本技术首先根据鸭胸软骨的化学组成设计了一种用于提取鸭硫 酸软骨素的新型复合蛋白酶的基础配方，并利用复配酶制备鸭硫酸软骨素，其 工艺包括鸭胸软骨骨粉的制备、鸭胸软骨骨粉的酶解提取、蛋白质的沉降、硫 酸软骨素粉末四个步骤。本发明采用了复配酶解法提取鸭胸软骨的硫酸软骨素， 采用新型复合蛋白酶和胰蛋白酶复配，去掉了碱提这一步，在复配酶使用上也 进行了优化，其收率比其它方法提高了 20%左右，产品纯度达到 90%~95%。用复 合酶代替稀碱或浓碱解离软骨能够大大降低对环境的污染，并且可以有效缩短 生产周期、降低生产成本、增加了产品收率、提高产品质量，填补了该领域的 空白。 技术优点或者效益预测:硫酸软骨素(Chondroitinsulfate，CS)是 D-葡萄糖 醛酸和 N-乙酰氨基半乳糖以β-1,4-糖苷键连接而成的重复二糖单位组成的酸 性黏多糖。硫酸软骨素具有抗凝血、抗炎症、抗肿瘤、抗病毒、抗氧化、降血 脂、防止动脉粥样硬化、调节体内水分、清除自由基和延缓衰老等多种生理功 能，可应用于食品、药品、各种保健品及高档化妆品中。我国是全球硫酸软骨 素产量最大的国家，占全球产量的 80%以上，年平均产量多于 4000 吨；我国硫 酸软骨素主要出口到美国、欧洲、日本等地，其中美国作为我国硫酸软骨素第 一大出口市场，出口份额约占 50%。所以，随着硫酸软骨素生物活性功能不断研 究及其应用领域的不断扩展，硫酸软骨素用途越来越广，具有广阔市场应用前 景。

研究人员运用生物信息学分析叠加肝癌队列标本验证证实CACYBP在肝癌组织中高表达，且高表达CACYBP的肝癌病人总生存时间及无疾病进展时间更短，预后更差；而通过体外细胞实验及小鼠模型发现缺失CACYBP的肝癌细胞株在体内和体外的生长增殖能力显著减弱。为了研究CACYBP调控肝癌生长的分子机制，研究人员利用串联亲和纯化连用质谱技术，首次鉴定出环指蛋白41（RNF41）与CACYBP相互作用，并通过泛素化实验及放线菌酮追踪检测证实RNF41为CACYBP上游特异的E3泛素连接酶，在肝癌细胞中促进CACYBP的降解，且两者在肝癌组织中的表达呈显著负相关。进一步研究发现，CACYBP促进Ser10磷酸化使P27Kip1存留在胞浆中，从而加速细胞周期，促进肝癌细胞生长增殖，而RNF41对这一过程具有抑制作用。       该研究结合生物信息学分析、肝癌队列标本、细胞功能及分子机制验证，一方面揭示了CACYBP促进肝癌生长增殖的上下游分子机制，另一方面为开发新型肝癌诊疗靶点提供了理论依据。

本发明涉及分子微生物学领域，具体的说是一种C型凝集素(C-type?lectin)及其制备和应用。C型凝集素为序列表SEQ?ID?No.1中的氨基酸序列所示。制备方法：以许氏平鮋cDNA为模板PCR扩增C型凝集素基因，构建质粒pLecC；将pLecC转化大肠杆菌BL21Transetta(DE3)，对转化子进行诱导表达后，收集上清，浓缩后即得重组C型凝集素。所述C型凝集素对多种弧菌具高效凝集作用，经C型凝集素处理后的细菌对许氏平鮋的侵染能力显著降低。因此，该C型凝集素有望应用于鱼类细菌性病害的防治。

