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一种研究活细胞内蛋白质互作的新方法
蛋白质之间的相互作用对生命活动至关重要。尽管已有不少体内研究蛋白互作的方法,但由于许多蛋白互作是高度动态的,因此用传统的方法难以捕获。本研究基于“招募”和“聚集”的原理,即将“诱饵”蛋白A锚定在线粒体的外膜上,如B蛋白能与A蛋白互作,则将被“捕获”到线粒体外膜,发生富集;如C蛋白不与A蛋互作,则不会发生定位变化(图1)。文章首先用线粒体锚定(Mito-docking)的方法有效验证了G蛋白亚基γ2和β1间的互作,并进一步运用该方法研究了核转运受体(importinαisoforms)与货物蛋白(经典的核定位信号cNLS)之间的互作,揭示了核转运受体-货物蛋白的识别特异性
武汉大学 2021-04-10
一种用于刺吸式小型昆虫内共生菌灭活的饲喂装置
本实用新型涉及一种用于刺吸式小型昆虫内共生菌灭活的饲喂装置。该装置包括自上而下依次设置的盖体结构、培养容器和通气结构;所述盖体结构包括顶盖和设置在所述顶盖的下侧面的饲喂液腔;饲喂液腔的底面为PTFE滤膜;所述培养容器为两端开口的圆筒形结构。本实用新型所述用于刺吸式小型昆虫内共生菌灭活的饲喂装置,结构简单,成本低廉,易于操作,同时有效降低刺吸式昆虫的死亡率。
青岛农业大学 2021-04-11
纳米磁性载体用于新型冠状病毒核酸检测试剂
上海交通大学生物医学工程学院古宏晨教授、徐宏研究员团队历经数年研制并实现产业化的纳米磁性载体,为国内首个新型冠状病毒检测盒出炉提供了有力技术支撑。该技术可实现新型冠状病毒核酸的全自动、全封闭、高灵敏地检测,已应用于上海之江生物科技股份有限公司研发的新型冠状病毒2019-nCoV核酸检测试剂盒(荧光PCR法)。2020年1月24日,该检测试剂盒通过了上海市医疗器械检测所的检验,成为我国法定检验机构检定合格的首个新型冠状病毒检测产品,并在各地医院、疾控中心和出入境检验检疫局实际应用。
上海交通大学 2021-04-10
创制转基因技术中带有安全筛选标记的安全转化载体
选择标记转基因作物已成为近年来植物基因工程技术研究的重 点之一,随着转基因作物产品的商品化,转基因植物的生物安全性受 到公众越来越多的关注,尤其是目前抗生素标记基因在植物遗传转化 过程中的广泛应用,使人们对这些标记基因可能带来的潜在危害性心 存疑虑,抗性标记基因的存在严重地阻碍了转基因植物的商品化进程 和转化技术本身的有效性。 本项目培育的无抗生素标记基因(可视化标记基因)在建立高效、 安全、规模化的转基因作物技术体系方面取得突破,以紫色幼芽作为 沙 门 屎 肠 副溶血弧 霍 乱 小 肠 结 肠 亲水气单 粪 肠 金 黄 色 肺炎克雷 钩端螺 嗜 肺 军 志 贺 绿 脓可视筛选标记代替抗生素筛选标记,构建了新型转化载体并应用于作 物,已申请 2 项发明专利。
南开大学 2021-04-13
基于CRISPR/Cas9基因编辑系统的载体组合及其应用
01.成果简介 CRISPR/Cas9是细菌在长期演化过程中形成的一种适应性免疫防御系统。其工作原理是crRNA通过碱基配对与tracrRNA结合形成tracrRNA/crRNA复合物,此复合物引导核酸酶cas9蛋白在与crRNA配对的序列靶位点剪切双链DNA。经过研究,通过人工设计tracrRNA/crRNA,改造形成具有引导作用的sgRNA,可以引导Cas9蛋白在多种细胞的特定基因组位点上进行切割、修饰,并最终实现基因突变、插入或缺失。因此,CRISPR/Cas9系统已经被广泛应用于基因编辑技术领域。 近年来,CRISPR/Cas9基因编辑系统在真核生物和原核生物中得到了广泛的应用。在大肠杆菌等革兰氏阴性菌中,用一个载体表达cas9基因,同时由于革兰氏阴性菌重组效率低,需要在这个载体上表达λ-RED重组酶;在另一个载体中表达sgRNA和用于同源重组的同源臂序列。两个载体都转入大肠杆菌中时,sgRNA介导Cas9蛋白切割基因组上特定序列,形成双链断裂,刺激同源重组的发生,从而实现基因编辑。 本项成果构建了适用于盐单胞菌的基于CRISPR/Cas9的基因编辑系统。该系统由两个载体组成:第一个载体表达Cas9基因,且不需要表达λ-RED重组酶,实际操作中不再需要诱导λ-RED重组酶的表达,简化了步骤流程;第二个载体表达sgRNA,并含有用于同源重组的同源臂序列。