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基于CRISPR/Cas9基因编辑系统的载体组合及其应用
01.成果简介 CRISPR/Cas9是细菌在长期演化过程中形成的一种适应性免疫防御系统。其工作原理是crRNA通过碱基配对与tracrRNA结合形成tracrRNA/crRNA复合物，此复合物引导核酸酶cas9蛋白在与crRNA配对的序列靶位点剪切双链DNA。经过研究，通过人工设计tracrRNA/crRNA，改造形成具有引导作用的sgRNA，可以引导Cas9蛋白在多种细胞的特定基因组位点上进行切割、修饰，并最终实现基因突变、插入或缺失。因此，CRISPR/Cas9系统已经被广泛应用于基因编辑技术领域。 近年来，CRISPR/Cas9基因编辑系统在真核生物和原核生物中得到了广泛的应用。在大肠杆菌等革兰氏阴性菌中，用一个载体表达cas9基因，同时由于革兰氏阴性菌重组效率低，需要在这个载体上表达λ-RED重组酶；在另一个载体中表达sgRNA和用于同源重组的同源臂序列。两个载体都转入大肠杆菌中时，sgRNA介导Cas9蛋白切割基因组上特定序列，形成双链断裂，刺激同源重组的发生，从而实现基因编辑。 本项成果构建了适用于盐单胞菌的基于CRISPR/Cas9的基因编辑系统。该系统由两个载体组成：第一个载体表达Cas9基因，且不需要表达λ-RED重组酶，实际操作中不再需要诱导λ-RED重组酶的表达，简化了步骤流程；第二个载体表达sgRNA，并含有用于同源重组的同源臂序列。从而实现了基因编辑。本项成果的技术优势包括： （1）基因编辑时间由原有的20余天缩短到7-8天； （2）N个基因编辑时间由原有的N个月缩短到3+5N天； （3）无需表达λ-RED重组酶。 图1 盐单胞菌TD01进行基因编辑的流程示意图02.应用前景 本项成果可作为CRISPR/Cas9基因编辑系统的载体，广泛应用于基因编辑领域。03.知识产权 本项成果已申请1项发明专利。04.团队介绍 本项目为多团队合作项目，其中一个团队的负责人为清华大学教授，博士生导师，长江学者特聘教授，国家杰出青年基金获得者。主要研究方向为合成生物学、微生物代谢工程、生物材料、工业生物技术。已发表国内外高水平学术论文数十篇，申请专利70余项。05.合作方式 投融资。06.联系方式邮箱：zhangxinrui@tsinghua.edu.cn
清华大学
2021-04-13
一种应用于扫描电镜中的加热装置
本实用新型提供了一种应用于扫描电镜中的加热装置，该装置包括：样品坩埚、加热芯陶瓷、电热丝、热辐射屏蔽结构，样品坩埚布置于所述加热芯陶瓷的上端；电热丝以双螺旋的形式缠绕于所述加热芯陶瓷表面，且对加热芯陶瓷加热，电热丝的材料为掺杂钨丝；热辐射屏蔽结构包括内不锈钢屏蔽层、次外不锈钢屏蔽层、外不锈钢屏蔽层、上不锈钢屏蔽层、次上不锈钢屏蔽层以及屏蔽底座；内不锈钢屏蔽层、次外不锈钢屏蔽层、外不锈钢屏蔽层层与层之间均为真空，上述三层的直径比例由热损失方程确定。本实用新型提供的加热装置加热效率高、体积小、屏蔽效果好，克服了现有技术中加热装置影响扫描电正常工作的缺陷。
浙江大学
2021-04-13
具有横笛状多孔喷头的高压静电喷雾装置及应用
本发明涉及一种具有横笛状多孔喷头的高压静电喷雾装置及应用。高压静电喷雾装置包括注射泵、给液器、导液管、横笛状多孔喷头、高压电源以及接收板，注射泵将给液器中的溶液经导液管推压进入横笛状多孔喷头中，横笛状多孔喷头固定在接收板上方，高压电源与接收板共同接地，高压电源正极与横笛状多孔喷头相连；横笛状多孔喷头的出液孔的孔径为大小一致的圆孔，或为不同大小圆孔排列设置。本发明采用横笛状多孔喷头，有效提升了单位时间内微纳米载药颗粒的产量，利用不同大小孔交叉组合的方式，为同时生产多种大小的微纳米载药颗粒提供了解决方案；多个联合组装使用，能够有效提升载药颗粒的生产速度，有望实现微纳米载药颗粒的大规模工业化生产。
浙江大学
2021-04-13
治疗高雄激素性痤疮的外用中药组合物及应用
本发明提供一种用于治疗多囊卵巢综合征高雄激素性痤疮的外用中药组合物，由以下重量配比的原料药组成：蒲公英100-300份，全蝎?200-500份，紫草150-450份，土茯苓200-500份，金银花150-450份，蛇床子100-300份，黄柏100-300份。药物的制剂形式为洗剂。本发明药物组合物经临床研究验证了其治疗多囊卵巢综合征高雄激素性痤疮的安全性和有效性，组合物药味少，易于质量控制，同时成本低廉。可在制备用于治疗多囊卵巢综合征高雄激素性痤疮的外用药物中应用。