Mpa六聚体除了与真核生物蛋白酶体调节颗粒Rpt1-Rpt6蛋白六聚体以及古细菌PAN蛋白六聚体具有一定的结构同源性之外，还具有一些明显不同的结构特征：（1）结核杆菌Mpa具有形成双环的两个串联寡核苷酸/寡糖结合（OB）结构域，而古细菌蛋白酶体相关ATPase调控颗粒（PAN）和真核生物蛋白酶体ATPase调控颗粒复合体（Rpt1-6）每个蛋白亚基都只具有单个OB结构域；（2）Mpa在具有蛋白酶体活化功能的C末端之前具有一个泛素样的β-grasp结构域，而古细菌PAN和真核生物Rpt1-6蛋白复合体并不具有这样的一个β-grasp结构域 由于β-grasp结构域的存在，Mpa六聚体中各个蛋白亚基C末端被埋在结构核心中而没有暴露在蛋白复合体结构的表面，这就影响了C末端的GQYL基序与20S 蛋白酶体复合体的对接，从而阻碍了六聚化的Mpa与七次对称的28聚体的蛋白酶体相互作用。我们通过功能研究进一步解释了为什么单独的Mpa六聚体在体外情况下不能有效结合蛋白酶体核心颗粒并启动蛋白质特异性降解，结合晶体结构域功能研究，我们提出了结核杆菌蛋白酶体ATPase调控颗粒Mpa与20S蛋白酶体复合体这一分子量超过1100KDa蛋白质机器的作用模型

真菌疏水蛋白具有自我装配成膜的性质，因此 （1）疏水蛋白可作为蛋白和细胞固定化的媒介，可用于生物传感器和生物芯片，作为引发层，交联上配体或形成融合蛋白，能使特定分子固定化到特定表面。 （2）它能改变表面的属性，保护表面。可用于提高医学器官移植物生物相容性和防止微生物细胞粘附；可应用于医药行业中烧伤、创伤的创面保护，为临床病人创面保护和恢复提供一种安全无毒、操作简便、高效低耗的新手段。 （3）作为一种生物表面活性剂，疏水蛋白还可以用于促进土壤中的污染物的降解和应用在石油泄漏后回收石油的过程中。 （4）疏水蛋白具有表面活性，可用于食品对抗相变能力并形成稳定泡沫，使其在密封食品生产上发挥重要作用； （5）也可用于日用化妆品生产中，因疏水蛋白可以作为洗洁产品的成分，根据其疏水、亲水两相间的转变，可通过自我装配而将面部的油脂等疏水的成分包裹起来，再用水清洗将其除去，也可以作为保护秀发的天然膜，使发部维持清洁并保持一定水分；将它运用到面部的美容护理，由于它的特性，能使皮肤表面形成一层天然生物活性保护膜，起到皮肤保湿、免受外界空气中污浊物的侵害，从而达到护肤美容之功效。 （6）疏水蛋白直接包裹药物以改变药物溶解性并实现控、缓释。通过真菌疏水蛋白与难溶于水的药物混合，可以达到良好的分散效果，并延长了两种药物的药效持续时间。 （7）真菌疏水蛋白与其他的功能性蛋白或小肽组成融合蛋白，同时发挥疏水蛋白的稳定吸附材料表面的特性和功能性蛋白或小肽的特异性功能，如在组织工程、抗炎抗菌材料等。 项目特色： 纯天然生物制品，无毒害，无污染。耐酸碱，抗相变能力强。自我装配形成有活性的蛋白膜。具有良好的热稳定性和透气不透水性。由于它的特性，使得它具有：（1）自动成膜，无需贴敷，使用便利；（2）透气性优良；(3)纯天然无化学添加成分，瑞氏木霉已被证明是安全的菌种；（4）组织相容性好，避免了严重的排异反应；（5）耐高温（100 摄氏度仍保持活性），易于消毒；（6）稳定不降解，便于产品的长期保存；（7）用表面活性剂就可以很容易地清洗（8）延展性好，1 毫克的疏水蛋白在液面就可以展开 1 平方米的薄膜（9）透明，可直接透过成膜观察（10）性价比高。 市场应用前景： 目前国际上尚未实现疏水蛋白的工业化生产，其相关应用产品的开发更为滞后。我们在已实现疏水蛋白中试研发的基础上，扩大发酵规模，进行后续产品的开发，我们的技术和工艺现居国际领先地位，无疑会占有宝贵的先机。 疏水蛋白产品将作为新一代膜生物活性材料进入市场，它的出现将会革命性地取代现有化学产品，这无疑给人类的健康带来了很大的益处，消除人类在预防和治疗疾病、食品加工、以及医学检测、食物保鲜方面为健康做出努力的同时给自身带来的潜在危害，而且价格更为低廉。因此，本项目大规模生产疏水蛋白及其应用开发是有非常广阔的市场前景的，并且我们的技术在国际和国内市场处于领先地位。这些产品都将在国际市场上处于最优竞争状态。

