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一种白血病单链抗体库及其构建方法和应用
本发明提供一种白血病噬菌体单链抗体库,以噬菌粒pCANTAB-5E为载体,库容达到1.5×109,经DNA测序证明其多样性良好。从该全人源白血病单链抗体库中,通过噬菌体展示技术,以特定的白血病相关抗原为靶标,经过多轮淘筛,可以方便地获得白血病细胞特异的全人源单链抗体。本发明提供的抗体库的库容量大,多样性良好;包含全套人类单链抗体的组合;单链抗体由重链可变区VH和轻链可变区VL通过连接肽(GGGGS)3连接而成,且含有完整的抗原结合部位。所述方法可操作性强,库容量大,可方便地筛选出对白血病特异的全人源单链抗体,这些全人源单链抗体可制备为靶向药物,用于白血病的治疗。
浙江大学 2021-04-13
具有内毒素吸附能力的耶氏酵母和内毒素减毒大肠杆菌
研发有效的内毒素 LPS 脱毒方法具有重要意义,本项目一方面通过 KDO 定量方法检测对 LPS 分子的吸附能力,从发酵食品中筛选到 LPS 吸附能力最强酵母菌株 CSW。证实 LPS 与 Y. lipolytica 细胞共存一段时间后,会产生 LPS 含量降低的现象。通过 18s r DNA 分析,菌株 CSW1 与 1.0 mg/m L 来源于 E. coil O111:B4的 LPS 共存后,可使 LPS 水平降低约 70%,而 S. cerevisiae BY4742 仅使 LPS含量近 30%。 另外一方面,过敲除大肠杆菌 E. coli 染色体基因上与 LPS 合成相关基因,构建了多株能够直接合成新型特殊结构 Kdo2-lipid A 的突变菌株,具有低内毒素,适合用于大肠杆菌表达宿主生产各种蛋白及氨基酸。 关键技术 脂多糖 LPS 是存在于大多数革兰氏阴性菌外膜的主要组成部分,可通过激活宿主细胞内 TLR4 受体信号转导途径等,促进炎性细胞分泌多种细胞因子,进而引发强烈的免疫反应,造成疾病或者死亡,在食品和药品中是重要的毒力因子,因此研发有效的 LPS 脱毒方法具有重要意义。本成果获得了食品级的 LPS 脱毒菌株,具有应用前景。工业发酵中大肠杆菌野生型菌株中内毒素释放,是导致热原污染的重要原因,这增加了分离纯化成本,本成果从源头改造获得低毒性的大肠杆菌平台菌株,避免了发酵工程中热原产生
江南大学 2021-04-11
一种地衣芽孢杆菌分泌的抗菌肽及其制备方法和应用
本发明公开了一种地衣芽孢杆菌分泌的抗菌肽及其制备方法和应用。所述的抗菌肽氨基酸序列为序列表SEQIDNO.1所示,分子量为1290.4道尔顿,等电点5.23。其制备方法是:硫酸铵沉淀培养基中地衣芽孢杆菌分泌的的抗菌肽,利用阴离子交换、分子筛层析和反向高效液相色谱法纯化抗菌肽。该抗菌肽具有显著的抗菌活性,且不会对猪的红细胞产生溶血作用,可用于开发制备饲用抗菌药物。
浙江大学 2021-04-11
一种用于鸡场大肠杆菌病防治的噬菌体制剂“杀菌王”
噬菌体是专门感染细菌的病毒,对宿主具有严格的特异性,大 肠杆菌的噬菌体只感染大肠杆菌。噬菌体通过对细菌的感染,并在其中进行自 身的大量繁殖,最终通过杀死宿主菌得到噬菌体的释放及再感染。大肠杆菌噬 菌体对细菌的杀伤不受细菌耐药性的限制,在宿主菌大量存在的条件下,噬菌 体的数量还可以快速增多,因此该噬菌体制剂对人畜及环境安全,是目前国际 公认的抗生素替代品及绿色环境消毒剂。由大肠杆菌噬菌体专利毒株与特定的 大肠杆菌菌株混合发酵制备成液体噬菌体制剂,制备技术先进、成本低、产品 安全、质量稳定,对鸡场环境消毒及鸡大肠杆菌病防治效果显著。 噬菌体制剂中的活噬菌体含量为 1×l08PFU/ml〜1×l09PFU/mL,4°C 保存。 大肠杆菌噬菌体制剂已在蛋鸡及肉鸡养殖场进行过环境喷雾消毒、饮水添 加等试验,喷雾消毒可明显降低环境中细菌总数及大肠杆菌数量,饮水添加可青岛农业大学科技成果介绍 2017 -31- 明显降低鸡肠道中大肠杆菌的数量,对鸡大肠杆菌病引起的下痢具有明显的止 泻效果。 该成果提供了一种噬菌体制剂及其制备技术,主要针对鸡大肠杆菌病的防 治。通过对致病性大肠杆菌具有广泛感染及杀菌作用的噬菌体进行环境消毒或 饮水、饲喂等方式,可减少环境及鸡体内致病性大肠杆菌的数量,降低鸡群感 染大肠杆菌病的风险。该噬菌体制剂用大肠杆菌作为宿主菌进行液体培养,制 备成液体无菌制剂,产品主要用于防治鸡大肠杆菌病。技术使用单位主要是肉 鸡养殖场、蛋鸡养殖场和生物制品厂。企业投资主要用于购置规模化微生物发 酵生产的设备,以及配套生产车间改建、原材料和人工等支出。如年产量 2000 吨,预计设备投入约 100 万元。 
