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一种新的探针制备方法
01. 成果简介 荧光原位杂交(Fluorescence in situ hybridization,FISH)是一种以荧光标记取代同位素标记而形成的新的原位杂交方法。其通过杂交探针序列及其荧光,能提供标记位点在细胞核内的空间位置信息,与基于染色质构象捕获(Chromatin Conformation Capture,3C)等各种生物技术(如4C,5C,HiC,ChIA-PET等)互补,成为研究染色质结构不可或缺的重要技术之一。 传统的荧光原位杂交技术一般以含有目标物种来源的一段完整基因组片段作为模板,通过生物酶的作用进行片段化,之后进行荧光标记做出杂交探针,再固定细胞中,通过碱基互补配对原理对特定的基因组片段进行荧光标记并成像,获得具体的核内空间信息。但是,传统的原位杂交技术受限于模板本身的特性,具有准备时间长、所需模板量大、基因分辨率低、克隆中含有重复片段、需要加入物种特异的Cot-1DNA等缺点。尤其是其分辨率低的特点(分辨率在百kb的数量级),让它在应用中受到了很大的限制。 本项成果提供了一种新的针对目标核酸靶标探针的制备方法(见图1),该方法比传统的FISH技术的分辨率提高了1-2个数量级(见图2),可应用于传统荧光原位杂交因分辨率不够而不能探测、或者被错误探测的地方。该成果的具体步骤(见图1)包括:(1)获取感兴趣的靶DNA序列;(2)使用转座酶将靶DNA序列进行片段化的同时,在片段化的DNA序列两端加上接头序列;和(3)利用所述接头序列,获取所述片段化的DNA序列,以产生探针。本项成果的技术优势在于:快速高效、模板需求量低、基因组分辨率高、且不需要Cot-1DNA。 图1 探针制备方法的具体步骤。 02.应用前景 本项成果是一种快速高效、模板需求量低、基因组分辨率高、且不需要Cot-1DNA的荧光原位杂交方法,可作为现有的传统荧光原位杂交技术的可选替代方案。尤其是该方法的分辨率高,比传统的FISH技术的分辨率高1-2个数量级(见图2),因此可应用于传统荧光原位杂交因分辨率不够而不能探测、或者被错误探测的很多地方。 例如,在基因组的三维结构中,TAD(拓扑结构域)是结构和功能的基本单元。TAD内部和TAD之间的增强子和启动子发生的错误的相互作用,是一些癌症发生的根本原因。而传统的FISH技术因为分辨率的限制,探测不到这些错误的相互作用。因此本项成果在临床有着广泛的应用,可以用于癌症及一些其它疾病的极早期检测。 图2  相比于传统的BAC FISH(图上方绿条,长度为152kb),仅用1.170 kb(红条)长的TN5探针,就可以得到要标记的基因组位点的图像。 图中细胞核(蓝色)中,红色和绿色的点相互重叠,说明Tn5 FISH可以用传统的BAC FISH进行验证。黄色箭头表示用Tn5 FISH(红色通道,左上角插入图)或BAC- FISH(绿色通道,左下角插入图)进行成像。图中比例尺为5μm。03. 知识产权 本项成果已申请1项国内发明专利,目前正在申请国际专利。04. 团队介绍 本项目团队负责人为清华大学教授、博士生导师,国家首批千人。团队的主要研究方向涉及:生物信息学和基因组三维结构新方法的开发,利用细胞超分辨率成像、分子成像和生物信息学的方法进行基因组三维结构和系统生物学的研究选。团队负责人曾多次主持或参与美国NIH的R01科研项目、中国国家自然科学基金及科技部的科研项目,已发表高水平学术论文200余篇。05. 合作方式 专利许可、合作开发。06. 联系方式 邮箱:zhangxinrui@tsinghua.edu.cn
清华大学 2021-04-13
一种煤的脱碱方法
本发明公开了一种煤的脱碱方法,包括以下步骤:(1)将待脱碱 的原煤进行破碎,得到煤粉;(2)将步骤(1)中得到的煤粉与洗脱液进行 混合,得到煤水混合液,所述洗脱液为水溶性有机溶剂的水溶液,其 中水溶性有机溶剂的体积分数在 5%至 20%之间;(3)向步骤(2)中得到 的煤水混合液通入含二氧化碳的气体,在 20~60℃下搅拌浸洗 3~24 小时,使得二氧化碳过量;(4)将经步骤(3)处理的煤水混合液进行固液 分离,得到的固形物干燥后即为脱碱煤。本方法脱碱效果好,反应条 件温和,工艺简单,成本低廉。
华中科技大学 2021-04-13
一种矿用除尘装置及方法