本发明公开一种基于铝的用于烷基化反应的催化剂的制备方法。该方法是先将具有全氟烷基磺酰亚胺结构的离子液体预热至60～90℃，然后加入含铝化合物，搅拌混合均匀后降至常温；然后将反应体系置于N2氛围下，常温下反应6～24h，使其相互反应生成配合物，得到用于催化Friedel?Crafts烷基化反应的催化剂。本发明方法制备得到的催化剂用于合成Friedel?Crafts烷基化反应，如苯与1?十二烯合成十二烷基苯的反应，该催化剂具有活性高，2?直链烷基苯（2?LAB）选择性较高，使用条件温和，可以通过简单方法回收，且循环性好的特点。

本发明公开了一种基于铁的用于烷基化反应的催化剂的制备方法。该方法是先将具有全氟烷基磺酰亚胺结构的离子液体预热至60～90℃，然后加入含铁化合物，搅拌混合均匀后降至常温；常温下反应6～24h，使其相互反应生成配合物，得到用于催化Friedel‑Crafts烷基化反应的催化剂。本发明方法制备得到的催化剂用于合成Friedel‑Crafts烷基化反应，如苯与1‑十二烯合成十二烷基苯的反应，该催化剂具有活性高，2‑直链烷基苯（2‑LAB）选择性较高，使用条件温和，耐水性好不易水解，可以通过简单方法回收，且循环性好的特点。

本发明公开了一种制备咪达那新片剂的方法，取处方量的填充剂、崩解剂和粘合剂，混合均匀，得辅料备用；将处方量的咪达那新和助溶剂分散溶解于无水乙醇中，得主药备用；将主药均匀喷洒在辅料中，加入润滑剂，混合均匀，测定中间体含量，压片，即得。本发明的咪达那新片剂制备方法采用喷枪将主药喷入预先混合好的药用辅料中，很好的解决了片剂在药物含量低的情况下的均匀度问题，此外，采用低水分的填充剂作为咪达那新片的填充剂无需烘干工艺直接压片，该直接压片工艺较湿法制粒、流化床、沸腾制粒、喷雾干燥等工艺更简单易行，适合工业化生产，有利于产品质量的控制和节能降耗，降低生产成本，具有很好的实用性。 

本发明涉及一种超声波处理胆汁的方法.该方法包括下列步骤:首先用不锈钢刀子破胆,将胆汁放入烧杯中,采用200目的滤布过滤,滤液40摄氏度水浴上热10分钟,然后将滤液放在超声波药品处理机内利用超声波处理,超声波输出功率为320±20W,超声波处理的频率为68KHz～72KHz,超声波处理的时间为15min～25min,超声波处理的温度为25℃～35℃,最后检测处理后胆汁中胆红素的含量.该超声波提取法优点是提取时间短,温度较低,收率高.

本发明公开了一种农杆菌介导的小对叶遗传转化方法.本发明所公开的农杆菌介导的小对叶遗传转化方法,包括如下步骤:以小对叶的叶片为外植体,用处于对数生长期的,OD600值为0.4-0.6的目的农杆菌菌液侵染所述外植体5-10分钟;所述目的农杆菌菌液的OD600值优选为0.5,所述侵染的时间优选为7分钟.用本发明方法对小对叶进行遗传转化,得到的抗性芽率为7.5%,表明本方法转化效率高.因此,本发明方法为使外源基因在小对叶中稳定表达奠定了基础,对小对叶的遗传改良有十分重要的意义.