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一种新的探针制备方法
01. 成果简介 荧光原位杂交(Fluorescence in situ hybridization,FISH)是一种以荧光标记取代同位素标记而形成的新的原位杂交方法。其通过杂交探针序列及其荧光,能提供标记位点在细胞核内的空间位置信息,与基于染色质构象捕获(Chromatin Conformation Capture,3C)等各种生物技术(如4C,5C,HiC,ChIA-PET等)互补,成为研究染色质结构不可或缺的重要技术之一。 传统的荧光原位杂交技术一般以含有目标物种来源的一段完整基因组片段作为模板,通过生物酶的作用进行片段化,之后进行荧光标记做出杂交探针,再固定细胞中,通过碱基互补配对原理对特定的基因组片段进行荧光标记并成像,获得具体的核内空间信息。但是,传统的原位杂交技术受限于模板本身的特性,具有准备时间长、所需模板量大、基因分辨率低、克隆中含有重复片段、需要加入物种特异的Cot-1DNA等缺点。尤其是其分辨率低的特点(分辨率在百kb的数量级),让它在应用中受到了很大的限制。 本项成果提供了一种新的针对目标核酸靶标探针的制备方法(见图1),该方法比传统的FISH技术的分辨率提高了1-2个数量级(见图2),可应用于传统荧光原位杂交因分辨率不够而不能探测、或者被错误探测的地方。该成果的具体步骤(见图1)包括:(1)获取感兴趣的靶DNA序列;(2)使用转座酶将靶DNA序列进行片段化的同时,在片段化的DNA序列两端加上接头序列;和(3)利用所述接头序列,获取所述片段化的DNA序列,以产生探针。本项成果的技术优势在于:快速高效、模板需求量低、基因组分辨率高、且不需要Cot-1DNA。 图1 探针制备方法的具体步骤。 02.应用前景 本项成果是一种快速高效、模板需求量低、基因组分辨率高、且不需要Cot-1DNA的荧光原位杂交方法,可作为现有的传统荧光原位杂交技术的可选替代方案。尤其是该方法的分辨率高,比传统的FISH技术的分辨率高1-2个数量级(见图2),因此可应用于传统荧光原位杂交因分辨率不够而不能探测、或者被错误探测的很多地方。 例如,在基因组的三维结构中,TAD(拓扑结构域)是结构和功能的基本单元。TAD内部和TAD之间的增强子和启动子发生的错误的相互作用,是一些癌症发生的根本原因。而传统的FISH技术因为分辨率的限制,探测不到这些错误的相互作用。因此本项成果在临床有着广泛的应用,可以用于癌症及一些其它疾病的极早期检测。 图2  相比于传统的BAC FISH(图上方绿条,长度为152kb),仅用1.170 kb(红条)长的TN5探针,就可以得到要标记的基因组位点的图像。 图中细胞核(蓝色)中,红色和绿色的点相互重叠,说明Tn5 FISH可以用传统的BAC FISH进行验证。黄色箭头表示用Tn5 FISH(红色通道,左上角插入图)或BAC- FISH(绿色通道,左下角插入图)进行成像。图中比例尺为5μm。03. 知识产权 本项成果已申请1项国内发明专利,目前正在申请国际专利。04. 团队介绍 本项目团队负责人为清华大学教授、博士生导师,国家首批千人。团队的主要研究方向涉及:生物信息学和基因组三维结构新方法的开发,利用细胞超分辨率成像、分子成像和生物信息学的方法进行基因组三维结构和系统生物学的研究选。团队负责人曾多次主持或参与美国NIH的R01科研项目、中国国家自然科学基金及科技部的科研项目,已发表高水平学术论文200余篇。05. 合作方式 专利许可、合作开发。06. 联系方式 邮箱:zhangxinrui@tsinghua.edu.cn
