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γ-聚谷氨酸的微生物发酵生产
γ-聚谷氨酸（Poly-γ-glutamic acid）是一种重要的天然聚合物，由 于其具有良好的性质已被广泛应用于食品，化妆品，医药，材料等领 域。解淀粉芽孢杆菌（Bacillus amyloliquefaciens）LL3 是一株谷氨酸 非依赖型 γ-PGA 合成菌。为了提高其 γ-PGA 产量，项目组采用无痕 基因编辑技术对菌株进行了代谢工程改造。包括三部分：模块化代谢 通路改造；蔗糖代谢途径改造；谷氨酸合成途径改造。 B. amyloliquefaciens LL3 是项目组从发酵食品中分离得到，它能 够从蔗糖出发合成 γ-PGA。利用模块化通路改造策略对 γ-PGA 合成 相关的八个代谢通路进行改造包括：γ-PGA 降解相关途径；细胞呼吸 链；胞外蛋白及胞外蛋白酶合成途径；细菌多糖合成途径；次级小分 子代谢产物合成途径；细胞自诱导因子合成途径；谷氨酸合成途径以 及 γ-PGA 合成途径。最终整合获得的最优基因工程菌株 NK-anti-rocG （敲除了 epsA-O 操纵子（负责胞外多糖合成），sac 操纵子（负责果 聚糖合成），lps（脂多糖合成相关），pta（乙酸合成相关），pgdS（γ-PGA 降解酶），cwlO（细胞壁水解酶），luxS（AI-2 合成）以及表达 anti-rocG sRNA（抑制谷氨酸脱氢酶表达））γ-PGA 摇瓶发酵产量从 3.8 g/L 提高到 11.04 g/L，较对照菌株提高了 2.91 倍。γ-PGA 产物纯度也 从 78.6%提高到 95.2%。5-L 罐补料分批发酵实验得到 NK-anti-rocG 菌株产量可达 20.3 g/L。分子量 450,000 Dal，纯度 95%以上。 项目特色： 1. 菌种（Bacillus amyloliquefaciens）LL3 是谷氨酸非依赖型 γ-聚谷 氨酸合成菌株；发酵生产主要原料为蔗糖； 2. 补料分批发酵产量为：20.3 g/L。 3. 授权专利号为：ZL200810053900.7 市场应用前景： γ-聚谷氨酸（Poly-γ-glutamic acid）是一种重要的天然聚合物，由 于其具有良好的性质已被广泛应用于食品，化妆品，医药，材料等领 域。本项目采用谷氨酸非依赖型 γ-聚谷氨酸合成菌做为发酵菌种，以 蔗糖为原料发酵法生产 γ-聚谷氨酸，可产生巨大的经济效益和社会效 益。
南开大学
2021-04-13
微生物法生产天然香料α-松油醇技术
已有样品/n微生物法生产天然香料α-松油醇技术。 成果简介：α-松油醇(FEMA 3045)有稳定的丁香花、铃兰花等花香香气，是我国重要的出口香料品种，可用于调配柠檬、甜橙、桃子、柑橘等食用香精。α-松油醇天然存在于柑橘精油、松节油、桉叶油、迷迭香油等多种植物精油中，但在精油中的天然含量一般较低，因而实际使用的α-松油醇主要来源于化学合成。本成果突破现有技术以化学合成法生产α-松油醇的技术瓶颈，提供一种微生物法生产香料α-松油醇的方法，通过该法生产的香料属于天然香料，克服了化学合成法存在的安全性问
华中农业大学
2021-01-12
固定化微生物处理化工废水技术
(1) 针对有机化工废水毒性强、难生物降解的特征，通过非均相 Fenton 氧化，将难降解的污染物转化为易生物处理的物质之后与固定化微生物联用，提高有机化工废水效率和降低成本，探讨化工废水中典型有机污染物的催化氧化降解和生物降解的相互影响机制，对于控制化工废水对环境的污染具有重大的理论意义和实用价值；(2)设计制备磁性微纳米非均相 Fenton 催化材料，具有比表面积大、扩散阻力小、表面活性高等特性，能高效诱导产生羟基自由基，将难降解有机污染物降解为 CO2、H2O 和其他矿物盐，整个过程绿色、无二
兰州大学
2021-01-12
食品中微生物风险分析及监控技术
