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新型冠状病毒样颗粒的表达研究
研究团队在总结非典病毒疫苗研发经验与教训的基础上,使用最新的mRNA技术,为新冠病毒疫苗研发设计了两套方案(图1)。一种是利用mRNA来表达位于新冠病毒表面的棘突蛋白以及该蛋白上识别人体细胞受体的一段区域,期望能在体内诱导产生病毒中和抗体,目前该方案进展顺利,首批疫苗小样已经用于小鼠免疫,正在等待测试效价。在另一种方案中,研究团队则尝试利用mRNA在体内表达出跟新冠病毒形状一样的空病毒,俗称病毒样颗粒。病毒样颗粒外观和真实病毒无异,但是不带有基因遗传物质,因而没有感染性,人体免疫系统却对其真假难辨,认为是真实病毒入侵,进而启动免疫产生保护性抗体,因此病毒样颗粒被认为是目前最安全有效的疫苗之一。但是使用mRNA让机体合成出病毒样粒却很有挑战,特别是结构复杂的冠状病毒,此前并无用mRNA 合成出冠状病毒样颗粒的报道。利用蓝鹊生物的mRNA药物研发平台,研发团队经过大量的序列摸索与优化,获得了能高效表达新冠病毒四个结构基因的修饰mRNA 分子,首次成功实现了SARS-CoV-2病毒样颗粒的表达。电镜照片(图2)清楚地显示了病毒外壳中由棘突蛋白(S)构成的“皇冠”,这也正是病毒进行细胞侵袭的关键部分,同时也是结合中和抗体真正有效的抗原表位。
复旦大学 2021-04-10
新冠病毒抗体快检试剂盒
复旦大学附属中山医院葛均波院士团队联合研发的“新型冠状病毒(2019-nCoV)IgM 抗体检测试剂盒(胶体金免疫层析法)” 在江苏省医疗器械检验所完成全性能项目检验,符合产品技术要求,成为首批通过法定检测机构检定合格的新型冠状病毒快速检测试剂之一。联合团队已申报科技部国家重点研发计划应急项目,并申报国家药监局应急审批。 复旦大学附属中山医院联合江苏百世诺医疗科技有限公司、泰州市人民医院等机构,针对新冠病毒S蛋白,于2月5日快速研制成功IgM抗体检测试剂。一期已在江苏、重庆、上海等地完成310例临床验证,特异度99.6%,整体诊断符合率达98.1%;即将扩大临床验证。
复旦大学 2021-04-10
新型冠状病毒的基因组序列
2020年2月4日上海复旦大学公共卫生学院张永振团队在《自然》杂志发表了与中国呼吸道疾病爆发相关的病毒的基因组序列,该病毒基因组从就职于出现首批患者的海鲜市场的一名病人身上获得。基因组分析显示,该病毒与此前在中国蝙蝠体内找到的一组SARS样冠状病毒密切相关。 张永振及同事研究了一名41岁的男性海鲜市场工人,其于2019年12月26日在武汉一家医院住院,表现出呼吸系统疾病症状,包括发烧、胸闷和咳嗽。联合使用抗生素、抗病毒药和糖皮质激素进行治疗,但患者表现出呼吸衰竭,治疗三天后病情无改善。团队对从患者收集的支气管肺泡灌洗液(肺分泌物)进行了基因组测序。他们鉴定出了一种新型病毒,并发现该病毒基因组与蝙蝠体内发现的SARS样冠状病毒有89.1%的核苷酸相似性。尽管从单个患者的分析中不可能得出该冠状病毒是当前疫情爆发原因的结论,不过团队的这些发现已被针对其他患者的独立调查研究证实。 
复旦大学 2021-04-10
新型冠状病毒肺炎病例毒株分离
上海市疾病预防控制中心和复旦大学上海医学院基础医学院新型冠状病毒攻关团队密切配合,由上海市疾病预防控制中心挑选多例确认病例的鼻/咽拭子样本用于实验,复旦大学上海医学院基础医学院新型冠状病毒攻关团队通过使用两种细胞系(vero-E6和Huh7细胞)接种样本,从一例病例样本中,于2020年2月7日成功分离并鉴定出新型冠状病毒(2019-nCoV)毒株,该毒株在细胞培养中扩增迅速,可得到较高滴度的病毒;间接免疫荧光法发现病毒感染细胞显示典型冠状病毒样病变-合胞体。