从而实现了基因编辑。本项成果的技术优势包括: (1)基因编辑时间由原有的20余天缩短到7-8天; (2)N个基因编辑时间由原有的N个月缩短到3+5N天; (3)无需表达λ-RED重组酶。                        图1 盐单胞菌TD01进行基因编辑的流程示意图02.应用前景 本项成果可作为CRISPR/Cas9基因编辑系统的载体,广泛应用于基因编辑领域。03.知识产权 本项成果已申请1项发明专利。04.团队介绍 本项目为多团队合作项目,其中一个团队的负责人为清华大学教授,博士生导师,长江学者特聘教授,国家杰出青年基金获得者。主要研究方向为合成生物学、微生物代谢工程、生物材料、工业生物技术。已发表国内外高水平学术论文数十篇,申请专利70余项。05.合作方式 投融资。06.联系方式邮箱:zhangxinrui@tsinghua.edu.cn
清华大学 2021-04-13
创制转基因技术中带有安全筛选标记的安全转化载体
选择标记转基因作物已成为近年来植物基因工程技术研究的重点之一,随着转基因作物产品的商品化,转基因植物的生物安全性受到公众越来越多的关注,尤其是目前抗生素标记基因在植物遗传转化过程中的广泛应用,使人们对这些标记基因可能带来的潜在危害性心存疑虑,抗性标记基因的存在严重地阻碍了转基因植物的商品化进程和转化技术本身的有效性。 本项目培育的无抗生素标记基因(可视化标记基因)在建立高效、安全、规模化的转基因作物技术体系方面取得突破,以紫色幼芽作为可视筛选标记代替抗生素筛选标记,构建了新型转化载体
南开大学 2021-04-14
可增强流感疫苗有效性的仿生纳米颗粒
研究团队基于cGAMP设计制备了一种肺部仿生纳米颗粒(PS-GAMP)来模拟流感病毒肺部感染,发现其能够在不破坏肺部表面活性剂(PS)和肺泡上皮屏障(AEC)的情况下,激活AMs和AECs,促进疫苗产生高效的体液和CD8+ T细胞保护性免疫反应,以抵抗多种异型流感病毒的攻击。研究结果提示AECs在产生广泛的交叉保护以抵御各种流感病毒方面具有十分重要的作用,表明PS-GAMP可能是一种“通用”流感疫苗的潜在粘膜佐剂。
复旦大学 2021-04-10
O型口蹄疫VP1基因的多价混合DNA疫苗
各种病毒性疫病在世界各地 不断爆发,造成了惨重的损失, 并对人类健康造成了严重威胁。 由于病毒的快速变异,一般的疫 苗会丧失保护作用。
中山大学 2021-04-10
定向改造大肠杆菌类脂 A 生产疫苗佐剂 MPL
细菌脂多糖可刺激宿主免疫系统产生免疫反应,可利用这一性质开发既无毒性又能刺激免疫系统的类脂 A 分子疫苗佐剂。近年美国 Corixa 公司已开发出可用于乙肝病毒疫苗和过敏治疗的单磷酸类脂 A(MPL)疫苗佐剂。目前 MPL 生产方法是从沙门氏菌的突变株中提取类脂 A 并加以化学处理。本项目根据类脂 A 分 子的合成机理,通过基因工程技术将 pagL、lpxE 和 pagP 单启动子串联共表达,将大肠杆菌中类脂 A 的结构改造成为 MPL,菌株稳定性好,生产方法简单高效。
江南大学 2021-04-11
改造类脂 A 结构用于安全宿主菌构建及疫苗佐剂生产
类脂 A 是脂多糖分子的疏水基团,大量存在于革兰氏阴性细菌的外膜外层,能通过结合免疫细胞表面的受体 TLR4 来刺激人体免疫系统[50, 51],因而也是一种很好的免疫系统激活因子。美国 Corexa 公司已经开发出了可用于乙肝病毒疫苗和过敏治疗的疫苗佐剂 MPL。研究表明 MPL 刺激的免疫细胞中 IL-1β 的分泌量 显著降低,使得 MPL 的毒性降低但免疫活性还在。MPL 目前是通过从沙门氏菌的 突变株 Salmonella minnesota RC595 中提取类脂 A,然后用化学方法去除其多余的附加基团而得到。本项目拟利用这些类脂 A 修饰酶,根据类脂 A 分子的合成机理,通过基因工程技术将大肠杆菌中类脂 A 的结构改造成为 MPL,构建能合成 MPL 的大肠杆菌。这种新型的能合成 MPL 的大肠杆菌不仅可以作为宿主菌安全使用于食品和药物的发酵工业生产中,而且可以作为实验室研究中更安全的基因表达载体,最重要的是它可以直接用来生产类脂 A 疫苗佐剂 MPL
江南大学 2021-04-11
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