一、成果简介 食源性病原微生物目前是威胁我国食品安全的首要风险。通过分子生物学手段可快速、准确、廉价的检测病原微生物，但传统分子生物学技术在食品微生物检测中只能做到靶向检测和事后检 测，即在例行检查中只检测种类有限的常规病原微生物，而不在常规检测范围内的病原微生物在爆发食品安全事件后才进行检测，这种靶向性和后验性导致食源性病原微生物检测的遗漏和滞后。另 外，传统的分子生物学技术一次实
中国农业大学
2021-04-14
微生物菌制剂处理粪便、净化养殖水
微生物菌制剂处理禽畜粪便，使禽畜粪便无臭味，进一步把大分子有机物发酵降解为小分子有机物，使植物更容易吸收利用。在高温发酵阶段温度可达60～70℃，经过发酵处理的鸡粪变为无病毒、无虫卵、无害虫的卫生肥料。变臭粪为绿色食品生产的上等肥料，既改善环境又增加了有机肥资源。特别适合养鸡户多的县，或者大的养鸡厂，具有很高的经济效益、环境效益。微生物菌制剂净化养殖水，也可以净化景观用水，比如旅游地的湖泊、水库、河流受到污染，或者城市公园的水富营养化等都可以用本菌制剂治理，达到污水变清、保护水资源的
南开大学
2021-04-14
用于鼻咽癌诊断预后判断治疗效果评估试剂盒
鼻咽癌诊断的金标准是鼻咽镜下进行组织活检取材，之后由病理医生进行病理诊断。由于取材有创、 取材组织小、且依赖镜下肉眼观察，因此约有10%的患者在首次取材时诊断失败，医生和患者需面临再次 或多次取材、或随访观察的抉择。在此情况下，目前临床上缺乏特异性辅助诊断的方法用于参考。 EBV相 关的血清学指标（包括VCA-IgA、EA-IgA等）已纳入临床检测。但这些血清学抗体指标最大的缺点是不 能实时反映鼻咽癌发病和进展状况，且指标存在特异性以及灵敏度不足的问题，在临床上仅能提供有限参 考。
中山大学
2021-04-10
基于液体活检的ctDNA甲基化肝癌早期诊断试剂盒
中试阶段/n该项目研发基于液体活检的ctDNA甲基化肝癌早期诊断试剂盒、产品灵敏度高：扩增技术检出标本中极其微量的核酸，检测下限低至 ng 甚至 pg 级的痕量核酸，乃至一个细胞。能在细胞癌变之前检测出DNA甲基化异常，真正做到早期预警。也可用于手术后病人的个性化诊断DNA甲基化检测可以精确到单个碱基。CTC捕获和测序技术的飞速发展，保障了检测结果的精确性和特异性。(预期)成果的先进性或独特性：1.已经筛选得到了在肝癌组织中差异甲基化的DNA标志物。2.实验证实了该标志物的DNA甲基化
武汉大学
2021-01-12
耐多药结核病噬菌体快速诊断试剂盒研制
研制了耐多药结核病的噬菌体快速诊断试剂盒，可同时检测结核分枝杆菌临床分离 株和/或肺结核患者痰标本对 5 种抗结核药物（利福平、链霉素、异烟肼、乙胺丁醇、 吡嗪酰胺）的耐药性。全程只需 3 天时间，比常规方法缩短 4～8 周，与传统方法的诊 断符合率达 85％以上。
同济大学
2021-04-13
一种氧化损伤体外检测方法及检测试剂盒
本发明公开了一种氧化损伤检测方法及检测试剂盒。所述方法包括以下步骤：（1）采集尿样作为检验样品；（2）向检验样品中加入磷酸盐缓冲溶液，使得溶液 pH 值在 3.7 至 3.9 之间或 4.5 至 5 之间；3）加入品红显色剂，使得品红浓度在 0.04g/L 至 1.4g/L 之间，静置3～5min，根据溶液颜色深浅或 348nm 吸光值，按照溶液颜色越深或吸光值越大氧化损伤程度越高的原则，确定其氧化损伤程度。所述试剂盒包括磷酸盐缓冲液制备的缓冲剂、品红显色剂和比色卡；所述比色卡包括 5 种颜色分别对
华中科技大学
2021-04-14
一种痕量内毒素的快速检测方法和试剂盒
本发明提供了一种痕量内毒素的快速检测方法，可直接灵敏高通量地检测多种样品中痕量内毒素，并提供相应的试剂盒，该试剂盒人工抗体的 96 孔酶标板、内毒素标准品溶液、兔抗内毒素多克隆抗体(一抗)、辣根过氧化物酶标记的羊抗兔抗体(二抗)和化学发光试剂组成。该方法将集特异性样品预处理和 ELISA 检测于一体，人工抗体耐高温、酸碱和有机溶剂，可高效特异性分离和富集样品中的痕量内毒素，ELISA 则可特异快速地检测所富集的内毒素，结合高灵敏度的化学发光法，有效提高 ELISA 检测内毒素的灵敏度、准确性和稳定性
华中科技大学
2021-04-14