鉴定首个高阶环加成酶，拓展了环加成酶的认知
一、项目分类
重大科学前沿创新
二、成果简介
南京大学化学化工学院梁勇教授，生命科学学院谭仁祥教授和戈惠明教授的科研团队，发现了抗幽门螺旋杆菌的潜在药物-汉城霉素并对其生物合成途径进行深入研究。通过多菌株基因组序列比对，对汉城霉素类生物合成基因簇进行了鉴定，利用微生物学，分子生物学、底物化学衍生化、体外酶促反应等手段从该基因簇中鉴定出一个新颖、可催化高阶环加成反应的酶。团队基于蛋白质晶体数据，量子化学计算和蛋白质定点突变技术，对该酶促动力学过程进行了深入解析，最终确定该酶通过“双过渡态”来同时催化产生6+4和4+2环加成产物。该特殊高阶环加成酶的发现，解答了“自然界中是否存在酶催化的高阶环加成反应”，这一持续五十余年的谜题。这类酶的发现将进一步拓展人们对周环反应酶的认识，启发科学家们将来利用和改造周环反应酶来实现有价值的分子转化。
成果于2019年4月以Letter形式发表于Nature。F1000评述该研究“鉴定首个高阶环加成酶，拓展了环加成酶的认知”，诺贝奖得主霍夫曼评述“这是在酶促反应中直接观察到的[6+4]环加成产物的首个例子……，该研究对酶促高阶环加成研究具有深远影响”。
南京大学
2022-08-12
重组大肠杆菌生产磷脂酶D及转酯化产品开发
磷脂酶D（PLD,EC 3.1.4.4）是一类广泛存在于各种生物体的酶，具有水解作用和磷酰基转移作用（见图1）。作为一种酶制剂，PLD的转磷脂酰活性尤为重要，被用于制备具有生物活性的稀有磷脂。其中，以大豆磷脂酰胆碱（PC）为底物，PLD酶法制备磷脂酰丝氨酸（PS），受到广泛关注。PS作为脑健康营养补充剂，相继被美国FDA、日本HBM和中国国家卫生计生委所认证，列为新资源食品。相较于提取自牛脑和植物的PS，生物酶法制备的PS，避免了食品安全和植物源含量低的问题。进一步，一些新的结构和功能磷脂，通过PLD转磷脂酰反应被合成出来，例如，磷脂酰鲨肝醇、磷脂酰葡萄糖、心磷脂类似物、磷脂酰酪醇、磷脂酰萜烯和磷脂酰丝氨醇，它们中一些具有抗癌和抗氧化活性。
直到现在，受限于磷脂酶D来源不足和价格高（链霉菌属PLD，≥150 units/mg，6516.9¥/1000 U，Sigma公司），其工业上的广泛应用受到限制。例如，文献报道的PLD最高产量在104-105U·L-1，而制备转化得到每公斤PS，需要2.6×106U的PLD。这一障碍的主要原因是高水平表达的PLD对宿主的严重细胞毒性，导致细胞死亡。
历经5年时间，从上游到下游整体设计，我们解决了毒性蛋白（磷脂酶D，PLD）异源表达难的问题（质粒不稳定、蛋白合成时间短、细胞生长抑制和裂解），PLD生产达到目前世界最高水平106U·L-1(748 mg·L-1)（提高20倍）；同时发展一种简单有效提取重组磷脂酶D的方法（无需破碎、无需添加溶菌酶和有机溶剂、室温进行），PLD生产成本有望降低20倍以上。按照实验室规模的一台5 L发酵罐，年产量可以提供3.5×108U的磷脂酶D，满足100 kg的PS转化需求计算（不计算PLD重复利用率），扩大反应器体积至100-1000 L，PLD产量可满足制备2-20吨PS的需求。
厦门大学
2021-01-12
一种巴斯德毕赤酵母、产生的耐高温酶及应用
本发明提供一种巴斯德毕赤酵母、产生的耐高温蛋白酶及应用，属于微生物技术领域；本发明通过选育一种可产生耐高温酶的巴斯德毕赤酵母(pichia pastoris)AN‑PK‑9K‑GS115，然后将其进行培养，从发酵液中提取耐高温蛋白酶，将其用于羽毛粉的水解，可以有效水解羽毛粉，将其中蛋白质组分高效降解为小肽成分或者氨基酸成分，从而提高蛋白质的消化率，增加采食量，提高动物健康水平。
（注：本项目发布于2019年）
华中农业大学
2021-01-12
固定化磷脂酶A1在制备磷脂DHA中的应用