青岛农业大学 2021-04-11
表达副猪嗜血杆菌表面抗原的猪霍乱沙门氏菌减毒疫苗
已有样品/n表达副猪嗜血杆菌表面抗原的猪霍乱沙门氏菌减毒疫苗。  成果简介:利用仔猪副伤寒商品疫苗菌株猪霍乱沙门氏菌C500作为宿主菌株,插入已经蛋白质组学方法筛选鉴定的副猪嗜血杆菌重要免疫原性基因,从而获得副猪嗜血杆菌-猪霍乱沙门氏菌二联基因工程疫苗菌株,重组疫苗菌株能够诱导机体产生良好的体液免疫、细胞免疫以及粘膜免疫,对小鼠的免疫与攻毒试验结果证实二联重组疫苗具有同时抵抗副猪嗜血杆菌病和沙门氏菌病的能力,具有良好的应用前景。  应用前景:副猪嗜血杆菌-猪霍乱沙门氏菌二联基因工程口服疫苗菌株对小鼠
华中农业大学 2021-01-12
华中科技大学智能超灵敏活细胞超分辨显微镜采购项目公开招标公告
华中科技大学智能超灵敏活细胞超分辨显微镜采购项目招标项目的潜在投标人应在线上方式获取,无须现场领购获取招标文件,并于2022年07月11日14点30分(北京时间)前递交投标文件。
华中科技大学 2022-06-21
消症饮在制备治疗痛经和子宫腺肌病药物中的应用
【发 明 人】高月平【技术领域】本发明涉及消症饮在制药中的新用途,具体地说是涉及消症饮在制备治疗原发性痛经、子宫腺肌病药物中的应用。【摘要】一种消症饮在制药中的新用途,即在制备治疗痛经和子宫腺肌病药物中的应用,消症饮是由鹿角片、白芥子、桃仁、熟地、淫羊藿、生薏苡仁、三棱、醋柴胡、大血藤、延胡索、按一定重量配比制成,该药物可制成汤剂、胶囊剂、片剂、冲剂、口服液、糖浆或合剂等,经临床试验结果表明,160例原发性痛经患者,分为治疗组和对照组,治疗组80例口服消症饮,对照组80例口服月月舒冲剂,结果,治疗组和对照组的总有效率为100%和72.5%;104例子宫腺肌病患者分为:治疗组64例口服消症饮,对照组40例口服桂枝茯苓胶囊。每月连服15天为一疗程,最多治疗6个疗程,结果治疗组痊愈34例,有效11例,总有效率100%,而对照组痊愈10例,有效22例,无效13例,总有效率71.1%。
南京中医药大学 2021-04-13
鉴定苹果抗、感炭疽菌叶枯病的SSR分子标记及其应用
本发明提出用于鉴定苹果抗炭疽菌叶枯病的SSR分子标记,所述分子标记分别为S0607039;S0607001;S0506206;S0506078,S0506001S0405195,S0405127,S0304673,S0304011。本发明还提出扩增用于鉴定苹果抗炭疽菌叶枯病的SSR分子标记的引物。本发明通过自行设计的SSR标记对苹果抗炭疽菌叶枯病基因进行了分子标记,确定所在的染色体位置及遗传距离,构建了紧密连锁的遗传图谱。距离抗性基因最近的分子标记能准确的鉴定出苹果对炭疽菌叶枯病的抗性,为苹果生产实践及抗性育种提供有效工具,并为下一步抗性基因的克隆及功能验证奠定了良好的基础。
青岛农业大学 2021-04-13
水产养殖动物重要细菌病诊断与免疫防控技术研究与应用
该成果 2011 年、 2013 年先后获连云港市科学技术进步二等奖、一等奖。项目实施的核心技术为水产养殖动物细菌病诊断技术与免疫技术,形成了较为完善的水产养殖动物疾病诊断和防控的技术体系。 包括(1) 环介导恒温扩增技术(LAMP),(2) 黄芪佐剂水剂型灭活疫苗及卵黄抗体疫苗。
扬州大学 2021-04-14
一种提纯大肠杆菌表达的重组黄曲霉尿酸氧化酶的方法
研发阶段/n本发明公开了一种从高效表达的基因工程菌中提取重组黄曲霉尿酸氧化酶的方法。该菌是携带重组质粒的大肠杆菌Rosetta(DE3),该重组质粒是含黄曲霉尿酸氧化酶uricase基因的质粒pET-30c(+)。用该菌生产黄曲霉尿酸氧化酶的方法包括四个步骤:A、工程菌发酵,累积胞内尿酸氧化酶;B、超声波破胞,离心收集上清液(含可溶性尿酸氧化酶);C、依次进行离子交换层析、疏水层析及凝胶过滤层析,收集活性峰;D、将活性峰冷冻干燥,即得高纯度的重组黄曲霉尿酸氧化酶。本发明的优点:生产重组黄曲霉尿酸氧化
湖北工业大学 2021-01-12
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