复旦大学 2021-04-10
新型冠状病毒快速诊断试剂盒
华东师范大学生命科学学院生物医学团队成功制备新型冠状病毒(2019-nCoV)快速诊断试剂盒,仅需一滴血十分钟就可以出检测结果,该试剂盒目前已交付浙江大学医学院附属第一医院,开展对疑似感染者、密切接触者、确诊病例的临床验证。 团队筛选出多个新冠病毒的优势抗原表位肽,并基于抗原表位肽开发出了灵敏性高、一致性好的IgG/IgM抗体诊断试剂盒。这款检测试剂盒操作便捷,仅需“一滴血,十分钟”就可以出检测结果,目前已经免费交付医院对疑似感染者、密切接触者、确诊病例进行扩大样本量的临床测试。 该团队利用噬菌体展示技术构建康复病人抗体库,筛选治疗性中和抗体,截止目前已经筛选到多株可以和病毒蛋白特异性结合的全人源抗体,接下来要在传染病诊治国家重点实验室P3实验室评估抗体阻断病毒进入细胞的中和活性。
华东师范大学 2021-04-10
新冠病毒抗体快检试剂盒
复旦大学附属中山医院葛均波院士团队联合研发的“新型冠状病毒(2019-nCoV)IgM 抗体检测试剂盒(胶体金免疫层析法)” 在江苏省医疗器械检验所完成全性能项目检验,符合产品技术要求,成为首批通过法定检测机构检定合格的新型冠状病毒快速检测试剂之一。联合团队已申报科技部国家重点研发计划应急项目,并申报国家药监局应急审批。 复旦大学附属中山医院联合江苏百世诺医疗科技有限公司、泰州市人民医院等机构,针对新冠病毒S蛋白,于2月5日快速研制成功IgM抗体检测试剂。一期已在江苏、重庆、上海等地完成310例临床验证,特异度99.6%,整体诊断符合率达98.1%;即将扩大临床验证。
复旦大学 2021-04-10
新冠病毒快速检测试剂盒
新型冠状病毒感染的肺炎疫情发生以来,山东大学王传新教授联合山东师范大学、潍坊康华生物技术有限公司成立联合研发团队,与时间赛跑,全力攻关,研发新型冠状病毒IgM抗体检测试剂盒和新型冠状病毒抗原检测试剂盒,目前已成功研发出新型冠状病毒(2019-nCoV)IgM抗体检测试剂盒(胶体金法和免疫层析法),最快3分钟内即可出结果,用于检测新冠病毒核心抗原的高灵敏试剂盒等也在陆续研发中。IgM抗体是病毒感染自体免疫过程中最早出现的抗体,是近期感染的标志。山东大学领衔的联合研发攻关团队所研发的新型冠状病毒(2019-nCoV)IgM抗体检测试剂盒能够为核酸检测提供有效补充。
山东大学 2021-04-10
新冠病毒核酸检测试剂盒
四川大学华西医院实验医学科应斌武教授带领的临床团队,与柯博文教授、耿佳教授科研团队紧密合作,联合攻关,成功自主研发了。RT-PCR试剂盒已经完成临床样本检测470例(阳性14例,阴性456例),IgG/IgM抗体联合检测试剂盒已经完成临床样本检测40例(阳性15例,阴性25例),结果均达到国家卫健委疾病预防控制局最新发布的《新型冠状病毒感染的肺炎实验室检测技术指南》等相关检测标准。RT-PCR检测试剂盒以新型冠状病毒ORFIab基因和N基因中的保守序列为靶位点设计特异性引物和寡核苷酸荧光探针,对病毒核酸进行高特异性检测,能够排除其他冠状病毒株的非特异性干扰,检测灵敏度达到200 拷贝/毫升。该产品创新性构建了防污染系统,有效降低了产物气溶胶的污染。同时以假病毒为阳性对照,以人类看家基因为内标,对检测过程进行全面监控,进一步提高了产品的抗干扰能力。
四川大学 2021-04-10
新型冠状病毒检测试剂盒
