具有内毒素吸附能力的耶氏酵母和内毒素减毒大肠杆菌
研发有效的内毒素 LPS 脱毒方法具有重要意义,本项目一方面通过 KDO 定量方法检测对 LPS 分子的吸附能力,从发酵食品中筛选到 LPS 吸附能力最强酵母菌株 CSW。证实 LPS 与 Y. lipolytica 细胞共存一段时间后,会产生 LPS 含量降低的现象。通过 18s r DNA 分析,菌株 CSW1 与 1.0 mg/m L 来源于 E. coil O111:B4的 LPS 共存后,可使 LPS 水平降低约 70%,而 S. cerevisiae BY4742 仅使 LPS含量近 30%。 另外一方面,过敲除大肠杆菌 E. coli 染色体基因上与 LPS 合成相关基因,构建了多株能够直接合成新型特殊结构 Kdo2-lipid A 的突变菌株,具有低内毒素,适合用于大肠杆菌表达宿主生产各种蛋白及氨基酸。 关键技术 脂多糖 LPS 是存在于大多数革兰氏阴性菌外膜的主要组成部分,可通过激活宿主细胞内 TLR4 受体信号转导途径等,促进炎性细胞分泌多种细胞因子,进而引发强烈的免疫反应,造成疾病或者死亡,在食品和药品中是重要的毒力因子,因此研发有效的 LPS 脱毒方法具有重要意义。本成果获得了食品级的 LPS 脱毒菌株,具有应用前景。工业发酵中大肠杆菌野生型菌株中内毒素释放,是导致热原污染的重要原因,这增加了分离纯化成本,本成果从源头改造获得低毒性的大肠杆菌平台菌株,避免了发酵工程中热原产生
江南大学
2021-04-11