本发明提供了一种固定化磷脂酶A1在制备磷脂DHA中的应用，具体过程为，六水硝酸钴和2‑甲基咪唑分别溶于无水甲醇得到六水硝酸钴溶液和2‑甲基咪唑溶液，将2‑甲基咪唑溶液滴加至六水硝酸钴溶液中，搅拌反应、静置、干燥，得到ZIF‑67纳米材料，将ZIF‑67纳米材料于磷酸钠缓冲液中混悬，加入磷脂酶A1溶液，调节pH，置于摇床孵育，离心、干燥，获得ZIF‑67纳米材料固定化磷脂酶A1；将游离脂肪酸和大豆卵磷脂组成的底物和固定化磷脂酶A1在有机反应体系中进行催化反应，分离纯化获得磷脂DHA。固定化磷脂酶A1，稳定性好，催化制备磷脂DHA，DHA掺入率高达51.04%。
南京工业大学
2021-01-12
基于固定化酶生产低分子量肝素的新工艺
低分子量肝素(LMWH)是临床上最主要的天然抗凝剂，目前主要是通过动物来源的肝素进行酶降解制得。欧洲药典要求 LMWH 的分子量为 6000~8000，质量控制是生产 LMWH 的重要环节。而肝素酶的活性和利用率直接影响 LMWH 生产成本和产业经济。
本项目组利用融合肝素酶 I (Hep I)与甲壳素之间的亲和作用，实现酶的循环利用，同时融合酶活性和稳定性提高。利用绿色溶剂体系制备形态完好、尺寸均一的甲壳素微球。用固定化酶制备的 LMWH 产品达到欧洲药典要求，实现了分子量可控，生产过程可实时监测。该项目将对 LMWH 产业的绿色和经济生产提供技术支持。目前已发表 SCI 论文 2 篇，并与相关企业开展了合作。
江南大学
2021-04-13
高性能角蛋白酶的高效表达与应用研究
角蛋白酶是一种特异性蛋白酶类，可降解结构复杂、硬质难溶的角蛋白，具有多种优良的催化特性，在生物加工、绿色制药、废弃生物质处理、生物制革、生态纺织、洗涤剂等实际应用中备受关注，被认为是有着巨大应用潜力和市场前景的新一代蛋白酶类。
本项目从角蛋白酶基因挖掘、高效表达、性能改造及其应用研究等方面开展了一系列工作。课题组目前建立了角蛋白酶资源库，是我国拥有角蛋白酶基因资源产权最多和最具多样性来源的单位；实现了角蛋白酶基因在大肠杆菌及枯草芽孢杆菌等外源宿主中的克隆及高效表达；在 5L 罐上发酵酶活最高可达10000 U/mL 以上，是目前文献报道的重组角蛋白酶表达最高水平；项目已完成了 1M3 规模中试试验，成本降低 30%以上。在应用方面，本项目成功将角蛋白酶用于生物法制备纳米银粒子 AgNPs，与传统化学法相比，酶法合成的纳米银具有更好的抑菌活性。另外，项目组已首次开发出无胶原活力的高特异性角蛋白酶，具有高角蛋白活力，不会对皮革胶原造成破坏，能保护胶原结构完整性，可开发出不伤及皮肤真皮的洗涤剂产品、药品及化妆品，在生物制革领域也具有极大应用价值，可缓解制革工业中的烂皮现象；同时本研究所开发的角蛋白酶在活性多肽制备中也表现出良好的应用前景。
江南大学
2021-04-13
通过增大狄拉克半金属约瑟夫森结的几何尺寸将电子输运维数降到拓扑铰链态
近日，南方科技大学量子科学与工程研究院院长、中国科学院院士俞大鹏团队与北京大学、荷兰特文特大学等合作，在狄拉克半金属-超导体异质结量子调控方面取得研究新进展，相关成果以《通过增大狄拉克半金属约瑟夫森结的几何尺寸将电子输运维数降到拓扑铰链态》（“Reducing Electronic Transport Dimension to Topological Hinge States by Increasing Geometry Size of Dirac Semimetal Josephson Junctions”）为题发表在《物理评论快报》（Physical Review Letters）上。
研究团队利用体态、表面态和棱态具有不同超导相干长度的性质特点，通过增长沟道长度，逐步实现从体态到表面态、再到棱态的超导电流的传导。
南方科技大学
2021-04-11
三维打印用的支撑装置以及三维打印方法