浙江大学
2021-04-13
一种具有保肝作用的化合物及其应用
【发 明 人】陶伟伟；段金廒；唐于平【摘要】本发明公开了一种具有保肝作用的新皂苷化合物。本发明通过对甘草化学成分进行系统深入研究，经过波谱和质谱数据分析表明从甘草根中分离得到一个新的三萜皂苷化合物。经过药理实验研究表明，本发明提供的三萜皂苷化合物，可显著降低CCl<sub>4</sub>致肝损伤模型小鼠、乙醇致肝损伤模型小鼠，D-氨基半乳糖致肝损伤模型小鼠血清ALT、AST活性及肝组织MDA含量，增强肝脏SOD活性，对肝损伤具有明显的保护作用，且经过毒性实验研究表明，本发明提供的具有保肝作用的新皂苷化合物未见显著毒性，可望开发成新的保肝作用的药物或保健品。
南京中医药大学
2021-04-13
在新能源动力电池回收领域的应用研究
相关成果在英国皇家化学学会期刊《Green Chemistry》发表题为“A novel method for screening deep eutectic solvent to recycle the cathode of Li-ion batteries”的底封面文章。随着锂离子电池在移动电子、储能、运输等领域需求的快速持续增长，锂离子电池在 3-6 年内会逐步退役并产生大量的固体废弃物，但落后的废旧锂离子电池回收模式造成了严重的资源浪费。团队基于电化学原理提出了一种新型快速、简单、准确筛选低共熔溶剂（DES）还原能力的方法。经筛选后发现了一种具有较强还原能力的 DES，该结果与密度泛函理论 Fukui 函数计算结果一致。采用该 DES 可大幅降低反应温度和缩短反应时间。经研究发现：1. DES 选择性提取有价金属过程与传统湿法过程不同，主要受电子扩散和溶剂扩散控制。DES 提取过程的反应表观活化能远高于酸法和氨法回收方法，解释了在 DES 提取过程通常需要较高温度。2. 钴离子在负载 DES 中主要以六配位的八面体结构 Co(urea)2Cl2 存在。3. 负载 DES，经“稀释-沉淀-煅烧”简单工艺可得到立方尖晶石型四氧化三钴。 环境学院博士后研究员王树宾博士为第一作者，张作泰教授为通讯作者，材料系卢周广教授及工学院院长徐政和院士为合著作者。该工作得到国家自然科学基金、深圳科学技术创新委员会、广东省高校珠江学者岗位计划等项目的支持。
南方科技大学
2021-04-13
激光三维动态聚焦振镜系统开发及应用
北京工业大学
2021-04-14
新型上转换荧光纳米材料的生物标记、检测及成像应用
传统荧光指示剂以有机染料和量子点晶体等下转换发光材料为主，而本项目申报的上转换荧光纳米材料是一 种全新的荧光材料。现有基于荧光的成像、检测技术所使用的都是下转换发光材料，与其相比，上转换荧光材料和技术有显著优势：光学性能独特、背景噪音低、灵敏度高、 光学稳定性好。目前对此新型材料的关注越来越多，可在很多领域取代传统发光材料设计新的产品，具有很大的市场发展空间。
中国科学技术大学
2021-04-14
一种阿霉素共载药系统、其制备方法及应用
本发明公开了一种阿霉素共载药系统、其制备方法及应用。所述阿霉素共载药系统，包括阿霉素活性成分和靶向载体；所述靶向载体其表面共价结合有靶向配体，并运载有小干扰 RNA，用于抑制癌基因表达；所述阿霉素活性成分占所述共载药系统质量百分比在 4％至8％之间；所述靶向配体占所述共载药系统质量百分比在 1％至 10％之间；所述小干扰占所述共载药系统质量百分比在 0.5％至 2％之间。其制备方法包括如下步骤：(1)制备叶酸配体的靶向偶联物；(2)制备阿霉素共载药系统前体；(3)制备阿霉素共载药系统。本发明提供的阿
华中科技大学
2021-04-14
一种色变助剂组合物及其制备方法与应用
本发明公开了一种色变助剂组合物，它包括以下重量份的组分：混合物5.0份～40份、增容剂0.2份～10.0份、载体聚合物50.0份～94.8份；所述混合物中，包括以下重量份的组分：金属粉末0.3份～10.0份、金属氧化物60.0份～75.0份、热塑性聚合物10.0份～39.6份。本发明提供了一种新的色变助剂组合物，能够大幅度提高标记与基体材料的色差对比度；特别是，加入二季戊四醇磷酸酯、甲基乙基次膦酸锌等作为促进剂后，色差的对比度更高；同时，本发明还提供了一种简便、易操作、产品质量好的制备色变助剂组合物的方法。
四川大学
2016-09-13