福州大学生物科学与工程学院自主研发出新型冠状病毒检测试剂盒,并与泰普生物科学(中国)有限公司合作,迅速实现产学研转化。目前,该产品筹备批量生产,并通过快速通道申报“国家第三类医疗器械证书”。2019年12月底,福州大学生物科学与工程学院林峻博士团队已经在关注并介入相关课题研究。在2020年1月13日之前,该研发团队已经完成该病毒快速检测技术体系的开发。福州大学亦是国内外首批完成该工作的机构之一。此次研发的试剂盒具有以下特点:符合国家卫健委疾病预防控制局最新发布的《新型冠状病毒感染的肺炎实验室检测技术指南》,对病毒的多重靶点进行检测,拒绝漏检,灵敏度高;一步法操作,耗时短,步骤简便;具备严格的质量控制等。“第三类医疗器械”,我国法规对生产企业具有非常严格的资质要求和质量管理体系要求。为了实现产学研的快速转化,福州大学科研团队积极走出校门,依托于泰普生物科学(中国)有限公司的生产技术平台,该公司在征得有关部门的许可后,将迅速生产符合国家法规规范、质量严格、能真正服务于社会、支持一线医疗工作的产品。
福州大学 2021-04-10
新型冠状病毒蛋白质组芯片
截止到2020年3月3日11时23分,我国累计已有新冠肺炎病例80302例,死亡2947人。我国的疫情防控已渐渐向好,但其它多个国家的疫情则呈快速上升和爆发趋势,引起了强烈关注,世界卫生组织总干事谭德赛28日在日内瓦宣布将新冠肺炎疫情全球风险级别由此前的高上调至非常高。基于流行病学数据,多名国内外专家预计新冠肺炎可能会长期流行。为了实现最终的有效防控,新冠肺炎的基础研究必须要迅速得到加强,其中尤为重要的两个方面是:1.对新冠肺炎康复人员血清中病毒特异性抗体的系统性分析;2.对病原-宿主相互作用的全局性研究。通过这些研究将可提供全面的免疫响应数据及提示病毒蛋白质的功能,为疫苗研发、中和抗体制备以及药物靶点的确定提供重要线索,进而加速新冠肺炎关键研究的进程。系统性的分析需要强力工具,包含新型冠状病毒(SARS-CoV-2)绝大多少甚至所有蛋白质的蛋白质组芯片是一个极佳的选项。据BioArt独家消息,上海交通大学系统生物医学研究院陶生策团队传来好消息。该团队对新型冠状病毒的全部27个预测的基因进行了密码子优化,并通过全基因合成得到了一套完整的表达克隆。经过多轮优化,到目前为止已成功表达纯化了其中的17个蛋白质,同时整合其他来源,该团队最终获得了20个新型冠状病毒的蛋白质。在此基础上于3月2日14时14分完成了首款新型冠状病毒蛋白质组芯片的构建(图1)。图1. 新型冠状病毒蛋白质组芯片。A. 芯片整体质控。一张芯片上有14个相同的点阵,可最多用于14个样本的同步分析;B. 点阵中蛋白质的排布;C. 实际样本的初步测试结果。新型冠状病毒蛋白质组芯片对于深入研究病毒-宿主相互作用、病人的病毒特异性血清反应、疫苗效果等具有重要价值。该团队将秉持开放的心态,积极地与相关科研团队和科技企业合作,争取在最短的时间内最大程度地发挥蛋白质组芯片的高通量全局性分析优势,以期对疫情防控有所帮助。该芯片的主要应用点包括但不限于:1. 血清学分析。采用该芯片分析病人和康复人员血清或血浆,可全面地研究新型冠状病毒引发的病毒特异性抗体响应及其动态变化,将帮助我们理解机体的免疫响应过程,发现病毒的优势蛋白抗原,对确定哪些康复人员的血浆有更好的保护效果可能也会有帮助。2. 疫苗评估。疫苗的作用是预先建立免疫防御能力。无论是动物实验或是临床试验,动态监控疫苗注射后血清中针对各种蛋白组分的抗体水平,并将其与防御能力进行关联分析,将助力疫苗的筛选和前期评估,加速疫苗的开发进程。3. 病毒-宿主相互作用研究。利用该芯片可在全局水平上进行宿主关键蛋白与病毒蛋白质相互作用研究、翻译后修饰调控研究,以助力对病毒侵染、复制合成等关键机制的揭示,并给出有潜力的靶蛋白用于药物开发研究。该团队积极响应国家号召,把研究成果第一时间公开,希望能有助于疫情防控,详细数据和进一步结果将会在近期发布。
上海交通大学 2021-04-10
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