本发明公开了一种三维打印用的支撑装置，包括：机架；支撑单元，由多块支撑板拼接组成，布置在三维打印机的三维成型区域的正下方；升降单元，安装在机架上，用于驱动所述支撑板移动到各个所需的支撑位置支撑所要打印的三维模型；本发明还公开了一种三维打印方法；本发明的装置和方法可以代替原有的打印支撑，节省了材料，提高了打印效率，同时支撑部分由外部机械进行替代，优化了原有的打印机算法结构，可控性好。
浙江大学
2021-04-13
全功能三岁儿童护理模拟人三岁儿童护理模型
XM-FT333全功能三岁儿童护理模型
XM-FT333全功能三岁儿童护理人模型是根据三岁儿童解剖特征设计，采用高分子材料制成，皮肤柔软有弹性、关节灵活，可进行男/女性儿童胸腹壁皮肤更换与各种护理操作训练。
一、功能特点：
■ 瞳孔观察示教：一侧瞳孔散大，一侧瞳孔正常直观对比。
■ 气管切开护理、指血采集、TB试验。
■ 气道管理技术：逼真的口、鼻、舌、牙龈、咽、喉、食道、会厌、气管、气管环，可以练习经口气管插管、吸痰、吸氧。
■ 可进行口鼻饲术操作训练。
■ 可进行洗胃术操作训练。
■ 手臂静脉穿刺、注射、输液、输血训练。
■ 肌肉注射练习，包括双侧三角肌、双侧股外侧肌。
■ 骨髓穿刺训练：可经胫骨穿刺，有模拟骨髓流出，可注入模拟药物。
■ 导尿和灌肠：可更换男/女生殖器，可进行男/女导尿术操作，操作成功后可导出模拟尿液。
■ 回肠、直肠、膀胱造瘘口护理。
■ 男性儿童下腹壁皮下注射。
■ 女性儿童右下腹壁创伤护理块（切开伤口、缝合伤口和感染伤口共3块）。
■ 检查肱动脉反映：手捏压力皮球，模拟肱动脉搏动。
■ 四肢关节左右弯曲、旋转、上下活动。
■ 一般护理：皮肤护理、穿换衣服、口腔护理、耳道清洗、包扎训练、更换尿布、冷热疗法等。
二、标准配置：
■ 高级全功能三岁儿童护理模型：1台
■ 护理用物：1套
■ 说明书：1册
■ 保修卡合格证：1张
上海欣曼科教设备有限公司
2021-08-23
三菱背投大屏幕灯泡，三菱灯泡，原装正货
产品详细介绍三菱Mitsubishi 915P028010背投电视大屏幕灯泡
灯泡品牌： 三菱 Mitsubishi
灯泡型号： 915P028010-C
新旧程度： 全新
质保期： 3个月
智诚科技（巴可 科视 威创 GQY 三菱…经销商）
巴可灯泡维修服务站；科视灯泡服务中心.
主营产品：
①投影机灯泡、电影放映机灯泡：巴可barco、科视christie、 威创vtron、三菱、GQY、东芝、日立、松下、DP、PD等；
②大屏配件：科视灯泡、科视滤网、巴可灯泡、巴可滤网、威创DLP灯泡等；
③投影机配件：激光笔、液晶片、激光教鞭、电动升降桌、投影机演示车等；
④投影机：巴可barco、科视christie、三菱、爱普生、日立、夏普等；
⑤电子白板：松下电子白板、鸿合电子白板、SmartBoard等；
⑥投影幕布：白雪\美视幕布、红叶、美视、锐谱幕布、佳美幕布等等。
我公司专业承接巴可 科视 威创 三菱 GQY 东芝 背投大屏幕拼接显示屏墙维护保养、背投大屏幕维修售后服务:
巴可（BARCO）背投大屏幕拼接显示屏墙维护保养、维修服务，承接年保服务，价格优惠、由厂家授权专业工程师上门服务，专人负责。
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威创（vtron）背投大屏幕拼接显示屏墙维护、维修保养服务，承接年保服务，价格优惠、由厂家授权专业工程师上门服务，专人负责。
三菱、GQY、东芝、科视控制室大屏维护/科视背投大屏维修/科视DLP视频监控显示墙维护其它大屏维护保养、维修服务，欢迎来电咨询。
北京智诚普华大屏幕背投维护运营部
联系人：史先生 13718365685
销售电话:+86-10-51653823 Ext 16
巴可大屏背投技术支持与售后服务- TEL:+86-10-5165 3823
北京智诚科技发展中心
2021-08-23