课题组对六例多灶肝癌患者共34个病灶进行了高深度全外显子测序，发现多灶肝癌大部分来源于肝内转移，共享部分突变；进一步的进化树分析显示每个病灶又呈现出相对独立的克隆进化模式，且仅有20%靶向药物的作用靶点位于进化树的树干，即为所有病灶所共有，其中，仅有一位患者的索拉非尼敏感靶点位于进化树的树干，提示该患者所有病灶理论上可对索拉非尼治疗产生应答，从而揭示了多灶肝癌因克隆进化引起的药物靶点分布不均的特点，为预防多灶肝癌患者术后复发的精准靶向治疗提供了理论依据。       同时，该研究通过转录组测序数据首次分析了多灶肝癌免疫微环境的差异，发现即使是同一患者，不同病灶浸润的免疫细胞成分及数量均存在明显差异。基于特征性免疫相关基因的表达水平进行无监督聚类分析，可将病灶分为高免疫和低免疫两种亚型，并观察到高免疫性肿瘤同时伴有PD1等抑制性免疫分子的高表达，提示此类患者更可能从PD1单抗治疗中获益，为肝癌免疫治疗获益人群的筛选提供了依据。

团队对12例多灶肝癌患者的45个肿瘤样本及对应癌旁正常组织进行了全基因组测序、全外显子测序及RNA测序。研究发现同一患者的大癌灶和小癌灶的基因组特征存在极大的相似性，包括相同的HBV-DNA整合位点，相似的染色体结构变异、突变特征及拷贝数变化情况，提示12例多灶肝癌患者的大癌灶和小癌灶属于肝内转移瘤。该团队进一步分析45个癌灶的免疫微环境，发现同一患者中，与大癌灶相比，小癌灶具有更多的免疫细胞浸润，免疫活性刺激因子以及预测PD-1抗体治疗疗效的干扰素相关特征在小癌灶中表达上调。免疫相关通路在小癌灶中富集，而增殖及血管生成相关通路在大癌灶中更富集。此外，大部分小癌灶呈现sia分型中的“免疫反应亚型”。这些结果表明，同一肝癌患者的小癌灶比大癌灶具有更活跃的免疫状态。     为进一步探讨不同大小的癌灶对PD-1抗体治疗是否具有不同的治疗响应，该团队对8例接受PD-1抗体治疗的多灶肝癌患者全部癌灶的免疫治疗应答情况进行评估。结果发现其中5例多灶肝癌患者的大癌灶和小癌灶对PD-1抗体治疗存在混合反应，均体现为小癌灶具有更好的免疫治疗疗效——PD-1抗体治疗后，小癌灶平均缩小46.3%，而同一病例的大癌灶平均增加14.9%。

通过检测少量血液中ctDNA特定位点甲基化水平，对肝癌进行早期诊断及疗效和预后预测的新方法。ctDNA相当于肿瘤细胞释放到血液中的身份指纹，由于其携带有与原发肿瘤相一致的甲基化改变，理论上可以利用ctDNA的甲基化谱对肿瘤进行诊断，这一被称为“液体活检”（Liquid Biopsy）的新技术已经成为当前肿瘤研究领域的热点之一。但是，ctDNA在血液中的含量极微，每毫升血中仅有约20ng，相当于一滴水的一亿分之一，并且混杂在更大量的正常游离DNA背景中，在这么微量的ctDNA中检测单个碱基的甲基化水平，好比在机场和火车站的数百万人流中找到个别犯罪分子，其难度可想而知。先后攻克了稳定提取微量ctDNA、提高重亚硫酸盐转化效率、靶向甲基化PCR扩增及测序、海量数据的统计学分析处理等一个个技术壁垒，终于从40多万个候选位点中分别寻找到10个早期诊断和疗效相关以及8个预后相关的位点，就像是破获了肝癌的“身份指纹”，让早期的肝癌病灶也无所遁形，实现肝癌早诊早治技术的关键突破。

