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肽抗生素开发与研究 ——利用大肠杆菌表达兔防御
项目研究背景 :抗菌肽是在某些诱导条件下,由动植物体内防御系统 产生的对抗外源性病原体致病作用的防御性阳离子多肽类抗菌活性物质。 抗菌肽具有特殊的抗菌机理和广谱高效的抗菌活性。天然抗菌肽获取困 难,主要是采用基因融合的方式进行外源表达。利用生物技术表达、改造 抗菌肽,提高抗菌肽抗菌活性,从而开发出对人体和环境安全无毒的食品 防腐剂和农药产品,还可开发出一类新的抗生素产品。 技术性能 :本研究在国内首次报道利用大肠杆菌
南昌大学 2021-04-14
重组大肠杆菌生产磷脂酶D及转酯化产品开发
磷脂酶D(PLD,EC 3.1.4.4)是一类广泛存在于各种生物体的酶,具有水解作用和磷酰基转移作用(见图1)。作为一种酶制剂,PLD的转磷脂酰活性尤为重要,被用于制备具有生物活性的稀有磷脂。其中,以大豆磷脂酰胆碱(PC)为底物,PLD酶法制备磷脂酰丝氨酸(PS),受到广泛关注。PS作为脑健康营养补充剂,相继被美国FDA、日本HBM和中国国家卫生计生委所认证,列为新资源食品。相较于提取自牛脑和植物的PS,生物酶法制备的PS,避免了食品安全和植物源含量低的问题。进一步,一些新的结构和功能磷脂,通过PLD转磷脂酰反应被合成出来,例如,磷脂酰鲨肝醇、磷脂酰葡萄糖、心磷脂类似物、磷脂酰酪醇、磷脂酰萜烯和磷脂酰丝氨醇,它们中一些具有抗癌和抗氧化活性。 直到现在,受限于磷脂酶D来源不足和价格高(链霉菌属PLD,≥150 units/mg,6516.9¥/1000 U,Sigma公司),其工业上的广泛应用受到限制。例如,文献报道的PLD最高产量在104-105U·L-1,而制备转化得到每公斤PS,需要2.6×106U的PLD。这一障碍的主要原因是高水平表达的PLD对宿主的严重细胞毒性,导致细胞死亡。 历经5年时间,从上游到下游整体设计,我们解决了毒性蛋白(磷脂酶D,PLD)异源表达难的问题(质粒不稳定、蛋白合成时间短、细胞生长抑制和裂解),PLD生产达到目前世界最高水平106U·L-1(748 mg·L-1)(提高20倍);同时发展一种简单有效提取重组磷脂酶D的方法(无需破碎、无需添加溶菌酶和有机溶剂、室温进行),PLD生产成本有望降低20倍以上。按照实验室规模的一台5 L发酵罐,年产量可以提供3.5×108U的磷脂酶D,满足100 kg的PS转化需求计算(不计算PLD重复利用率),扩大反应器体积至100-1000 L,PLD产量可满足制备2-20吨PS的需求。
厦门大学 2021-01-12
核受体PXR调控肝脏增大与肝再生
在Pxr基因敲除小鼠、hPXR转基因小鼠、小鼠部分肝切除等动物模型上确证PXR及其激动剂对肝脏增大及再生的作用;并运用AAV-Tbg-cre,Rosa26EYFP小鼠和Sox9-CreERT, Rosa26EYFP 小鼠及各种细胞免疫染色和标记方法,揭示PXR肝增大与促再生作用所涉及的肝脏细胞类型与变化。同时,应用免疫共沉淀和共定位等方法证明PXR与YAP的蛋白相互作用及调控,并在AAV Yap shRNA小鼠等动物模型上确证PXR促进肝增大是YAP依赖性的,从而明确YAP在PXR所致肝增大中所起的关键作用。该研究证实了激活PXR可以影响YAP及下游靶基因表达,可与YAP共激活入核,导致肝细胞和肝脏增大,促进肝细胞增殖、促进hybrid hepatocyte (HybHP)生成与增殖的作用,首次揭示PXR通过YAP信号通路促进肝增大与再生的新作用与新机制,为PXR调控肝脏大小及肝脏细胞的作用提供新观点与新数据,为PXR作为肝再生潜在靶点提供科学证据。
中山大学 2021-04-13
一种体外肝灌流装置及其用途
本发明公开了一种体外肝灌流装置,它包括由3个灌流液储存容器构成的灌流液储存容器组、四通管、灌流泵、热交换系统、氧合器、去泡器、灌流导管、三通管和回流泵。本发明的装置可以对离体肝脏进行三步肝灌流,最大限度地快速、连续进行前灌流液和消化液的有效灌注,最大程度地质控消化肝组织过程,节约成本,恒定温度,减少污染,从而保质保量的获得实验与临床所用的肝细胞,尤其是肝细胞移植、生物人工肝等所需的大量肝细胞。
四川大学 2016-10-12
脾、胰、肝、十二指肠解剖模型
XM-503C肝、胆、胰、脾、十二指肠解剖模型   XM-503C肝、胆、胰、脾、十二指肠解剖模型显示肝的外形及固有韧带(包括肝冠状韧带、镰状韧带左右三角韧带以及肝圆韧带)、肝的左叶、右叶、方叶、尾叶及肝门处诸结构(右前方的左、右肝管和肝管、 左前方的肝固有动脉和左右支、与其后方门静脉的位置关系)显示下腔静脉末端、胆囊、胆囊体、胆囊颈、胆囊管并与肝总管合成胆总管,胰的形态、结构(胰头、胰体、胰尾、胰大、小管),十二指肠下部、降部、下部、升部及十二脂肠乳头,门静脉、胆总管、肝固有动脉及总管与胰腺大管汇集开口于十二指肠乳头等结构。 尺寸:自然大,25×13×26cm 材质:PVC材料