清华大学 2021-04-13
一种薄膜制备装置(未授权)
西南大学 2021-04-13
桑柏生发搽剂及其制备方法
【发 明 人】吴承艳;吴承玉 【技术领域】  本发明涉及一种治疗脱发病的搽涂的外用药水,特别是一种用医用酒精浸泡中药的用于治疗脱发而有利于生发的外用搽剂。 【摘要】  本发明的桑柏生发搽剂,其有效成分的原料中的主要药物成分为冬桑叶和黄柏,故称桑柏生发搽剂,辅以蔓荆子、升麻、旱莲草和地肤子等中草药,用医用酒精浸泡后进行过滤而得到的清澈透明的药液即为本发明的桑柏生发搽剂。具有配方科学、疗效显著、使用方便、价格便宜、无毒副作用等优点,使用时,用药棉沾搽剂在脱发处反复搽涂,每天2~3次,一般4天后即能见毛孔凸起,新发逐渐长出,且能消脂、祛屑、止痒,更能控制复发。
南京中医药大学 2021-04-13
易染抗菌粘胶纤维制备技术
易染抗菌改性粘胶纤维,用直接染料、活性染料等染色,具有良好的上染率和固色率,几乎不产生染色 废水。用此改性纤维制备的织物染色后,织物皂洗牢度、摩擦牢度等都非常高。同时,改性粘胶纤维制备的 织物还具有良好的抗菌性能。易染抗菌改性粘胶纤维改性工艺流程短、改性效果好,适宜制备高档粘胶面料。
西南大学 2021-04-13
高含量石斛多糖速溶粉提取制备
北京工业大学 2021-04-14
镧钼热阴极材料及制备技术
北京工业大学 2021-04-14
等离子体石墨烯宏量制备
相比于常见的石墨烯合成工艺,电弧等离子体合成石墨烯具有反应连续、工艺简单、无催化剂;化学选择性好,综合能耗低;制备的石墨烯纯度高、缺陷少,且具有高度发达的“褶皱结构”,在复合材料、储能器件等领域具有巨大应用前景。因此,电弧等离子体法有利于实现低成本、高品质石墨烯的宏量制备。 
中国科学技术大学 2021-04-14
高性能压电材料制备技术及其应用
内容介绍: 本项目在研究压电材料各向异性和微结构相图基础上,针对钙钛矿结 构压电陶瓷和有机压电聚合物,釆用独特工艺,制备了高性能低成本压 电陶瓷,实现了新型陶瓷成分设计、微结构表征和性能优化;结合第一 性原理密度泛函方法,建立了高性能有机压电聚合物的组织设计、结构 调控、性能分析的理论和准则。
西北工业大学 2021-04-14
环状碳酸酯的制备新工艺
基于人们对资源和环境问题的关注及实现可持续发展的社会需求,以消除污染、合理利用资源、实现可持续发展为目标的绿色化学已成为当前化学研究的热点和前沿。 二氧化碳作为一种典型的可再生资源,具有无毒、无腐蚀性、阻燃、化学惰性、大量存在于自然界中等特点和无溶剂残留而且对环境友好等优点;同时它也是一种温室气体,对它的资源化利用,还可以减轻环境负荷。回收再利用的二氧化碳主要用于生产基本化工原料及具有应用价值的绿色化工产品。目前,每年大约有110 MT(百万吨) 的二氧化碳用于化工产品的合成,如碳酸
南开大学 2021-04-14
酶水解蚕蛹蛋白制备免疫活性多肽
研究内容 :本研究采用复合酶法水解蚕蛹蛋白制备免疫调节活性多 肽,得到最佳的水解工艺条件。在最佳水解条件下,酶解后蛋白质得率为 57.24%,小分子多肽得率为 32.16%。该结果达到了计划指标,即蛋白质 得率>40%,小分子多肽得率 >20%。另外,本研究探讨了水解条件与分子 量大小,分子量大小与免疫调节活性的关系,同时建立了毛细管凝胶电泳 测定蚕蛹多肽分子的检测方法。 技术特点 :本研究
南昌大学 2021-04-14
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