灶面尺寸φ400mm×350mm，金属制品，表面镀亮膜，焦点位置可调。

本项目拟研发肿瘤特异荧光增强核酸递送体系，该体系的制备及产业化将有助于开发原发性肝癌早期诊断的新材料和新方法，提供肿瘤的荧光成像及术中导航的新产品和新思路。

本项目提供了一种靶向肝癌细胞的纳米药物（LTAG-NPs）。该药 物以天然多糖搭载临床广泛使用的铂类抗癌药物，具有合成简便，成 分友好的特点，通过与肝（癌）细胞发生特异性结合，实现肝癌靶向 效果。药物在肝部高效富集并在肿瘤细胞中释药。因此，LTAG-NPs 在有效抑制肿瘤生长的同时，明显降低传统化疗药物强烈的毒副作用， 提高患者顺从度和安全性。具有较高临床应用价值和转化前景。 体外释药实验表明，在肿瘤细胞环境下，LTAG-NPs 4 小时释放 药物超过 20%，6 天药物全部释放，既在 6 天内缓慢持续释药；药物 代谢实验证明，LTAG-NPs 在注射小鼠体内 24 h 后仍保持较高药物 浓度，具有血液长循环效果；生物分布实验证明，纳米药物在肝部的 富集是传统化疗药物的 5-6 倍，明显降低了在肾脏的积累；对于同时 种有肝异位瘤和肺异位瘤的小鼠，LTAG-NPs 在肝异位瘤的富集量为 肺异位瘤的 2.5 倍，说明具有优异的肝肿瘤靶向能力。体内抑瘤实验 证明，纳米药物具有与传统化疗药物相当的抑瘤效果但毒副作用明显 降低，尤其是明显降低了肾毒性。大剂量注射传统化疗药物的小鼠在 5 天内全部死亡，而纳米药物组则保持存活率 100%，且小鼠体重稳 步上升，体征良好。 以上动物实验全部由医院完成并进行相关评价

 高志良教授团队与双聘教授邝栋明教授团队合作，在“十三五”国家科技重大专项和国家自然科学基金重点项目等基金的支持下，发现了PD-L1+肝癌免疫微环境存在高度的异质性。研究证实巨噬细胞和T细胞释放的炎性介质均参与了PD-L1+肝癌形成，但巨噬细胞同时赋予了PD-L1+肝癌可抵抗传统化疗、T细胞杀伤和免疫检查点治疗的特征。联合免疫检查点治疗和巨噬细胞功能调控有望成为新型的肝癌治疗策略。同时，上述主体研究结论同时在多种人类肿瘤中得到验证。

本研究将构建重组溶瘤腺病毒，以期达到治疗实体肿瘤（肝癌）的目的。在肿瘤局部，利用溶瘤腺病毒诱导的炎症引起免疫细胞浸润。同时病毒可以感染并裂解肿瘤细胞，导致肿瘤相关抗原释放。而重组溶瘤腺病毒可以同时使被感染的细胞表达免调控融合蛋白PD1CD137L，在活化T 细胞的同时封闭肿瘤表面PD-L1 传递的负向信号。最终使得机体的免疫细胞能够识别肿瘤抗原，并产生特异性抗肿瘤免疫应答，最终达到清除肿瘤的目的。

山东昌邑灶户盐化有限公司成立于2003年10月，公司地处山东半岛蓝色经济区、胶东半岛高端产业聚集区和黄河三角洲高效生态经济区的汇聚地带--渤海莱州湾南岸，位于昌邑市滨海经济开发区中心，是以生产销售原盐、溴素、染料及医药中间体为主的盐及盐化工企业。公司下设盐场、溴素厂二个直属生产单位，五家子（合资）公司，现有员工1500余人，资产总额10.7亿元。公司主要产品及产能：原盐40万吨/年、溴素3000吨/年、染料及中间体7万吨/年、医药中间体3万吨/年。染料及医药中间体生产技术和产品质量在同行业中处于优势地位。其中，2,4-二硝基-6-溴苯胺、2,4-二硝基-6-氯苯胺、2,6-二溴-4-硝基苯胺、2,6-二氯-4-硝基苯胺市场占有率全国最大。 公司是中国无机盐工业协会溴及化合物分会副会长单位、山东省溴业协会会长单位、山东省盐业协会副理事长单位，“昌飞”标识评为“山东省著名商标”。公司建有省级企业技术中心，与潍坊学院、潍坊职业学院等高校合作建立化工技术产学研基地。建立完善的技术创新体系、产品质量保证体系和安全生产标准化管理体系，并将标准化管理贯穿于公司整个工作流程。 公司先后获得全国矿产资源开发整合先进矿山，中国轻工业制盐行业十强企业，山东省创新驱动发展能力百强企业，山东省守合同重信用企业，山东省诚信企业，山东省热心慈善事业先进单位，山东省盐业系统先进单位，潍坊市工业百强企业，潍坊市特级诚信民营企业，潍坊市劳动关系和谐企业等荣誉称号。 公司坚持“品质为本、精益求精”的生产宗旨，秉承“诚信共赢、创新发展”的经营理念和“以人为本，追求卓越”的管理理念，坚定不移地实施品牌战略，向客户提供优质的产品。坚持以雄厚的科研技术和自主研发能力引领市场，以先进营销理念和全方位的服务体系占据市场，使灶户盐化品牌在市场上有良好的口碑。 公司按照“产品结构优良，经济效益显著，市场竞争力强，担当社会责任，持续健康发展”的目标要求，坚持实施新旧动能转换，加快转型升级，走可持续发展之路。坚守经济利益与社会利益并驾齐驱，发展绿色化工，承载社会责任，以优秀的企业文化促进员工与企业、企业与社会的和谐共赢，以此追求企业的持续健康发展。 公司诚愿与新老客户精诚合作,共求发展，共创辉煌！ 地址：山东省昌邑市柳疃镇青乡北      网址：www.zaohuyh.com  电话∕传真：0536—7802039 （营销部）  0536—7802080 （办公室） 邮箱：zhyhbgs@163.com                邮编：261303