上海欣曼科教设备有限公司 2021-08-23
菌糠饲料加工技术
中国是食用菌生产大国,据2009年的统计数据表明,2008年全国食用菌产量约为1730万吨,占全世界总产量的70%以上。绝大多数菌糠仍然是废弃或进行就地燃烧,这样既浪费了资源又污染了环境。铜山县是食用菌生产大县,县域内的三堡镇徐村被评为“中国金针菇之乡”,菌糠资源丰富。江苏东宝粮油集团有限公司和江苏省药用植物生物技术重点实验室联合开发利用菌糠替代部分粮食原料生产生物饲料项目。菌糠的合理利用延长了食用菌种植的生物循环链条,菌糠的再利用不仅能综合利用资源,而且可以消除环境污染,节省开支,提高经济效益、社会效益和生态效益。合作单位:江苏省药用植物生物技术重点实验室、东宝粮油有限公司
江苏师范大学 2021-04-11
食用菌栽培技术
依托山东省食用菌体系岗位专家程显好教授团队,采用细胞工程育种、核辐射技术育种和分子标记技术育种等先进育种技术,培育了牛樟芝、桑黄、白鲍菇、黑鲍菇、杏鲍菇、姬松茸、舞茸菇、榆黄菇、鸡腿菇、黄伞、羊肚菌等多种优良菌株,筛选高产高效栽培模式16个。其中通过原生质体融合、紫外诱导、交配型基因检测及田间实验筛选,培育出3株高耐盐耐碱的羊肚菌品种,分别为Mel-2、Mel-7、Mel-22,在全省开展示范推广300多亩,亩产量均在350kg左右,取得了较好的经济效益和社会效益。 同时,本团队首次从台湾引进珍稀药用菌牛樟芝,省内利用苹果木栽培牛樟芝获得了成功,其主要药用成分与牛樟木栽培相同,这对牛樟芝的开发及牛樟树的保护起到积极作用。 近三年,团队服务大型食用菌企业12家,服务烟台--巫山东西协作扶贫工作,服务莱山区院格庄街道郑家庄村农民合作社等新型农业经济体30余家,累计实现产值1.5亿元以上,解决就业岗位500个以上,经济效益和社会效益显著。
鲁东大学 2021-05-11
快速检测沙门菌活细胞
目前,沙门菌的检测主要还是采用传统的细菌学方法,通过前增菌、选择性增菌、分离培养、生化试验以及血清学鉴定的步骤一步一步进行检测,工作量大且耗时长。PCR及Real Time PCR等分子生物学技术虽然具有快速、简便等大量优点,却较少应用,主要原因是以DNA为模版的PCR及Real Time PCR技术并不能区分细菌的死活细胞,样品中存在的死细胞可能导致假阳性结果。本课题将EMA对死活细胞的鉴别作用与Real Time PCR的灵敏度、特异性相结合,有效克服了DNA分子检测手段不能鉴别死活细胞的弊端,在实现检测的快速、简便的同时大大提高了结果的准确性。确证了EMA-Real Time PCR可实现实际样品中沙门菌活细胞的快速测定,可将EMA-Real Time PCR推广到实际检测工作中,如此便可大大缩短检测所需的时间,节省大量的人力、物力。研究成果具有重大的应用前景。 社会效益:EMA-Real Time PCR可用于实际样品中沙门菌活细胞的快速检测,建立一种快速检测病原菌的新方法体系,用于实际的检测工作中,如此不仅可以减少食品安全日常监测的工作量,更重要的是,在突发性食物中毒事件中,大大缩短了病原菌检测所需时间,提高了反应效率,为突发性公共卫生事件的解决提供更好的技术平台。
四川大学 2016-04-15
技术需求:油菌分离提纯
我公司曾先后联合山东省农科院、鲁东大学等共同研究开发“野生鸡油菌驯化养殖关键技术”,每年都进行野生鸡油菌的采集、分离提纯等工作,但至今未驯化养殖成功。寻求产学研合作伙伴,共同研发野生鸡油菌分离提纯方法和防止杂菌感染的关键技术,实现野生鸡油菌工厂化规模养殖
威海鑫宝食品有限公司 2021-08-30
一种制备鸭疫里默氏菌前菌影疫苗的方法
本发明涉及一种利用噬菌体PhiX174的E基因和葡萄球菌核酸酶A基因转化制备鸭疫里默氏菌前菌影疫苗的方法与应用方法。该方案首先将噬菌体PhiX174的E基因和葡萄球菌核酸酶A基因通过柔性连接臂(Gly4Ser)3连接成串联基因,并进一步构建温控表达载体pBV-E-SN。将pBV-E-SN电击转化进入鸭疫里默氏菌原生质体,筛选阳性克隆28℃增菌培养。分离菌体加保护剂后分装、冷冻干燥。本发明所制备的活菌疫苗经饮水免疫,既可以刺激呼吸道和消化道黏膜的局部免疫,也可以激发体液免疫。
青岛农业大学 2021-04-13
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