本发明公开了一种矿用除尘装置及方法,该装置包括矿物输送单元和水气雾化单元,矿物输送单元包括依次相连的高位输送机、第一密封软帘、破碎入口溜道、破碎装置、矿物出口、连接溜道、第二密封软帘和低位输送机;水气雾化单元包括压力气源、压力水源、喷雾控制器及四个气水雾化喷嘴,喷雾控制器一端与压力气源、压力水源相连,另一端通过压力气管路和压力水管路与四个气水雾化喷嘴相连,其中两个气水雾化喷嘴设于破碎入口溜道上端,喷雾方向顺着矿物输送方向,另两个气水雾化喷嘴设于连接溜道下端,喷雾方向与矿物输送方向相反。本发明可有效解决现有除尘装置和方法实用性不强,容易造成二次污染的问题,具有简单可靠、可避免环境污染等优点。
华中科技大学 2021-04-13
改进的苦参薄层色谱鉴别方法
本专利(专利号:ZL201310124826.4 ,发明人系荣昌校区教师,长期从事新中兽药的硏发),首次提供了 一种改进的苦参薄层色谱鉴别方法,供试品溶液的制备简单、省时;苦参碱、氧化苦参碱和槐定碱三种组分 能够在同一薄层板上展开;单一显色剂显色,显色斑点清晰,保留时间长,结果易于判断,且显色剂能够长 期保存使用。根据2010版兽药典中所叙述的通过薄层色谱鉴别方法对苦参的指标成分苦参碱、氧化苦参碱和 槐定碱来判断苦参的真伪,存在以下问题:(1 )供试品溶液的制备采用浸泡法,耗时较长(约需12小 时),指标成分溶出率较低;(2)薄层色谱鉴别需用到两块薄层板,三种展开剂,两种显色剂,进行三次展 开操作和四次显色操作,且两种展开剂的配制需要在10°C以下放置,显色剂碘化祕钾试液在常温下保存易产 生沉淀,需现配现用,整个过程繁琐、耗时;(3)该方法的显色原理实际是先用碘化祕钾试液进行显色,再 用亚硝酸钠乙醇试液进行脱色,在显色和脱色时剂量较难控制,容易造成显色过深或者脱色过度,影响对结 果的判断。
西南大学 2021-04-13
桑柏生发搽剂及其制备方法
【发 明 人】吴承艳;吴承玉 【技术领域】  本发明涉及一种治疗脱发病的搽涂的外用药水,特别是一种用医用酒精浸泡中药的用于治疗脱发而有利于生发的外用搽剂。 【摘要】  本发明的桑柏生发搽剂,其有效成分的原料中的主要药物成分为冬桑叶和黄柏,故称桑柏生发搽剂,辅以蔓荆子、升麻、旱莲草和地肤子等中草药,用医用酒精浸泡后进行过滤而得到的清澈透明的药液即为本发明的桑柏生发搽剂。具有配方科学、疗效显著、使用方便、价格便宜、无毒副作用等优点,使用时,用药棉沾搽剂在脱发处反复搽涂,每天2~3次,一般4天后即能见毛孔凸起,新发逐渐长出,且能消脂、祛屑、止痒,更能控制复发。
南京中医药大学 2021-04-13
高性能自发荧光断层成像重建方法
北京工业大学 2021-04-14
聚苯胺纳米粒子合成方法
本方法制得的聚苯胺纳米粒子粒径均匀、排列规则,粒径在 50~100nm。
扬州大学 2021-04-14
一种光刻掩模优化设计方法
本发明公开了一种光刻掩模优化设计方法,该方法首先依据表征掩模的网格格点尺寸大小对掩模进行分级,在粗网格上快速求解掩模,然后对在粗网格上求解得到的掩模进行插值传播到下一级较细网格上进行细化校正,最终实现了掩模的快速优化。
华中科技大学 2021-04-14
一种同轴喷头制作方法
本发明属于微流体打印技术领域,并公开了一种同轴喷头制作 方法,包括以下步骤:1)将内针管的一端插入外针管并且使内针管的另 一端外露于外针管,则所述内针管与外针管共同形成嵌套针管组合体; 2)向容器内倒入液态的、可固化的聚合物,然后将嵌套针管组合体水 平放入所述聚合物中;3)使所述聚合物固化成型;4)将所述喷头坯体从 容器内取出并切割,将所述外针管取走;5)在聚合物上打孔以作为同 轴喷头的外通道入口,所述外通道入口与所述同轴喷头的外层流体通 道连通。本发明可以实现高精度的内外通道中心对齐,且
华中科技大学 2021-04-14
无间隙的车联网协助下载方法
本发明公开了一种无间隙的车联网协助下载方法,本方法使用数据下载服务的目标车辆在高速公路 行驶过程中,当入一个 AP 通信范围内,AP 将目标车辆未能完成的下载任务,依据车速、任务大小以及 DA 距离等信息进行分解,并分别委托行驶方向上的最近两个 AP 协助下载;一组经过优化选择的协助 车辆从协助 AP 获得数据,并在 DA 区转交给相遇的目标车辆;本方法实现了目标车辆在整个 DA 区无 间隙地获得数据,解决了间歇式接入 Internet 所带来
武汉大学 2021-04-14
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